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国家自然科学基金(30471595)
作品数:
4
被引量:3
H指数:1
相关作者:
马绍辉
刘建生
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朱艳菊
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刘建生
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1篇
2015
2篇
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1篇
2008
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人埃可病毒20型KM/EV20/2010分离株的全基因组序列分析
2015年
目的对人埃可病毒20型(EcH020)KM/EV20/2010分离株全基因组进行序列测定,并分析其分子变异和进化特点。方法设计针对KM/EV20/2010引物,提取病毒RNA,RT-PCR扩增和序列测定获得全基因序列。利用Mega4.1、RDP3和SimPlot3.5.1软件分析全基因序列。结果KM/EV20/2010病毒株基因组全长7395bp个核苷酸(nt),5’端和3’端分别为744nt和96nt的非编码区,5’和3’非编码区间为一个6549rlt长的开放阅读框,编码一个含2183个氨基酸的多聚蛋白,编码区内未见核苷酸的插入或缺失。与GenBank中现有唯-1株ECH020JVl-1原型株全基因组序列相比对,核苷酸同源性为80.1%,氨基酸同源性为96.7%;构建基于全长VP1基因序列的进化树图并进行基因分型分析,ECH020可分为6个基因型,中国分离株分属Ⅲ和Ⅳ基因型,其中KM/EV20/2010属于基因型Ⅳ,且6个基因型之间核苷酸的差异为9.4%-21.7%。基于全基因组序列的种系进化分析提示KM/EV20/2010分离株与ECH020原型株JV-1遗传距离很远,未与原型株JV-1聚簇分布,而与ECH030病毒株遗传距离较近。分析发现KM/EV20/2010序列在非结构区可能存在重组。结论中国ECH020可分为6个基因型,KM/EV20/2010分离株属于Ⅳ基因型。
潘玥
邵聪文
王晓辉
朱艳菊
陈俊英
陈伟
马绍辉
刘建生
关键词:
埃可病毒
全基因组
ECHO20病毒株KM/EV20/2010的分离鉴定及其VP1基因序列特征分析
被引量:1
2014年
目的分离并鉴定2010年云南省昆明市甲型肝炎患儿粪便标本中混存的ECHO20(Echovirus20,ECHO20)KM/EV20/2010病毒株,分析其VP1基因遗传特征。方法采用KMB17细胞对大便标本进行病毒分离;采用微量细胞病变法,经WHO肠道病毒组合血清及单价血清对该分离株进行鉴定;采用RT—PCR法扩增病毒VP1基因并进行序列测定,并运用Mega4.0等软件进行分析处理。结果分离毒株经微量中和试验鉴定为ECH020血清型,编号为KM/EV20/2010;经RT—PCR法扩增获得为867bp的VP1基因,与国内分离株核苷酸和氨基酸的同源性分别为79.5%~91.7%和98.9%~99.6%,与国外分离株的核苷酸和氨基酸同源性分别为80.2%~83.2%和96.4%~99.6%;在进化树上云南分离株与GenBank中登录的中国国内2001年山东分离株01352和1998年法国分离株94CF1666形成一个进化分支。结论KM/EV20/2010分离株为肠道病毒ECH020型病毒,可用KMB17人二倍体胚肺成纤维细胞分离增殖。
潘玥
邵聪文
吉玛
朱艳菊
张云昆
马忠飞
刘建生
马绍辉
关键词:
ECHO
VP1基因
甲型肝炎减毒活疫苗H2减毒株P2区基因序列测定与特征分析
被引量:2
2008年
目的测定甲型肝炎(甲肝)减毒活疫苗H2减毒株P2区基因序列,了解其减毒和细胞适应的分子机制。方法通过逆转录-聚合酶链反应,特异扩增甲肝减毒活疫苗H2株成品疫苗及其亲本毒种P2区VP1/2A、2B、2C基因序列,经测序、比对,分析检测毒力基因VP1/2A、2C的变异情况。结果甲肝减毒活疫苗H2成品疫苗及其亲本毒种毒力基因VP1/2A、2C区毒力相关基因簇均为减毒型特征。结论甲肝减毒活疫苗H2减毒株毒力基因VP1/2A、2C均为减毒型特征,且遗传稳定性良好。
刘建生
侯宗柳
马绍辉
孟明耀
张云昆
李琦涵
关键词:
甲型肝炎病毒
H2株
柯萨奇病毒B3 KM06/2009株全基因组测序及其序列分析
2014年
目的分析柯萨奇病毒B3(CVB3)KM06/2009全基因序列,并对其分子变异、进化特点和毒力特征进行分析。方法设计针对CVB3引物,提取病毒RNA,RT-PCR扩增和产物直接测序获得序列。利用Mega4.1、RDP3和SimPlot3.5.1等软件分析全基因序列。结果CVB3KM06/2009病毒株全基因组全长7401bp个核苷酸(nt),5’端和3’端分别为743nt和100nt的非编码区,5’和3’非编码区间为一个6558nt长的开放读码框,编码一个含2185个氨基酸的多聚蛋白,编码区内未见核苷酸的插入或缺失。与GenBank库中CVB3Nancy原型株比较,其全基因组序列核苷酸同源性为81.4%,氨基酸同源性为95.7%;与无心肌毒力的临床分离株CVB3GA比较,其全基因组序列核苷酸同源性为80.7%,氨基酸同源性为96.4%;与历史同期国内临床分离株Beijing0811、SSM、GZ0803株比较,整个基因组的核苷酸同源性分别为98.1%、89.7%和88.4%,氨基酸同源性分别为99.4%、98.1%和98.1%。基于全基因组和全长VP1核酸序列的进化树图均显示,CVB3病毒株具有明显的时空聚簇分布特征。CVB3心肌毒力相关区域5’非编码区颈环结构1/RNA二级折叠结构分析结果表明,CVB3KM06/2009病毒株具有明显的心肌毒力倾向。结论基于基因分子生物信息学分析,与CVB3临床分离株比较,KM06/2009病毒株具有明显的心肌毒力倾向。
刘建生
邵聪文
潘玥
陈俊英
吉玛
朱艳菊
马绍辉
关键词:
柯萨奇病毒B3
全基因组
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