国家自然科学基金(31201021)
- 作品数：8 被引量：45H指数：3
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- miR-143对牛骨骼肌卫星细胞成肌分化的调控作用研究
- 骨骼肌的生长发育是一个受多种调节因子和信号通路共同调控的极其复杂的生物学过程,骨骼肌卫星细胞在肌肉发育分化和肌损伤修复中都发挥了重要的作用,已有的研究表明非编码RNA microRNAs（miRNAs）和lncRNAs（...
- 张蔚然
- 关键词：骨骼肌卫星细胞MIR-143成肌分化
- 文献传递
- 小鼠骨骼肌卫星细胞的分离培养和鉴定被引量：8
- 2014年
- 采用胶原酶和胰酶联用的酶消化法分离小鼠骨骼肌卫星细胞,应用差速贴壁法进行纯化,并利用RT-PCR和免疫荧光染色方法对分化前后细胞的标志基因进行鉴定。结果显示:分离出的肌卫星细胞生长状态良好,RT-PCR和免疫荧光染色显示肌卫星细胞Pax7和MyoD呈阳性表达,诱导分化形成肌管后,分化标志基因MyoG和MHC呈阳性表达。本研究成功从小鼠肌肉组织中分离出了肌卫星细胞,并具有很好的体外分化能力,可以为肌肉的发育分化和损伤修复研究提供良好的细胞模型。
- 代阳王轶敏刘新峰樊晗璐李吉霞郭宏丁向彬
- 关键词：小鼠骨骼肌卫星细胞细胞培养
- microRNA-139对小鼠失神经肌肉萎缩中肌纤维的影响被引量：1
- 2016年
- 为探究microRNA-139(miR-139)在体内对小鼠失神经腓肠肌是否具有一定的作用,本研究建立了小鼠腓肠肌失神经萎缩模型,然后将10 nmol miR-139 inhibitors注射至小鼠失神经腓肠肌组织中,14 d后qRT-PCR检测miR-139的表达量,比较肌肉湿重和肌纤维直径,RT-PCR和Western blot检测MHC的表达量,研究miR-139表达改变对肌肉发育的影响。结果显示:与对照相比,miR-139 inhibitors注射后显著增加失神经肌肉萎缩部位的肌纤维直径,说明miR-139对体内肌肉的发育分化过程具有一定的调控作用。
- 王轶敏张琬张蔚然代阳刘新峰李新郭宏丁向彬
- 关键词：小鼠失神经肌萎缩
- lncRNA-HZ5对牛骨骼肌卫星细胞成肌分化的调控作用研究被引量：4
- 2017年
- 为探究lncRNA对牛骨骼肌卫星细胞成肌分化过程的影响,选取前期测序结果中在牛肌卫星细胞成肌分化前后差异表达且表达丰度较高的lncRNA-HZ5进行成肌分化调控研究,利用q RT-PCR技术对其在牛骨骼肌卫星细胞成肌分化前后的表达变化进行检测,然后设计合成lncRNA-HZ5的si RNA,转染牛骨骼肌卫星细胞,抑制lncRNA-HZ5表达,之后将肌卫星细胞进行成肌分化诱导,通过肌管形成状态和MHC表达水平检测分析lncRNA-HZ5表达水平改变对肌卫星细胞成肌分化过程的影响。结果表明:lncRNA-HZ5在成肌分化前后的表达存在显著差异,干扰lncRNA-HZ5表达后的肌卫星细胞经成肌分化诱导,肌管数量及MHC的表达量均显著高于对照组,说明下调lncRNA-HZ5表达可以显著促进肌卫星细胞的成肌分化过程。本研究结果表明,lncRNA-HZ5可以负调控牛骨骼肌卫星细胞的成肌分化过程。
- 丁向彬张蔚然张俊星王轶敏刘新峰郭宏
- 关键词：骨骼肌卫星细胞成肌分化
- microRNA-128对小鼠失神经肌肉萎缩中肌纤维的影响
- 2016年
- 为探究microRNA-128(miR-128)在体内对小鼠失神经腓肠肌的作用,试验建立了小鼠腓肠肌失神经萎缩模型,将10 nmol miR-128模拟物或miR-128抑制剂注射至小鼠失神经腓肠肌组织中,14 d后经实时定量PCR检测miR-128的表达量,比较肌肉湿重和肌纤维直径,研究miR-128表达改变对肌肉发育的影响。结果表明:注射miR-128模拟物的失神经腓肠肌组织肌纤维直径显著低于对照组,而注射了miR-128抑制剂的失神经腓肠肌组织肌纤维直径显著增加。说明miR-128在体内具有一定的肌损伤修复功能,在一定程度上能够在体内对肌肉分化发挥调控作用。
- 张蔚然代阳王轶敏刘新峰郭宏丁向彬
- 关键词：小鼠失神经肌肉萎缩肌纤维
- microRNA-143对小鼠失神经肌肉萎缩中肌纤维的影响被引量：2
- 2017年
- 为研究microRNA-143(miR-143)对小鼠失神经肌肉萎缩中肌纤维的影响,通过对小鼠进行坐骨神经切断术,构建小鼠腓肠肌失神经萎缩模型,并注射miR-143模拟物或miR-143抑制剂,采用实时定量PCR检测miR-143的表达量,比较肌肉湿重和肌纤维直径,研究miR-143对小鼠失神经腓肠肌的调控作用。结果显示:注射miR-143模拟物的小鼠,其肌纤维直径明显低于对照组,而注射miR-143抑制剂的小鼠,其失神经腓肠肌组织肌纤维的直径明显高于对照组。结果说明,miR-143对小鼠失神经腓肠肌肌肉萎缩的修复起着一定调节作用。
- 张会娜张蔚然王轶敏刘新峰郭宏丁向彬
- 关键词：小鼠失神经肌肉萎缩肌纤维腓肠肌
- 牛骨骼肌卫星细胞中miR-143互作lncRNA-HZ5的鉴定及其相互调控作用分析被引量：3
- 2019年
- 为探究miR-143与其互作lncRNA之间的关系及其在牛骨骼肌卫星细胞成肌分化过程中的潜在作用机制,选取两个表达丰度较高miR-143的预测互作lncRNA(lncRNA-HZ5和lncRNA-HZ8)进行研究。采用双荧光素酶试验验证miR-143对预测互作lncRNA的靶向调控作用,采用qRT-PCR技术检测miR-143表达水平改变对预测互作lncRNA表达的影响,并采用qRT-PCR和western blot技术检测干扰互作lncRNA表达后对miR-143表达水平及miR-143靶基因表达水平的影响。双荧光素酶试验结果表明,miR-143可直接调控lncRNA-HZ5的表达;在牛肌卫星细胞中过表达miR-143后,lncRNA-HZ5的表达水平显著下调,而抑制miR-143表达后,lncRNA-HZ5的表达水平显著上调;采用siRNA干扰lncRNA-HZ5的表达,发现抑制lncRNA-HZ5表达能够下调miR-143表达,并上调miR-143靶基因IGFBP5的蛋白水平。研究结果表明,在牛骨骼肌卫星细胞中miR-143可以和lncRNA-HZ5发生相互调控作用,其对牛肌卫星细胞成肌分化的调控作用可能是通过互作来完成的。
- 王轶敏张蔚然张俊星刘新峰郭宏丁向彬
- 关键词：MIR-143骨骼肌卫星细胞成肌分化
- 碱性成纤维细胞生长因子对牛骨骼肌卫星细胞增殖的影响被引量：2
- 2015年
- 为研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对牛骨骼肌卫星细胞增殖的影响,试验对牛骨骼肌卫星细胞进行体外分离培养,在生长培养基和分化培养基中分别添加bFGF,观察细胞生长及分化情况,绘制细胞生长曲线,并进行EDU细胞增殖检测试验。结果显示,添加了bFGF培养基的细胞生长状态较对照组良好,细胞增殖速度快,细胞增殖率显著高于对照组(P<0.05),说明bFGF对牛骨骼肌卫星细胞在生长培养基和分化培养基中增殖都具有良好的促进作用。本研究建立了一种高效的牛骨骼肌卫星细胞培养方案,为骨骼肌卫星细胞的研究利用提供参考。
- 张蔚然代阳王轶敏刘新峰王婷郭宏丁向彬
- 关键词：骨骼肌卫星细胞碱性成纤维细胞生长因子细胞增殖
- 牛骨骼肌卫星细胞的分离鉴定和诱导分化被引量：29
- 2014年
- 本研究对牛骨骼肌卫星细胞进行体外分离培养、诱导分化和鉴定,采用胶原酶和胰酶联用的酶消化法分离肌卫星细胞,应用差速贴壁法进行纯化,观察卫星细胞及诱导分化后肌管的形态结构,并利用标志基因的反转录PCR(RT-PCR)和免疫荧光染色方法对分化前后细胞进行鉴定。结果显示,分离出的肌卫星细胞呈梭形生长,生长状态良好,RT-PCR和免疫荧光染色显示肌卫星细胞Pax7和MyoD呈阳性表达,纯化后的肌卫星细胞纯度大于93%;诱导分化后,卫星细胞融合生长,形成的肌管状态良好,分化标志基因MyoG和MHC呈阳性表达。本研究建立了一套从牛肌肉组织中分离和鉴定肌卫星细胞的方法,可以为肌肉的发育分化和肉牛肉质改良研究提供良好的细胞模型。
- 王轶敏代阳刘新峰刘中伟李吉霞郭宏丁向彬
- 关键词：骨骼肌卫星细胞细胞培养细胞分化
