国家自然科学基金(81070324)
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
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- 相关机构：江苏省人民医院南京医科大学更多>>
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- 慢病毒介导ATP7B基因转染对骨髓间充质干细胞在高铜环境中生存能力的影响
- 2013年
- 目的:探讨慢病毒转染ATP7B基因能否提高骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,MSCs)在高铜环境中的生存能力。方法:全骨髓贴壁法培养Wilson病模型LEC大鼠的MSCs;构建含有ATP7B基因的慢病毒载体pWPT-ATP7B及对照慢病毒载体pWPT-GFP并转染MSCs,获得表达ATP7B基因的MSCsATP7B细胞及对照组MSCsGFP细胞。利用细胞免疫荧光、Real-time PCR、Western blot长期监测ATP7B基因表达;并以HepG2细胞系作为阳性对照,利用SRB法监测给予不同浓度铜离子处理的干细胞增殖情况。结果:MSCs CD90、CD29表达阳性,CD45、CD11b表达阴性;细胞免疫荧光、Westernblot及RT-PCR显示MSCsATP7B细胞的ATP7B基因能够长期稳定表达;SRB结果显示,高铜环境中MSCsATP7B细胞的生存能力显著高于MSCsGFP细胞及HepG2(P<0.05)。结论:ATP7B基因修正的LEC大鼠MSCs可有效对抗铜蓄积损害,为Wilson病的治疗提供可能的新方法。
- 邵存华陈圣林董天赋成峰
- 关键词：ATP7B骨髓间充质干细胞WILSON病
- M2-型丙酮酸激酶促进肝癌细胞的侵袭
- 2014年
- 目的:探讨M2-型丙酮酸激酶(pyruvate kinase M2,PKM2)在肝癌组织中的表达及对肝癌侵袭的影响。方法:荧光定量PCR(real-time PCR)、免疫组化(IHC)比较PKM2在肝癌和癌旁组织中mRNA和蛋白的表达水平;构建人肝癌细胞株(HepG2)PKM2干扰和过表达的细胞株,分析PKM2对肝癌细胞侵袭的影响;Real-time PCR、免疫组化、Western blot分析肝癌组织及转染后的HepG2细胞STAT3的磷酸化、缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的表达变化。结果:肝癌标本(106/115)中PKM2、HIF-1α的mRNA表达水平在肝癌组织中高于癌旁组织,免疫组化显示肝癌组织中的PKM2、HIF-1α的表达水平高于癌旁组织;在体外实验中,干扰PKM2能抑制肝癌细胞HepG2的侵袭,过表达PKM2促进肝癌细胞HepG2的侵袭;PKM2过表达促进STAT3(signal transducer and activator of transcription 3)的磷酸化,上调HIF-1α的表达。结论:PKM2通过促进STAT3磷酸化,上调HIF-1α的表达,促进肝癌细胞的侵袭,为肝癌的治疗提供了新思路。
- 董天赋柴浩陈圣林熊新魁孙道一成峰
- 关键词：肝癌肿瘤侵袭
- PKM2基因对胆管细胞癌迁移、侵袭及增殖的影响被引量：8
- 2015年
- 目的 :检测M2-型丙酮酸激酶(pyruvate kinase M2,PKM2)在胆管癌(cholangiocarcinoma,CCA)组织中的表达情况,探讨PKM2下调对胆管癌细胞迁移、侵袭及增殖的影响。方法:实时定量逆转录聚合酶链反应(q RT-PCR)和免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色分别检测胆管癌及对应癌旁组织标本中PKM2的m RNA和蛋白表达水平。利用慢病毒表达载体系统在胆管癌细胞株Hu CCT-1、HCCC-9810中下调PKM2,分别用划痕实验、Transwell细胞侵袭实验和CCK-8比色法检测细胞迁移、侵袭及增殖能力。结果:胆管癌组织中PKM2的m RNA和蛋白表达水平明显高于对应癌旁组织。经q RT-PCR和Western blot方法证实稳定转染PKM2 sh RNA的胆管癌细胞中PKM2的m RNA和蛋白水平较对照组均明显下降(P<0.05),与空载对照组(PKM2-NC)和正常对照组(PKM2)相比,实验组细胞(PKM2-sh RNA)的迁移、侵袭及增殖能力明显减弱,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:胆管癌组织中PKM2表达明显高于癌旁组织,PKM2 sh RNA能有效地降低胆管癌细胞中PKM2基因的表达,PKM2基因沉默可以抑制Hu CCT-1、HCCC-9810细胞的迁移、侵袭及增殖。
- 柴浩熊新魁孙道一单文刚浦立勇俞悦成峰
- 关键词：SHRNA干扰生物学功能
- 伊班膦酸钠与唑来膦酸对骨肿瘤患者的疗效比较被引量：2
- 2017年
- 目的探讨唑来膦酸与伊班膦酸钠对骨肿瘤患者的疗效影响。方法选取2015年8月至2016年8月间山东单县海吉亚医院收治的104例骨肿瘤患者,采用随机数字表法分为观察组与对照组,每组52例。观察组采用伊班膦酸钠治疗,对照组采用唑来膦酸治疗,比较两组患者的疼痛治疗效果、不良反应和生活质量。结果治疗后观察组患者视觉模拟评分为(4.3±1.5)分,显著低于对照组的(6.0±1.6)分;观察组患者不良反应发生率为9.6%,低于对照组的26.9%;观察组患者Kamofsky评分为(58.5±8.5)分,显著高于对照组的(48.5±7.5)分;观察组患者药物治疗费用为(2025.5±70.5)元,显著低于对照组的(4052.5±80.5)元,以上两组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论相比唑来膦酸,伊班膦酸钠可有效降低骨肿瘤患者的疼痛阈值,提高生活质量,不良反应少,治疗费用低。
- 董桂一成峰
- 关键词：骨肿瘤唑来膦酸伊班膦酸钠
