国家自然科学基金(30471576)
- 作品数：2 被引量：9H指数：2
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- 相关机构：中国医科大学附属第一医院中国医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 寻常型天疱疮抗原Dsg3基因的真核表达被引量：6
- 2007年
- 目的探讨寻常型天疱疮自身抗原Dsg3 EC1-EC5在哺乳动物细胞的克隆、表达及纯化,并以重组的Dsg抗原检测寻常型天疱疮患者及正常人血清中的天疱疮抗体。方法根据基因库中的Dsg3基因序列分析,采用RT-PCR法扩增自身抗原Dsg3 EC1-EC5多肽片段的cDNA,定向插入真核表达质粒pcDNA3.1^(TM)/myc-His(-)B[1],稳定转染人宫颈癌细胞系表达重组融合蛋白,并经Ni^+亲和层析柱纯化。采用蛋白质印迹法鉴定蛋白表达产物。以重组Dsg3 EC1-EC5蛋白为抗原用ELISA检测40份寻常型天疱疮患者及40份正常人对照组血清。结果成功构建真核表达重组体pcDNA3.1^(TM)/myc-His(-)B-Dsg3。纯化的Dsg3 EC1-EC5蛋白质能够与寻常型天疱疮患者血清中的天疱疮抗体发生反应。ELISA方法检测寻常型天疱疮患者血清,结果显示,天疱疮抗体的阳性率为95%。结论真核表达的Dsg3 EC1-EC5蛋白与寻常型天疱疮患者血清中的抗体发生特异性反应。
- 孙峥嵘耿龙吉耀华徐媛媛翟宁阮强陈洪铎
- 关键词：天疱疮重组抗原DSG3真核表达
- 桥粒芯糖蛋白3刺激下寻常型天疱疮患者外周血T淋巴细胞增殖检测分析被引量：3
- 2010年
- 目的 观察桥粒芯糖蛋白3（Dsg3）对寻常型天疱疮（PV）患者外周血T淋巴细胞增殖的影响.方法 PV患者12例,正常人22例,提取外周血单一核细胞（PBMC）,采用流式细胞仪技术分别检测Dsg3刺激下PBMC中T淋巴细胞亚群变化及T淋巴细胞增殖情况,分析PV患者与正常人之间存在的差异.结果 PV患者PBMC在Dsg3刺激下Th2型T淋巴细胞所占比例为12.17%±5.32%,Th1型T淋巴细胞所占比例为4.08%±1.50%;未经Dsg3刺激的阴性对照组分别为9.84%±5.41%和3.91%±1.38%.PV患者PBMC在Dsg3刺激和无Dsg3刺激时的Th2型T淋巴细胞所占比例均显著高于正常人（P〈O.05）;Dsg3刺激下PV患者T淋巴细胞发生增殖,CD4^＋T淋巴细胞增殖率为4.65%±3.28%,显著高于正常人（P〈0.05）. 结论 Dsg3可诱导PV患者CD4^＋T淋巴细胞发生特异性增殖,且主要为Th2优势型.
- 胡婕魏仲香姜奕梁再赋耿龙
- 关键词：天疱疮T淋巴细胞TH1细胞TH2细胞
