广州市科技攻关项目(2003Z3-E0451)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：黄文林黄必军黄嘉凌刘然义吴立志更多>>
- 相关机构：中山大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划广州市科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 携带SARS-CoV刺突蛋白N端片段重组腺病毒的构建被引量：2
- 2005年
- 【目的】构建携带 SARS 冠状病毒刺突蛋白 N 端基因片段的重组腺病毒。【方法】从 SARS 病毒 cDNA 扩增刺突蛋白 N 端基因片段(-45～1469nt,截短的 S1区,S_N),插入腺病毒穿梭质粒 pShuttle,通过体外连接法构建重组腺病毒Ad-S_N。用 Ad-S_N 感染 Vero-E6细胞,通过 RT-PCR 和 Western blot 法检测 S_N 的表达。【结果】克隆的 S_N 基因序列与文献报道基本一致;Ad-S_N 基因组结构与预期一致。在 Ad-S_N 感染的 Vero-E6细胞中存在 S_N 基因的转录和分泌型 S_N 蛋白的表达。【结论】体外连接法是一种简便易行的重组腺病毒载体构建方法;重组腺病毒 Ad-S_N 能正确表达分泌型 S_N 蛋白,可用于诱导抗 SARS 免疫的动物实验研究。
- 刘然义黄必军黄嘉凌吴立志张如华陈汉奎曾益新黄文林
- 关键词：SARS病毒刺突蛋白
- 腺病毒介导SARS病毒SN基因表达及其诱导的体液免疫被引量：1
- 2005年
- 目的检测重组腺病毒Ad-SN在体内外的表达,初步探讨其在大鼠内诱导的体液免疫反应。方法Ad-SN感染Vero-E6细胞后用RT-PCR和WesternBlot法检测SN基因的表达;用WesternBlot法检测Ad-SN在大鼠皮下组织中的表达。Ad-SN皮下免疫大鼠,用ELISA法测定血清中抗SARS-CoVIgG水平。结果在Ad-SN感染的Vero-E6细胞中存在SN基因的转录,其mRNA量呈剂量依赖性;在Ad-SN感染的细胞、其培养上清及Ad-SN注射部位组织中均能检测到SN的表达。在Ad-SN免疫大鼠血清中可检测到高滴度SARS冠状病毒抗体(IgG)。结论Ad-SN能表达分泌型SN蛋白,并在大鼠体内诱导SARS-CoV特异的体液免疫反应。
- 刘然义黄嘉凌吴立志黄必军柯妙拉张艳玲王俊梅黄文林
- 关键词：SARS冠状病毒腺病毒载体刺突蛋白体液免疫
