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国家自然科学基金(30471550)

作品数:6 被引量:10H指数:3
相关作者:富宁罗海波朱平蒋小滔刘北一更多>>
相关机构:南方医科大学东北农业大学清华大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金黑龙江省教育厅资助项目广东省自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>

文献类型

  • 6篇中文期刊文章

领域

  • 4篇医药卫生
  • 2篇生物学
  • 1篇农业科学

主题

  • 3篇多糖
  • 3篇脂多糖
  • 3篇表位
  • 2篇单克隆
  • 2篇单克隆抗体
  • 2篇小鼠
  • 2篇模拟肽
  • 2篇抗体
  • 2篇克隆
  • 2篇保护性免疫
  • 2篇LPS
  • 2篇表位模拟肽
  • 1篇蛋白纯化
  • 1篇休克
  • 1篇阴性菌
  • 1篇原核表达
  • 1篇制备及特性
  • 1篇识别表位
  • 1篇噬菌体
  • 1篇同源模建

机构

  • 5篇南方医科大学
  • 1篇东北农业大学
  • 1篇军事医学科学...
  • 1篇清华大学

作者

  • 5篇富宁
  • 4篇罗海波
  • 3篇朱平
  • 2篇刘北一
  • 2篇蒋小滔
  • 1篇刘艳君
  • 1篇李松
  • 1篇胡远东
  • 1篇李莹
  • 1篇郑山根
  • 1篇李杰
  • 1篇郑健
  • 1篇文维延
  • 1篇柏锡
  • 1篇黄来强
  • 1篇叶青
  • 1篇刘西燕

传媒

  • 1篇中国免疫学杂...
  • 1篇生物化学与生...
  • 1篇免疫学杂志
  • 1篇东北农业大学...
  • 1篇热带医学杂志
  • 1篇南方医科大学...

年份

  • 1篇2009
  • 2篇2008
  • 3篇2007
6 条 记 录,以下是 1-6
排序方式:
脂多糖模拟肽13L诱导对小鼠内毒素休克的保护反应被引量:3
2008年
为研究LPS 2630表位模拟肽13L是否能诱导抗脂多糖(LPS)抗体的产生、对细菌攻击及内毒素休克的保护性反应,合成了模拟LPS表位的短肽13L.用合成肽13L-蓝载体(blue carrier,BC)交联物免疫Balb/C小鼠,观察小鼠体内抗LPS抗体产生的规律,并观察免疫小鼠细菌感染存活时间,用颈总动脉插管测定技术观察免疫小鼠内毒素休克的血压变化.结果显示,合成肽13L-BSA交联物能与兔抗鼠伤寒和大肠杆菌LPS抗血清及抗鼠伤寒LPS单抗结合,证明短肽13L可模拟LPS的抗原性.用13L-BC交联物免疫可诱发小鼠体内针对大肠杆菌LPS 2630和鼠伤寒沙门氏菌LPS 7261的抗体反应,该反应可被灭活大肠杆菌及两种LPS所加强,其抗体亚类主要为IgG2a,其次为IgG2b与IgM,而IgG1与IgG3含量极低.免疫13L-BC小鼠显示对细菌攻击的抵抗,与免疫BC对照小鼠比较,其存活时间分别为(12±1.3)天和(5.3±0.4)天(P<0.01).免疫13L-BC小鼠对静脉注射LPS诱发内毒素休克的保护作用体现在血压下降幅度明显低于对照动物,在LPS 2630攻击后1、2、3及4h时两组动物血压明显差别(P<0.05、P<0.01、P<0.05及P<0.01),而LPS 7261攻击后1、2、3及4h时两组动物血压差别则略小于LPS 2630组(P>0.05、P<0.05、P<0.05及P<0.01).上述结果证明,LPS表位模拟肽13L交联物免疫小鼠可产生针对细菌攻击及内毒素休克的保护性效应,提示该模拟肽作为LPS交叉保护性疫苗候选的可行性.
罗海波郑健朱平黄来强富宁
关键词:脂多糖表位模拟肽内毒素休克保护性免疫
抗蓝载体单克隆抗体的制备及特性鉴定
2007年
目的制备抗蓝载体(blue carrier,BC)单克隆抗体(mAb),为相关研究提供支持与工具。方法用人工合成肽与蓝载体交联后免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与NS-1融合制备杂交瘤,经筛选和3次克隆化,从制备的腹水中纯化单克隆抗体。用ELISA以及Dot-ELISA方法鉴定单克隆抗体的特性(效价、Ig亚类、特异性以及亲和力)。结果筛选到1株可稳定分泌抗蓝载体单克隆抗体的杂交瘤细胞5B5,腹水效价2×10-6,单抗亚类为IgG1,抗体亲和力为7.8×108。Dot-ELISA结果显示,在相同条件下5B5mAb只与蓝载体特异性结合,与钥孔戚血蓝素(KLH)、牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清白蛋白(OVA)等载体蛋白不发生交叉反应。结论获得1株能特异性识别蓝载体蛋白的mAb,为评价短肽及半抗原交联免疫效果、某些疾病诊断及治疗方法疗效提供了工具。
叶青刘艳君朱平富宁
关键词:单克隆抗体
以特异性噬菌体为靶进行配基筛选的分子模建及活性鉴定
2007年
目的利用计算机辅助分子模拟技术,分析TNF模拟序列与配基的结合。方法利用计算机模建,对特异性模拟TNF的环七肽单表位克隆LCS-7(c-RRPAQSG-c)与以其为靶筛选获得的配基即TNFα结合肽LLT-18(EHMALTYPFRPP)及TNFα分子间相互结合作用进行分子模拟分析;并合成LLT-18进行ELISA鉴定与验证。结果和结论计算机模建分析显示LLT-18与TNFα表位模拟肽之间结合作用同其与TNFα分子间相互结合作用具有相似性;固相合成LLT-18短肽可与TNFα结合,证明了以噬菌体为靶进行配基筛选及分子模建预测小分子肽相互作用的可行性。
罗海波胡远东刘北一李松富宁
关键词:同源模建噬菌体TNFΑ结合肽
LPS表位模拟肽诱导小鼠保护性免疫的研究被引量:4
2007年
目的鉴定三种LPS模拟位合成肽的抗原性、诱导抗LPS抗体的产生及对细菌攻击的保护性。方法三种LPS模拟位合成肽与载体BSA交联后,ELISA测定其与多种抗LPS单、多克隆抗体的结合活性;合成肽与蓝载体交联物免疫Balb/c小鼠,观察其诱发小鼠体内抗LPS抗体产生的规律及血清抗LPS抗体效价;鉴定针对细菌感染的保护性效应。结果三种合成肽均能与抗鼠伤寒和大肠杆菌LPS抗体结合;用合成肽-蓝载体交联物免疫动物可诱发小鼠体内针对两种LPS的抗体反应,并对细菌攻击的免疫动物具不同程度的保护性作用,以合成肽13a,13b及12W与蓝载体交联物免疫的小鼠在鼠伤寒沙门氏菌攻击后存活时间分别为(6.5±0.77),(9.5±1.38)及(9.3±0.75)d,而PBS/蓝载体对照组存活时间为5d。结论本研究所采用的3种LPS表位模拟肽作为疫苗免疫小鼠能够产生针对细菌攻击的保护性效应,提示此3种表位模拟肽作为LPS交叉保护性疫苗候选的可行性与可靠性。
罗海波郑山根文维延蒋小滔朱平富宁
关键词:脂多糖表位模拟肽保护性免疫
广谱抗革兰氏阴性菌单克隆抗体3A8识别表位的初步研究
2009年
目的:利用噬菌体肽库技术筛选抗广谱革兰氏阴性菌与LPS单克隆抗体3A8的识别表位,以获得来源于不同LPS的保守表位。方法:用广谱抗G-菌、LPS的单克隆抗体3A8为靶,筛选噬菌体环七肽库,ELISA鉴定阳性噬菌体克隆并测序。根据阳性保守序列合成短肽A2及A5,并与KLH载体交联,ELISA鉴定A2-KLH、A5-KLH与3A8单抗的结合。结果:随机挑选的33个噬菌体克隆中有15个可特异性与3A8结合,该结合可被LPS2630所抑制。根据阳性克隆DNA序列推导氨基酸序列,共有7种序列,均以疏水氨基酸为主,且包含保守序列Ser Pro Pro/Pro X Pro;选择所获阳性序列经设计与改造合成延长的两个环肽;经ELISA鉴定表明这些环肽可特异地与3A8结合。结论:得到可被3A8单抗特异性识别并含保守残基Ser Pro Pro/ProX Pro的阳性序列,据此合成的短肽可特异性结合3A8,提示该短肽可能模拟LPS共同表位的抗原性,有望成为疫苗候选表位。
刘北一蒋小滔罗海波富宁
关键词:单克隆抗体
OsMAPK4基因的原核表达及蛋白纯化被引量:3
2008年
构建OsMAPK4基因的原核表达载体,对表达产物进行鉴定和纯化,为转OsMAPK4基因植株后期的Western Blot检测提供抗原。用PCR方法从本实验室已构建的植物表达载体pUM4上扩增OsMAPK4基因,将其克隆至pET32b原核表达载体,构建重组载体pET32b-MAPK4。转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE分析。用Ni-NTA亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,用Western Blot进行蛋白鉴定。结果表明,原核表达载体构建正确;SDS-PAGE分析及Western Blot鉴定中,均出现了与DNAMAN预测的43.6 ku大小一致的蛋白条带;得到纯化蛋白。成功构建了OsMAPK4基因的原核表达载体,得到纯化蛋白,为转OsMAPK4基因水稻植株体内蛋白表达活性的检测提供了抗原。
刘西燕柏锡李莹李杰
关键词:原核表达纯化WESTERNBLOT
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