国家自然科学基金(30471541)
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
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- 相关机构：北京军区总医院中国煤炭地质总局河北医科大学更多>>
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- 靶向HBV X基因的shRNA表达质粒对HBV复制的抑制作用
- 2008年
- 目的观察靶向HBV X基因的RNA干扰(RNAi)对HBV复制的抑制作用.方法选择HBV基因组X区的Nt1681-1708作为靶序列,合成相应的正、反义寡核苷酸,退火后形成双链,克隆入shRNA表达质粒,将得到的质粒与HBV质粒共转染HepG2细胞,观察HepG2细胞中HBsAg、HBeAg、HBV DNA和pgRNA的受抑制情况.结果HBsAg、HBeAg的表达、HBV DNA和pgRNA的拷贝数均明显受到抑制.结论所选靶区通过RNAi可有效抑制HBV复制.
- 李绍祥张成平胡大荣李娟范公忍刘超英
- 关键词：RNA干扰乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒表面抗原乙型肝炎病毒E抗原
- RNAi靶向抑制HBV复制和HBeAg表达被引量：3
- 2008年
- 目的观察靶向HBVC基因区的RNA干扰对HBV复制的抑制作用。方法选择HBV基因组C区的Nt2021-2049作为靶序列,合成相应的正、反义寡核苷酸,退火后形成双链,克隆入shRNA表达质粒,将得到的质粒与HBV质粒共转染HepG2细胞,观察HepG2细胞中HBV的受抑制情况。结果病毒复制及HBeAg的表达明显受到抑制。结论所选靶区通过RNA干扰可有效抑制HBV复制。
- 李绍祥闫彩珍张成平胡大荣范公忍刘超英
- 关键词：乙型肝炎E抗原乙型基因表达调控
- 靶向HBV C区RNAi对HBV复制和HBeAg表达的抑制作用被引量：3
- 2007年
- 目的观察靶向HBV C基因区的RNA干扰(RNAi)对HBV复制的抑制作用。方法选择HBV基因组C区的Nt2021-2049作为靶序列,合成相应的正、反义寡核苷酸,退火后形成双链,克隆入shRNA表达质粒,将得到的质粒与HBV质粒共转染HepG2细胞,观察HepG2细胞中HBV的受抑情况。结果病毒复制及HBeAg的表达明显受到抑制。结论所选靶区通过RNAi可有效抑制HBV复制。
- 李绍祥张成平李娟范公忍刘超英胡大荣
- 关键词：乙型肝炎E抗原乙型基因表达调控
- 腺病毒/重组腺相关病毒杂合体病毒的构建被引量：2
- 2010年
- 目的:探讨解决RNA干扰(RNAi)抗HBV作用时间短暂的问题。方法:构建腺病毒/重组腺相关病毒(Ad/rAAV)杂合体病毒,恢复rAAV的定点整合,并借助定点整合的rAAV持续表达shRNA(short hepair RNA),实现RNAi抗HBV的持久性。结果:经酶切和测序鉴定,各目的基因片段均成功克隆入穿梭质粒中pAd/rAAV酶切鉴定表明同源重组成功,病毒包装与滴度测定结果表明,Ad/rAAV杂合体病毒包装成功。结论:利用Ad、AAV和HBV各种元件的特点,彼此互补,克服其不足,构建Ad/rAAV杂合体病毒,作为抗HBV的shRNA表达框的载体,为解决RNAi抗HBV作用时间短暂的问题作了一些技术上的探索。
- 李绍祥张艳霞张成平姚鹏李娟胡大荣
- 关键词：RNA干扰
- Ad/rAAV杂合体病毒介导抗HBV shRNA表达框定点整合研究被引量：2
- 2010年
- 目的探讨解决RNA干扰(RNA interference,RNAi)抗HBV作用时间短暂的问题。方法构建腺病毒/重组腺相关病毒(Adenovirus/recombinant adenovirus associated virus,Ad/rAAV)杂合体病毒,恢复rAAV的定点整合,并借助定点整合的rAAV持续表达shRNA(short hepair RNA),实现RNAi抗HBV的持久性。结果 Ad/rAAV杂合体病毒感染靶细胞后,Rep基因可以在HBV感染细胞中表达,hU6shRNA表达框可以定点整合于细胞基因组AAVS1(adeno-associated virus integration site,腺相关病毒整合位点)中。结论利用Ad、AAV和HBV各种元件构建Ad/rAAV杂合体病毒,作为抗HBV的shRNA表达框的载体,为解决RNAi抗HBV作用时间短暂的问题作了一些技术上的探索。
- 李绍祥张艳霞张成平胡学玲李娟姚鹏胡大荣
- 关键词：RNA干扰
