国家自然科学基金(81070329)
- 作品数：4 被引量：15H指数：2
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- 相关机构：牡丹江医学院佳木斯大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省卫生厅科研项目更多>>
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- MicroRNA-25通过调控MAP2K4抑制糖尿病肾病纤维化的研究被引量：6
- 2015年
- 目的检测microRNA-25在糖尿病肾病动物模型及不同条件培养下的人肾小管上皮细胞(HK-2)中的表达,探讨其对糖尿病肾病纤维化的调节作用。方法实时荧光定量聚合酶链反应检测microRNA-25的表达。生物信息学预测、细胞瞬时转染和Western blot验证microRNA-25的下游靶蛋白。结果 microRNA-25在糖尿病肾病动物模型及高糖培养下的HK-2中表达降低(P<0.01)。MAP2K4可能是microRNA-25的下游靶蛋白。过表达microRNA-25可以从蛋白水平上抑制MAP2K4、α-SMA的表达(P<0.01)。结论 microRNA-25可以通过调控MAP2K4从而抑制糖尿病肾病纤维化的进展。
- 王晓莉刘洁婷张春雷王超男冯彪初彦辉张涛
- miR-23b通过调控ASK1抑制糖尿病肾病纤维化被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨miR-23b通过与靶基因ASK1作用对糖尿病肾病纤维化的影响。方法:通过建立动物模型(I型糖尿病小鼠)和细胞模型(HK-2细胞),应用实时定量荧光PCR、免疫荧光、基因转染结合RT-PCR,检测ASK1、FN、miR-23b在糖尿病组(Dia组)和正常组(Con组)(P<0.001)表达变化及在mRNA和蛋白水平上的作用关系。结果:miR-23b在Dia组的表达低于Con组;ASK1、FN在Dia组高表达,并且ASK1在Dia组中持续高表达;过表达miR-23b可以同时在mRNA和蛋白水平上抑制ASK1,P38的表达,FN表达也显著降低。结论:miR-23b可能通过作用靶基因ASK1及其信号通路抑制糖尿病肾病纤维化。
- 张欣金秀东李洪志张春雷刘洁婷王超男王晓莉马洪闯赵冰海初彦辉
- 关键词：糖尿病肾病纤维化靶基因
- miR-23b通过靶定TAB2/3抑制糖尿病肾病纤维化被引量：8
- 2014年
- MicroRNAs(miRNAs)通过与靶基因的相互作用发挥其生物学功能.miR-23b作为抑癌基因,参与了许多肿瘤和自身免疫疾病的发生过程,但其在糖尿病肾病中的作用尚不清楚.为了探讨miR-23b与靶基因TAB2/3作用对糖尿病肾病纤维化的影响,本实验通过建立糖尿病小鼠模型和糖尿病HK-2细胞模型,利用实时定量荧光PCR方法,检测糖尿病小鼠模型肾mRNA表达,发现miR-23b在糖尿病组(Dia组)表达低于正常组(P<0.001).利用Western印迹检测相关蛋白,结果显示,与正常组相比,TAB2/3,FN和α-SMA在糖尿病组高表达,并且TAB2/3在糖尿病组中持续高表达.利用基因转染技术过表达miR-23b可以同时在mRNA和蛋白水平上抑制TAB2/3,P38和ERK1/2的表达,FN表达也显著降低.以上结果显示:miR-23b可能通过作用靶基因TAB2/3及其信号通路下游,抑制糖尿病肾病纤维化.
- 王超男赵冰海李洪志刘洁婷张春雷王晓莉马洪闯冯彪初彦辉
- 关键词：糖尿病肾病纤维化靶基因
- CTGF-siRNA对TGF-β1诱导的肝星状细胞胶原分泌的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)的小RNA(CTGF-siRNA)对TGF-β1诱导的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)胶原分泌的影响。方法:实验分为5组:正常组(单纯HSC-T6细胞组)、对照组(TGF-β1诱导组)、siRNA组、非特异siRNA组、lipo组(脂质体组)。培养大鼠HSC-T6细胞,以10ng/mL终浓度的TGF-β1对培养的HSC-T6细胞进行诱导,再通过脂质体法将CTGF-siRNA转染入HSC-T6细胞,通过RT-PCR、Western blotting方法研究各实验组细胞中CTGF、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、I型胶原蛋白(Collagen type I,Col 1a1)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)mRNA及蛋白的表达水平。结果:正常组细胞内CTGF有低水平的表达,在给予TGF-β1诱导后表达水平显著升高(P<0.05);TGF-β1刺激24h后,靶向转染入特异性siRNA后,CTGF、Col 1a1、FN及α-SMA的表达均显著下调(P<0.05)。结论:本研究提示,通过RNA干扰使CTGF基因沉默后,在体外可明显抑制HSC-T6肝成纤维细胞的表型转化及细胞外基质的合成,进一步提示CTGF是促肝纤维化的关键性细胞因子,而RNA干扰是一种特异高效的很有前途的干预手段,为基因治疗肝纤维化提供实验依据。
- 张羽飞李厚忠高晓虹袁晓环初彦辉
- 关键词：肝星状细胞TGF-Β1结缔组织生长因子SIRNA
