国家自然科学基金(30973182)
- 作品数：4 被引量：16H指数：2
- 相关作者：王建六包晓霞魏丽惠张丽丽陈勇华更多>>
- 相关机构：北京大学北京积水潭医院医学部更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 雌激素通过非基因效应激活钙离子流调控子宫内膜癌细胞外信号调节激酶通路被引量：3
- 2015年
- 目的:研究子宫内膜癌Ishikawa细胞中,雌激素通过钙离子通道及雌激素受体引发钙离子流继而影响细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinases,ERK)活化通路的机制。方法:激光共聚焦实验检测雌激素作用下及加入雌激素受体的抑制剂ICI182780和钙通道阻滞剂nifedipine后胞浆内游离钙离子浓度的变化,Western-blotting方法检测同样条件下ERK通路的激活。结果:17β-雌二醇(17β-estrodiol,E2)和偶联牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)的17β-雌二醇(E2-BSA)在作用1 min后均可以引发瞬时的钙离子流,钙离子的浓度增高可以被雌激素受体的抑制剂ICI182780和钙通道阻滞剂nifedipine抑制。在Ishikawa细胞,E2可以快速激活ERK通路,加入雌激素受体抑制剂ICI182780后,E2作用5 min和30 min,ERK通路未被阻抑。加入钙离子通道阻滞剂nifedipine后,5 min时雌激素对ERK通路的激活未被阻抑,但30 min时nifedipine阻抑了ERK通路的激活。E2-BSA对ERK通路的活化也在作用30 min后被nifedipine阻抑。结论:雌激素可以通过钙离子通道快速激发钙离子流,进而影响ERK通路的活化。
- 张丽丽王建六
- 关键词：子宫内膜肿瘤细胞外信号调节MAP激酶类雌激素类
- Ca2＋通道抑制剂对雌激素作用下子宫内膜癌HEC-1A细胞生物学特性的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨L型Ca2＋通道亚型（Cavl．3）抑制剂——硝苯地平（nifedipine）和T型Ca2＋通道亚型（Cav3．1）抑制剂——米贝拉地尔（mibefradil）对雌激素作用下子宫内膜癌细胞系HEC-1A细胞生物学特性的影响。方法（1）以10μmol／L的nifedipine和mibefradil分别预处理HEC-1A细胞15min，然后予10μmol／L的1713雌二醇（1713-E2）和100μmol／L的雌二醇偶联牛血清白蛋白（E2-BSA）分别处理HEC-1A细胞0min、5min、15min、30min、1h、2h，采用逆转录（RT）-PCR技术检测各时间点HEC-1A细胞中Carl．3和Cav3．1mRNA的表达，蛋白印迹法检测HEC-1A细胞中Car1．3和Cav3．1蛋白的表达。（2）以不同浓度（均分别为1．25、2．5、5、10、20、40、80、100μmol／L）的nifedipine和mibefradil分别处理HEC-1A细胞24、48、96h后，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测细胞的增殖情况。（3）以10μmol／L的nifedipine和mibefradil分别处理HEC—IA细胞0min、30min、1h、6h、24h后，采用膜联蛋白V（annexinV）-碘化丙啶（PI）双染色法检测细胞的凋亡率。（4）以10μmol／L的nifedipine和mibefradil处理HEC-1A细胞36h，体外侵袭实验检测细胞的体外迁移能力（以穿膜细胞数表示）。结果（1）nifedipine预处理后：①加入1713-E2：HEC-1A细胞中Cavl．3mRNA的表达在15min时降至最低，30min时恢复；Carl．3蛋白在30min时降至最低，1h时升高。Cav3．1mRNA的表达在5min时降至最低，30min时最高，以后逐渐恢复；Cav3．1蛋白的表达在各时间点无明显变化。②加入E2-BSA：HEC-1A细胞中Cavl．3mRNA的表达在5min时降至最低，15min时恢复；Cavl．3蛋白在15min之内逐渐增加，15min后逐渐降低。Cav3．1mRNA的表达各时间点均明显降低；Car3．1蛋白在5min时降至最低，15min后恢复。mibefrdial预处理后：①加入17β-E2：HEC-1A细胞中Carl．3mRNA的表达在各时间点无明显变化；Cavl．3蛋白的表达分别在15min和1h时�
- 包晓霞王建六魏丽惠
- 关键词：子宫内膜肿瘤硝苯地平钙通道阻滞药雌激素类
- Nifedipine induced autophagy through Beclinl and mTOR pathway in endometrial carcinoma cells被引量：11
- 2012年
- BAO Xiao-xiaXIE Bu-shanLI QiLI Xiao-pingWEI Li-huiWANG Jian-liu
- 关键词：自噬作用WESTERN印迹钙通道阻断剂
- 雌激素对Ca^2＋通道亚型Cavl及Car3在子宫内膜癌细胞中表达的影响被引量：1
- 2011年
- 子宫内膜癌是最常见的女性生殖道三大恶性肿瘤之一，其发生、发展与高雌激素水平相关，多见于老年妇女，近年来发病率有升高趋势。有关子宫内膜癌发病机制，传统的观点是雌激素与其核受体（nER）结合，
- 包晓霞王建六毛泽斌李小平陈勇华魏丽惠
- 关键词：子宫内膜癌细胞雌激素水平CA^2+通道女性生殖道发病率
