广东省自然科学基金(031707)
- 作品数：8 被引量：20H指数：3
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- 检测K562和Raji-树突状细胞融合瘤苗的价值
- 2004年
- 黎阳黄绍良吴燕峰魏菁周敦华包蓉
- 关键词：K562树突状细胞融合瘤苗
- 小剂量K562细胞NOD/SCID小鼠动物模型的建立被引量：11
- 2005年
- 【目的】探索建立小剂量(1×106)人急性红白血病K562细胞株的NOD/SCID小鼠动物模型及通过流式细胞仪对NOD/SCID小鼠的肿瘤负荷情况进行评价的可行性。【方法】实验组NOD/SCID小鼠分别经尾静脉接种K562细胞1×106、5×106,比较不同剂量接种实验组小鼠的生存时间、组织病理改变及通过流式细胞术对NOD/SCID小鼠体内的肿瘤标记进行检测。【结果】1×106及5×106K562细胞接种的NOD/SCID小鼠的生存时间分别为(30.3±4.3)d和(22.2±3.7)d;其外周血、骨髓及肝、肺组织匀浆中均可发现不同比例的肿瘤细胞;通过流式细胞术检测5×106K562细胞接种组NOD/SCID小鼠外周血、肝匀浆中人CD13表达水平显著高于1×106接种组,而肺匀浆的CD13表达水平两组无显著性差异。【结论】小剂量(1×106)K562细胞NOD/SCID小鼠动物模型的建立是完全可行的,这有助于降低实验成本。
- 黎阳张绪超黄绍良魏菁黄文革周敦华吴燕峰
- 关键词：肿瘤K562细胞NOD/SCID小鼠动物模型
- 不同方式刺激脐血树突状细胞对细胞因子诱导杀伤细胞和自然杀伤细胞杀伤活性的影响
- 2005年
- 黎阳黄绍良吴燕峰魏菁包蓉周敦华
- 关键词：细胞因子诱导脐血树突状细胞杀伤活性CIK
- 不同细胞因子诱导脐血来源的CIK、NK细胞对K562细胞杀伤活性的研究被引量：3
- 2005年
- 目的:了解不同细胞因子组合扩增的脐血CIK、NK细胞对人K562细胞株的杀伤活性的差异性。方法:通过SCF、FLT3L、IL2、IL7及IL15等细胞因子的不同组合扩增的脐血CIK、NK细胞,分为3组,A组(SCF+IL2+IL7+IL15)、B组(SCF+FLT3L+IL2+IL7+IL15)和C组(IL2+IL7+IL15,对照组);通过MTT法检测各组CIK、NK细胞在不同效靶比下对K562的杀伤率,计算各组的总杀伤单位。结果:经过21天培养A组体系中CIK+NK细胞的比例平均超过60%,B组CIK+NK细胞的比例平均超过70%,而C组约为50%;各组扩增的CBCIKNK细胞同组间在效靶比20∶1时对K562的杀伤率均显著高于10∶1(P<0.01)。在不同效靶比下A组CIKNK细胞对K562的杀伤率显著高于B和C组(P<0.01);C组CIKNK细胞对K562的杀伤率稍高于B组,但两组间对K562的杀伤率无显著性差异。A组总杀伤单位显著高于C组,与B组无显著差异。结论:不同细胞因子组合扩增的脐血CIK、NK细胞对人K562细胞株的杀伤活性有差异,考虑到对效应细胞的扩增效果,B组为具有最佳杀伤活性的脐血CIK、NK细胞培养体系,其中的SCF、FLT3L对CIKNK细胞诱导有协同效果。
- 黎阳黄绍良魏菁周敦华吴燕峰
- 关键词：细胞毒过继免疫治疗
- 诱导脐血单个核细胞分化为树突状细胞的实验研究被引量：3
- 2004年
- 目的 诱导脐血源树突状细胞对恶性血液病脐血移植后的过继免疫治疗十分重要。诱导条件对树突状细胞产率影响很大。本研究观察粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)、IL 4及TNF α分阶段诱导脐血单个核细胞来源树突状细胞的效果。方法 通过Ficoll Hypaque法分离脐血单个核细胞 ,以GM CSF、IL 4及TNF α分阶段诱导脐血来源树突状细胞的生成 ,培养 12d收获细胞 ,以光镜和电镜观察其细胞形态学特点 ,以流式细胞术检测其表面标记。结果 经培养 12d ,每 2× 10 6脐血单个核细胞收获树突状细胞数为 (0 .4 6± 0 .13)×10 6,CD80 + 、CD86 + 细胞比例分别为 89.98%± 4 .32 %、86 .86 %± 7.17% ,而CD1a+ 细胞比例 4 3.16 %± 5 .80 % ,经光镜和电镜下观察细胞具有典型的树突状细胞形态学特征。结论 通过GM CSF、IL 4及TNF α的树突状细胞培养体系和分阶段诱导法可高效率诱导脐血树突状细胞。
- 黎阳包蓉黄绍良吴燕峰魏菁周敦华
- 关键词：树突状细胞分化脐血细胞因子
- 人脐血及外周血CIK、NKT及NK细胞含量及意义被引量：1
- 2005年
- 【目的】了解人脐血(CB)及不同来源外周血(PB)CIK 细胞、NKT 细胞和 NK 细胞的分布规律。【方法】通过流式细胞术检测不同来源标本中 CD3+CD56+CIK 细胞、Vα24+CD161+NKT 细胞和 CD3-CD56+NK 细胞的比例,比较上述细胞分布的差异性。【结果】CB 中 CIK 细胞、NK 细胞的比例分别为1.37%±0.51%、7.07%±3.63%,均显著低于正常学龄前儿童外周血(CPB)及成人外周血(APB)(P<0.01);而 NKT 细胞在 CB、CPB 和 APB 中比例均低,且三组间无显著性差异。【结论】CB 中的抗肿瘤免疫效应细胞 CIK 细胞、NKT 细胞及 NK 细胞含量均低,其中 CIK 细胞、NK 细胞比例显著低于 PB。
- 黎阳方建培黄绍良陈纯包蓉魏菁吴燕峰
- 关键词：CIK细胞NKT细胞脐血
- 树突细胞融合瘤苗对脐血源性CIK/NK细胞杀伤作用的影响被引量：4
- 2005年
- 目的研究K562、Raji肿瘤细胞树突细胞(DC)融合瘤苗对脐血来源细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞/自然杀伤(NK)细胞杀伤作用的影响。方法诱导脐血单个核细胞成为DC、CIK/NK细胞,通过聚乙二醇将灭活K562和Raji肿瘤细胞株与DC融合形成K562-DC和RajiDC融合瘤苗。实验分为3组:DC融合瘤苗组、灭活肿瘤细胞加DC组、单纯DC组。以MTT法评价各组不同共孵育刺激对CIK/NK细胞杀伤活性的影响。结果使用不同抗原刺激的各组脐血来源CIK/NK细胞对特定肿瘤的杀伤有促进作用,但不具有特异性。在20∶1效靶比时,K562-DC和RajiDC融合瘤苗组对Raji细胞的杀伤率分别为(75.44±4.19)%和(81.33±4.18)%,RajiDC融合瘤苗组对Raji细胞的杀伤率显著高于K562-DC融合瘤苗组(P<0.05);灭活K562+DC和灭活Raji+DC组对Raji细胞的杀伤率分别为(73.12±4.22)%和(80.49±4.27)%,灭活Raji+DC组对Raji细胞的杀伤率显著高于灭活K562+DC组(P<0.01),各组对K562细胞的杀伤率比较差异无统计学意义(P>0.05)。不同效靶比CIK/NK细胞对不同种属的肿瘤细胞株的杀伤率比较,Raji细胞刺激的效果更强些。相同的肿瘤抗原刺激的或经灭活肿瘤细胞加DC刺激的CIK/NK细胞对不同种属的肿瘤细胞杀伤率差异无统计学意义。
- 黎阳黄绍良吴燕峰魏菁孟瑛周敦华包蓉
- 关键词：树突细胞杀伤细胞胎血
- 树突状细胞对脐血来源细胞因子诱导杀伤、自然杀伤细胞杀伤活性及CD45RO表达的影响
- 2004年
- 目的 :探索同一来源脐血树突状细胞 (DCs)对细胞因子诱导杀伤 (CIK)、自然杀伤 (NK)细胞杀伤活性和CIK细胞上CD4 5RO表达的影响。方法 :通过细胞因子组合诱导、扩增脐血来源的DCs、CIK和NK细胞 ,杀伤效应细胞分为两组 :A组为接受DCs共孵育 6d刺激的CIK、NK细胞 ,B组为未接受任何刺激的CIK、NK细胞 ,了解DCs对相应效靶比下CIK、NK细胞杀伤K5 6 2、HL - 6 0细胞株细胞毒活性的影响 ;通过流式细胞术检测两组CIK细胞上CD4 5RO、CD4 5RA的表达率。结果 :随着效靶比的升高 ,脐血CIK、NK细胞对肿瘤细胞株的杀伤力增加。在 2 0∶1、10∶1效靶比下 ,A组CIK、NK细胞对HL - 6 0的杀伤率分别为 76 77%± 5 76 %、5 5 87%± 2 0 9% ,B组为 6 1 14 %±3 72 %、4 9 96 %± 1 5 1% ,A组对HL - 6 0的杀伤明显高于B组 ;在 2 0∶1效靶比下 ,A组对K5 6 2的杀伤明显高于B组 ;而在 10∶1效靶比下两组之间的杀伤活性未见显著差异 ;A组CIK细胞上CD4 5RO表达率显著高于B组。结论 :DCs与CIK、NK细胞共孵育可提高CIK、NK细胞的细胞毒活性及增加CIK细胞上CD4
- 黎阳黄绍良吴燕峰周敦华魏菁包蓉
