国家自然科学基金(30671554)
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
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- 相关机构：大连民族学院吉林农业大学东北农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 葡萄球菌肠毒素C基因的克隆表达及其生物学活性鉴定
- 2009年
- 为表达和纯化金黄色葡萄球菌(金葡菌)超抗原毒素,本研究从金葡菌中克隆葡萄球菌肠毒素C2(sec2)基因,构建了表达葡萄球菌肠毒素C与谷胱甘肽硫转移酶(GST-SEC)融合蛋白的重组质粒(pGEMSEC),通过大肠杆菌表达、亲和纯化、酶切、再亲和纯化,建立了便于大量制备高纯度的重组SEC(rSEC)的简便方法。此外,通过酶联免疫试验及双向琼脂扩散试验检测了rSEC免疫反应性,并通过测定rSEC刺激鼠脾细胞产炎性因子来检测了rSEC的超抗原活性。结果表明,rSEC与野生型SEC具有相同的免疫反应性和超抗原活性,为在今后对该超抗原进行进一步应用性开发和构建定点减毒诱变奠定了工作基础。
- 崔京春张宝君钱爱东王全凯童光志
- 关键词：金黄色葡萄球菌基因克隆
- 金黄色葡萄球菌乳腺感染模型的建立与评价被引量：7
- 2009年
- 本研究通过将临床分离的金黄色葡萄球菌(金葡菌)834菌株以不同的感染剂量经乳腺基部直接注射和剪断乳头尖端后经乳导管注射2种途径感染泌乳母鼠,建立了乳腺炎病理模型,并对感染后母鼠乳腺眼观病理变化、乳腺组织的病理学变化和乳腺中金葡菌数进行了比较研究。结果表明,与乳腺基部直接注射相比,剪断乳头尖端后经乳导管注射法可诱发更为典型的乳腺感染,不仅乳腺中感染菌数多、病理变化明显,而且试验结果的重复再现性好,是一种良好的小动物金葡菌乳腺感染模型。该模型的建立,将为进一步研究金葡菌乳腺炎的病原特性、发病机理、治疗方法和疫苗开发,提供可靠的小动物模型。
- 张宝君崔京春张献钱爱东童光志胡东良中根明夫王全凯
- 关键词：金黄色葡萄球菌乳腺炎
- 无毒突变肠毒素免疫对金黄色葡萄球菌乳腺感染的免疫效果研究
- 2009年
- 本研究表达并提纯了无毒诱变葡萄球菌肠毒素C与谷胱甘肽硫转移酶重组融合蛋白(GST-mSEC)。用GST-mSEC作免疫抗原对小鼠进行免疫,研究其对金黄色葡萄球菌(金葡菌)经乳导管注射感染的免疫效果。试验结果表明,在小鼠乳腺感染金葡菌3d后,免疫小鼠乳腺的眼观病理变化显著轻于未免疫的对照组,乳腺组织中的菌数也明显低于未免疫的对照组。GST-mSEC免疫小鼠可引起大量的特异性抗体产生,并对葡萄球菌超抗原刺激的炎症性细胞因子的产生具有显著的中和抑制作用。结果表明GST-mSEC融合蛋白及其诱导的特异性抗体对金葡菌引起的乳腺感染具有良好的抗感染作用。
- 张宝君崔京春张献钱爱东童光志胡东良中根明夫王全凯
- 关键词：金黄色葡萄球菌葡萄球菌肠毒素乳腺炎免疫
- 理化因素对葡萄球菌无毒诱变超抗原GST-mTSST-1免疫活性的影响被引量：2
- 2011年
- 应用免疫琼脂扩散法检测温度、pH、反复冻融、保护剂等理化因素对GST-mTSST-1融合蛋白免疫活性的影响,结果表明,在4℃30 d、20℃72 h、37℃72 h条件下,GST-mTSST-1融合蛋白的免疫活性不受影响,但该蛋白不耐高温,60℃5 min完全失活,耐碱不耐酸,对反复冻融有较好的稳定性,50 mg/mL蔗糖保护剂有利于提高该蛋白的免疫稳定性,为GST-mTSST-1融合蛋白规模化生产工艺的设计奠定了基础.
- 郭海勇郭伟生崔京春钱爱东
- 关键词：金黄色葡萄球菌免疫学活性超抗原
