上海市科学技术委员会科研基金(09411960800) 作品数:6 被引量:18 H指数:3 相关作者: 李新星 王坚 王昊陆 王伟 易静 更多>> 相关机构: 上海交通大学医学院附属仁济医院 上海交通大学 更多>> 发文基金: 上海市科学技术委员会科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
乳腺癌耐药蛋白的研究现状 被引量:2 2012年 乳腺癌耐药蛋白(ABCG2/BCRP)属于ABC(ATP-binding cas s ette)转运体家族成员,主要参与细胞内物质的转运。以往研究认为ABCG2与肿瘤细胞的多耐药性有关,近十年来研究发现ABCG2对干细胞的分化和发育具有保护作用,且在肿瘤干细胞内大量表达。因此,研究ABCG2的结构与功能、ABCG2在肿瘤耐药中的作用及ABCG2与肿瘤干细胞的关系,有助于为肿瘤治疗寻找新颖的靶点。 李新星 王坚关键词:乳腺癌 耐药蛋白 干细胞 大黄素诱导胆管癌QBC939细胞凋亡的实验研究 被引量:1 2012年 目的探讨大黄素在体外诱导人胆管癌QBC939细胞凋亡的作用及机制。方法采用3.(4,5.二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测大黄素对细胞增殖的抑制作用;在荧光显微镜下观察凋亡细胞的形态学变化;运用流式细胞技术检测细胞凋亡率和细胞内活性氧水平;通过比色法测定细胞内caspase-9及caspase-3的相对活性。结果大黄素以时间一剂量的方式抑制胆管癌QBC939细胞的增殖;在荧光显微镜下,凋亡的细胞呈现亮色,或核呈分叶、碎片状,细胞皱缩;QBC939细胞在30p,mol/L和50μmol/L浓度的大黄素作用下,24h的凋亡率分别为38.9%±9.07%及67.09%±4.08%(P〈0.05),30min后细胞内活性氧的水平分别为对照组的1.65±0.08及2.28±0.04倍(P〈0.05);大黄素可激活caspase-9及caspase-3,导致其活性升高(P〈0.05)。结论大黄素能通过诱导凋亡来抑制胆管癌QBC939细胞的增殖,其机制与细胞的活性氧水平升高及caspase-9及caspase-3活化有关。 李新星 王坚关键词:大黄素 细胞凋亡 活性氧 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 侧群细胞的研究进展 2011年 在肿瘤的发生、发展中侧群细胞扮演着极其重要的作用。侧群细胞具有肿瘤干细胞的特性,尤其具备肿瘤的始发潜能,同时对化疗药物有较强的抵抗能力。对侧群细胞的生物学特性、分选与培养方法及侧群细胞与肿瘤耐药关系的研究,能为肿瘤的诊断和治疗提供新的思路和方法。 李新星 王坚关键词:肿瘤干细胞 活性氧 侧群细胞 人胆囊癌SGC996细胞株侧群细胞的分离与体外培养 被引量:6 2011年 目的分选人胆囊癌细胞株SGC996的侧群细胞,并行体外培养,初步验证其干细胞的特性。方法应用流式细胞仪分选人胆囊癌细胞株SGC996的侧群细胞和主群细胞,将两群细胞分别在有血清和添加干细胞因子的无血清培养液条件下培养。应用噻唑蓝(MTT)法检测两群细胞在血清培养条件下的增殖能力。结果人胆囊癌细胞株SGC996的侧群细胞分选比例仅为1.0%,在维拉帕米阻断后降至0.1%。侧群细胞在无血清培养液中能形成干细胞样“肿瘤球”,但主群细胞在该条件下生长能力较差,甚至死亡。MTT结果显示,在有血清培养条件下,侧群细胞在第5、6,7天的吸光度值分别为1.26±0.15、1.73±0.18、2.21±0.17,较主群细胞的0.95±0.06、1.31±0.10、1.86±0.11,各组差异均有统计学意义(t=3.30、3.54、3.03,P〈0.05)。结论人胆囊癌细胞株SGC996中存在侧群细胞,这群细胞在体外培养能形成干细胞样“肿瘤球”,表现出更强的体外增殖能力,为胆囊癌干细胞进一步研究提供理论基础。 李新星 王昊陆 王伟 易静 王坚关键词:胆囊癌 肿瘤干细胞 侧群细胞 ABCG2和OCT4在胆囊癌组织中的表达及临床意义 被引量:6 2012年 目的:探讨ABCG2和OCT4在胆囊癌组织中的表达及临床意义。方法:应用实时荧光定量PCR法检测新鲜的胆囊良、恶性组织中ABCG2和OCT4 mRNA中的表达。采用Western印迹法检测新鲜的胆囊良、恶性组织中ABCG2和OCT4蛋白的表达。采用免疫组化法检测40例胆囊癌组织和8例慢性胆囊炎组织石蜡切片中ABCG2和OCT4的表达水平。对ABCG2和OCT4表达情况进行统计学处理,并分析其与临床病理特征之间的关系。结果:①实时荧光定量PCR显示,胆囊癌组织中ABCG2和OCT4 mRNA中的表达分别为(117.9±10.5)和(86.2±13.2),均高于慢性胆囊炎组织[(27.1±7.9)和(2.1±1.0)]的表达,各组间有统计学差异。②Western印迹法检测显示,ABCG2蛋白在胆囊癌组织中的表达水平较强,而在慢性胆囊炎组织表达较弱;在慢性胆囊炎组织中未见OCT4蛋白表达,而在肿瘤中都有表达。③免疫组化实验结果显示,ABCG2的阳性表达率在胆囊癌和慢性胆囊炎组分别为60.0%和37.5%,两组间有统计学差异(P<0.05)。④OCT4在慢性胆囊炎组织中不表达;在胆囊癌组织中,OCT4表达阳性率为45%。⑤胆囊癌组织中,ABCG2和OCT4表达水平在年龄、性别方面无统计学差异(P>0.05),但与周围脏器侵犯与否、癌组织分化程度及病理TNM分期有关(P<0.05)。⑥ABCG2与OCT4在胆囊癌组织中的表达呈正相关(rs=0.65,P<0.05)。结论:与慢性胆囊炎组织相比,ABCG2和OCT4在胆囊癌组织中的转录和翻译水平都有过表达。ABCG2和OCT4的表达水平与胆囊癌侵袭能力、分化程度及TNM分期有关,且两者表达呈正相关;提示ABCG2和OCT4是反映胆囊癌生物学行为的重要指标。 李新星 王坚关键词:胆囊癌 ABCG2 OCT4 PCNA与Caspase-3在胆囊癌组织中的表达及其临床意义 被引量:3 2012年 目的探讨增殖细胞核抗原(PCNA)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)在胆囊癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化检测42例胆囊癌组织和10例慢性胆囊炎组织石蜡切片中PCNA和Caspase-3的表达水平,并分析与临床病理特征之间的关系。结果 (1)PCNA的阳性表达率在胆囊癌及慢性胆囊炎组分别为64.29%和30%,两组间差异有显著性(P<0.05);Caspase-3在胆囊癌及慢性胆囊炎组分别为30.95%和70%,两组间差异有显著性(P<0.05)。(2)胆囊癌组织中,PCNA和Caspase-3表达水平在性别、年龄方面差异无统计学意义(P>0.05),但与淋巴结转移、癌组织分化程度及病理TNM分期有关(P<0.05)。(3)PCNA和Caspase-3的表达呈负相关(rs=-0.62,P<0.01)。结论 PCNA和Caspase-3的表达在胆囊癌组织中呈负相关,且两者表达水平与胆囊癌淋巴结转移、癌组织分化程度及病理TNM分期有关,提示PCNA和Caspase-3是反映胆囊癌生物学行为的重要指标。 李新星 王坚关键词:胆囊肿瘤 增殖细胞核抗原 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3