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国家自然科学基金(30973077)

作品数:4 被引量:6H指数:1
相关作者:姜晓兵王旋赵洪洋熊志勇孙云更多>>
相关机构:华中科技大学更多>>
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相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 4篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 2篇单链
  • 2篇单链抗体
  • 2篇生长因子受体
  • 2篇受体
  • 2篇抗体
  • 2篇表皮
  • 2篇表皮生长因子
  • 2篇表皮生长因子...
  • 1篇蛋白
  • 1篇血管
  • 1篇血管内皮
  • 1篇血管内皮细胞
  • 1篇原代大鼠
  • 1篇原代培养
  • 1篇融合蛋白
  • 1篇鼠脑
  • 1篇肿瘤
  • 1篇细胞
  • 1篇小鼠
  • 1篇毛细血管

机构

  • 4篇华中科技大学

作者

  • 4篇王旋
  • 4篇姜晓兵
  • 3篇赵洪洋
  • 2篇孙云
  • 2篇熊志勇
  • 2篇周毅
  • 1篇张方成
  • 1篇卢高方
  • 1篇罗赤星

传媒

  • 2篇中国临床神经...
  • 1篇细胞与分子免...
  • 1篇华中科技大学...

年份

  • 1篇2014
  • 3篇2012
4 条 记 录,以下是 1-4
排序方式:
原代大鼠脑毛细血管内皮细胞培养与鉴定被引量:3
2014年
目的介绍一种从大鼠脑组织中分离培养原代大鼠脑血管内皮细胞(BCEC)的方法。方法采用酶消化、滤网机械分离结合右旋糖苷密度离心的方法分离脑毛细血管段,接种在涂有明胶的培养皿培养BCEC。结果通过环境扫描电镜观察细胞形态,量子点超敏细胞免疫荧光鉴定,我们培养出来了纯度较高的原代BCEC。结论将分离的鼠脑毛细血管段置于涂有明胶的培养皿上培养原代BCEC的新方法比传统的培养法可以得到纯度更高的BCEC,为后期基于BCEC为载体的动物实验奠定了细胞基础。
熊志勇姜晓兵王旋孙云卢高方赵洪洋
关键词:原代培养
EGFRvⅢ单链抗体治疗小鼠脑胶质瘤的研究被引量:1
2012年
目的探讨表皮生长因子受体III型突变体单链抗体(EGFRvIIIscFv)对小鼠脑胶质瘤的治疗效果。方法人工合成EGFRvIIIscFv基因序列并构建到原核表达载体中,诱导表达重组蛋白,经电泳和western blotting鉴定;再通过纯化和复性,得到有功能的EGFRvIIIscFv;用酶联免疫吸附分析(ELISA)测定抗体的亲和常数后,通过立体定向仪将其注射到胶质瘤小鼠的脑内,观察荷瘤鼠的生存期,免疫荧光法检测肿瘤血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果双酶切鉴定和测序结果证实人工合成的EGFRv Ⅲ scFv序列与基因数据库中完全一致;经过诱导表达,电泳显示重组蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式表达;western-blotting鉴定蛋白分子量为63kDa,与预期大小基本一致;该单链抗体亲和常数为0.203×10-8mol/L;将蛋白注射到荷瘤鼠的脑内,与对照组相比,实验组肿瘤VEGF表达量明显减少、荷瘤鼠中位生存期明显延长(P<0.01)。结论 EGFRvscFv重组蛋白可与EGFRvⅢ特异性结合;脑内注射EGFRvⅢscFv可明显降低胶质瘤血管形成,延长荷胶质瘤小鼠生存期。
王旋姜晓兵熊志勇孙云周毅赵洪洋
关键词:胶质瘤单链抗体小鼠
融合蛋白IP10-EGFRvⅢScFv的构建及表达被引量:1
2012年
目的构建细胞因子融合蛋白IP10-EGFRvⅢScFv,建立并检测稳定表达融合蛋白的细胞株NIH3T3。方法通过RT-PCR法扩增小鼠IP10基因,全基因人工合成EGFRvⅢScFv,两段目的基因依次克隆于表达载体pcDNA3.1(-)PCMV启动子下游,二者以编码(Gly4Ser)3的柔性接头序列(linker)相连。将构建好的pcDNA3.1(-)IP10-EGFRvⅢScFv转染NIH3T3细胞,并用G418筛选出阳性克隆,采用实时定量PCR和Western blot法检测克隆细胞目的基因和蛋白的表达量,并观察转染后的NIH3T3细胞体外生长状况。结果成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(-)IP10-EGFRvⅢScFv,经过浓度为200mg/L的G418工作液筛选出了稳定高表达IP10-EGFRvⅢScFv的细胞系NIH3T3,且其生长状态并未受转染基因的影响。通过荧光检测、实时定量PCR、Western blot法检测到转染72h后目的基因和蛋白表达量最高,和稳定克隆株相比,表达量并无明显差异(P>0.05)。结论构建的新型细胞因子融合蛋白可以在NIH3T3细胞内获得稳定表达,为后期融合蛋白的提取及功能研究打下基础。
王旋赵洪洋罗赤星周毅张方成姜晓兵
关键词:表皮生长因子受体单链抗体融合蛋白
抗肿瘤单链抗体融合蛋白的研究进展被引量:1
2012年
尽管有手术、放疗和化疗等综合治疗手段,在过去20多年,恶性脑胶质瘤特别是多形胶质母细胞瘤的预后并无明显改善。然而,在成人颅内恶性肿瘤中,多形胶质母细胞瘤每年的发病率占到50%以上[1]。虽然常规手术配合放化疗可以延长患者的生命,但是浸润性生长的特性决定了上述方法都无法有效清除肿瘤细胞,导致肿瘤在短时间内复发,患者的中位生存期一般不超过15个月[2]。
王旋姜晓兵
关键词:抗肿瘤
共1页<1>
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