国家自然科学基金(30973074)
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 相关作者：李光辉王东林纪华陈媛媛汤金梁更多>>
- 相关机构：第三军医大学新桥医院第三军医大学西南医院四川省人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
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- RNAi抑制STAT3表达、活化诱导人胶质瘤干细胞凋亡与分化被引量：3
- 2011年
- 目的抑制人胶质瘤干细胞(GSCs)信号转导活化转录因子3(STAT3)表达、活化,了解STAT3在细胞凋亡、分化调节中的作用。方法 RNAi抑制人GSCs中STAT3表达、活化,流式细胞分析检测细胞凋亡和干细胞比例变化;实时定量多聚酶链反应(PCR)和Weastern-blot检测Bcl-2、BAX、Caspase-3表达;干扰组和对照组GSCs接种裸鼠,观察成瘤情况。结果干扰组人GSCs凋亡比例(16.03%)显著高于空白组(2.03%)和阴性对照组(3.19%)(P<0.05),CD133+细胞比例(5.7%)显著低于空白组(92.2%)和阴性对照组(87.7%);干扰组Bcl-2表达显著低于空白组和阴性对照组(P<0.05);裸鼠移植瘤实验中,阴性对照组3只成瘤,而干扰组均未成瘤。结论抑制人GSCs中STAT3表达、活化,可诱导凋亡,促进分化,抑制其成瘤能力。细胞凋亡增加可能与Bcl-2表达下调有关。
- 李光辉纪华吕胜青尹昌林王东林
- 关键词：凋亡分化
- 低剂量超微分割与常规分割放疗对脑胶质瘤细胞的生物学效应比较被引量：6
- 2012年
- 目的比较低剂量超微分割放疗与常规分割放疗对脑胶质瘤细胞的作用效果。方法以低剂量率超微分割放疗(每0.2 Gy间隔3 min,剂量率为0.066 7 Gy/min)和常规分割(剂量率4～6 Gy/min)2种方法照射脑胶质瘤GL261细胞,分别在第1、2、3天采用彗星分析和流式细胞分析检测细胞DNA损伤、凋亡、细胞周期分布。结果彗星实验显示低剂量率超微分割放疗可产生与常规分割等效的细胞DNA损伤,2组间各时间点彗星荧光图像的尾部DNA百分含量(tail DNA%)、尾长(tail length)、尾距(tail moment)均数差异无显著性(P>0.05)。细胞凋亡、存活情况显示超微分割组各时间点的细胞存活率较常规分割组低,差异有显著性(P<0.01),2组细胞周期分布差异无显著性(P>0.05)。结论低剂量率超微分割放疗对脑胶质瘤细胞GL261可产生与常规分割等效的DNA损伤,但对细胞的杀伤作用强于常规分割照射。该现象可能与低剂量率超微分割照射胶质瘤细胞后有不同的DNA损伤修复机制有关。
- 陈媛媛汤金梁龙海霞李光辉许建平
- 关键词：神经胶质瘤放射治疗剂量DNA损伤
- 增强PIAS3表达对CHG-5细胞生物学效应的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨增强人胶质瘤CHG-5细胞内的活化STAT3抑制蛋白(protein inhibitor of activated STAT3,PIAS3)表达对CHG-5细胞增殖及凋亡等生物学效应的影响。方法构建PIAS3真核表达载体pEGFP-N1-PIAS3,使用脂质体法瞬时转染人CHG-5胶质瘤细胞,同时设置空白对照组和阴性对照组,转染48h后用RT-PCR、蛋白质印迹法和免疫组化法分别在核酸和蛋白水平检测目的蛋白表达,采用流式细胞技术检测转染后的胶质瘤细胞凋亡和细胞增殖变化。结果转染后的CHG-5细胞可见PIAS3绿色荧光蛋白表达,显微镜观察发现细胞形态改变,坏死细胞增多。转染组PIAS3mRNA的积分密度值为523 414.50±34 502.89,与空白对照组的135 668.00±6 693.66和阴性对照组的154 511.67±8 266.89相比,转染组PIAS3mRNA表达增强,χ2=13.053,P=0.01。转染组PIAS3蛋白的积分密度值为30.13±3.76,与空白对照组的13.83±0.77和阴性对照组的15.02±0.87比较,CHG-5细胞转染PIAS3基因后,PIAS3蛋白表达增强,χ2=14.193,P=0.001。提示转染后PIAS3mRNA和蛋白表达增加。转染组的早期细胞凋亡率为(12.5±1.9)%,较空白对照组的(6.4±1.1)%和阴性对照组的(5.4±1.8)%升高,χ2=7.407,P=0.005;转染组的活细胞率为(86.9±2.2)%,较空白对照组的(92.1±1.2)%和阴性对照组的(93.1±2.0)%降低,χ2=4.775,P=0.019。转染组S期细胞百分率为(35.2±4.2)%,高于空白对照组的(24.5±5.1)%和阴性对照组的(23.0±3.7)%,χ2=8.179,P=0.003;转染组G2期细胞百分率为(10.7±5.4)%,高于空白对照组的(21.3±4.0)%和阴性对照组的(27.8±5.2)%,χ2=17.121,P<0.01。结论外源性增强PIAS3表达,引起CHG-5胶质瘤细胞生长缓慢,出现S期阻滞,并促进细胞凋亡发生。
- 纪华余巍李光辉王东林陈宏
- 关键词：PIAS3胶质瘤细胞细胞周期凋亡
