重庆市自然科学基金(CSTC2009BB5402)
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
- 相关作者：李惠陈瑾陈恒君卢小娟胡冬玉更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- DKK1和β-catenin在皮肤鳞癌及癌前病变中的表达及相关性被引量：3
- 2012年
- 目的:探讨DKKl(Dickkopf-1)和β-catenin在正常表皮和不同表皮肿瘤中的表达及其相关性。方法:应用免疫组织化学方法检测19例脂溢性角化病(Seborrheic Keratosis,SK)、16例光化性角化病(Actinic keratosis,AK)、24例Bowen病(Bowen’s Disease,BD)、25例皮肤鳞状细胞癌(Squamous Cell Carcinoma,SCC)和22例正常表皮组织(Normal epidermal tissue,NET)中DKK1和β-catenin的表达情况。结果:DKKl在正常表皮组织的阳性表达定位于胞质中,在SK、AK、BD和SCC中的阳性表达率分别为63.16%、50.00%、12.50%、8,00%,β-catenin在正常表皮组织中的表达定位于胞膜,在SK、AK、BD和SCC中的异常表达率分别为15.79%、56.25%、91.67%、96.00%;皮肤鳞癌中DKKl和β-catenin的表达存在负相关(r=-0.692,P=0.000)。结论:Wnt信号通路(the wingless pathwayin Drosophila)可能在表皮肿瘤形成过程中起一定作用,DKK1的表达缺失可能通过作用于经典Wnt信号通路促进β-catenin的异常表达。
- 胡冬玉李惠陈瑾
- 关键词：表皮肿瘤DKK1Β-CATENIN免疫组化
- 人Dickkopf1基因腺病毒载体的构建及感染黑色素瘤后β-catenin表达的研究被引量：4
- 2010年
- 目的构建高表达外源性Dickkopf1(DKK1)基因的重组腺病毒载体(Ad-DKK1);感染黑色素瘤细胞株后研究Wnt信号通路中主要信号分子β-catenin的表达变化。方法利用PCR技术扩增目的基因DKK1;应用分子克隆技术和AdEasy系统重组腺病毒技术,把目的基因亚克隆到穿梭质粒;经酶切和测序后,在BJAdeasy中同源重组;用PacⅠ酶切过的重组腺病毒DNA在HEK293中包装并扩增;实验分为5组:Ad-DKK1感染组、Ad-SimDKK1感染组、Ad-GFP感染组、Ad-RFP感染组和空白细胞对照组。按照MOI值为80感染恶性黑色素瘤细胞株A375,观察细胞形态;RT-PCR法检测DKK1、β-catenin基因的表达,MTT法检测细胞活力。结果重组腺病毒Ad-DKK1经酶切鉴定与测序证实构建成功。感染A375细胞,感染率均大于80%,感染后细胞形态无明显改变。Ad-DKK1感染组DKK1的表达水平(1.638±0.067)与其他4组(0.718±0.086、1.424±0.125、1.414±0.089、1.423±0.088)比较差异具有统计学意义(P<0.05),其β-catenin的表达水平(0.590±0.011)与其他4组(0.895±0.012,0.749±0.024,0.754±0.012,0.759±0.014)比较差异具有显著统计学意义(P<0.01)。MTT法检测细胞活力:Ad-DKK1感染组(0.370±0.014)与其他4组(0.412±0.017、0.398±0.006、0.395±0.007、0.426±0.016)比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建重组腺病毒Ad-DKK1,经其感染的恶性黑色素瘤细胞中DKK1的表达明显增强,β-catenin的表达显著降低,A375的细胞活力受到抑制。
- 陈恒君李惠陈瑾卢小娟
- 关键词：腺病毒科黑色素瘤信号传导WNT蛋白质类
