国家自然科学基金(81160151)
- 作品数:16 被引量:70H指数:6
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- 细菌性脑膜炎患者脑脊液细菌基因组DNA的提取及16S rDNA的鉴定被引量:7
- 2013年
- 目的探讨16SrDNA聚合酶链式反应(PCR)在细菌性脑脊液病原菌检查中的应用价值。方法收集临床疑诊为细菌性脑膜炎的患者脑脊液标本,高速离心富集细菌后,进行脑脊液中细菌基因组DNA的提取,再进行16SrD-NA PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳。将检测结果与传统的细菌培养结果进行比较。结果 58例患者脑脊液样本中,23例16SrDNA PCR阳性,阳性率为39.7%;58例脑脊液样本中细菌培养阳性为10例,阳性率为17.2%。PCR检测阳性率明显高于传统的细菌分离培养法(P<0.05)。结论脑脊液细菌基因组DNA提取及16SrDNA PCR鉴定技术操作简单,耗时短,灵敏度高,在细菌性脑膜炎病原学诊断方面具有良好的应用前景。
- 梁志娟侯晓霖王振海刘爱翠
- 关键词:细菌性脑膜炎脑脊液RDNAPCR扩增
- HCV刺激小鼠小胶质细胞后TLR9 mRNA的表达被引量:1
- 2011年
- 目的检测丙型肝炎病毒(HCV)刺激小鼠小胶质细胞(BV2)后Toll样受体9(TLR9)的表达,探讨TLR9参与小胶质细胞抗HCV的免疫发病机制。方法将BV2细胞分为HCV阳性血清组(以含20% HCV阳性血清的DMEM培养),健康人血清组(以含20%健康人血清的DMEM培养),空白对照组(以含10%胎牛血清的DMEM培养),分别在培养4、12、20、36h收集细胞,以实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法观察TLR9 mRNA表达。结果 BV2细胞有TLR9 mRNA表达。HCV阳性血清组中TLR9 mRNA于4、12、20、36h各时间点相对表达量分别为3.50±0.33、2.03±0.10、2.05±0.12、2.02±0.14,均高于健康人血清对照组(分别为0.99±0.08、1.01±0.09、1.00±0.10、0.99±0.09)和空白对照组(均为1)(P<0.01),且以HCV阳性血清刺激4h后TLR9 mRNA表达量最高(P<0.01)。结论 BV2细胞能够表达TLR9 mRNA,且BV2经HCV刺激后TLR9 mRNA表达明显增加,提示TLR9可能参与BV2抗HCV的免疫发病机制。
- 王振海李晓梅胡坤
- 关键词:小胶质细胞肝炎病毒属TOLL样受体9实时荧光定量PCR
- 化脓性脑膜炎临床特征及预后的影响因素分析被引量:9
- 2013年
- 目的探讨化脓性脑膜炎患者临床特征与预后的相关性因素,以便及时对化患者进行治疗干预,降低其病死率、致残率及后遗症率。方法收集71例化脓性脑膜炎患者资料,对其首发症状、脑脊液实验室检查指标、治疗等因素综合分析。将脑脊液压力、白细胞计数、蛋白含量、细菌培养阳性率、耐药率等作为判断预后的指标,对患者预后情况进行分析。结果结果显示CSF细胞数>1 000个/mm3、CSF蛋白>2 g/L、CSF葡萄糖<2.8mmol/L、CSF细菌耐药率对疾病预后的影响较大。结论在影响患者预后因素的指标中,脑脊液白细胞计数、葡萄糖含量、蛋白含量、细菌耐药率均能作为预后不良的指标。
- 王馥瑜梁志娟侯晓霖王振海
- 关键词:化脓性脑膜炎预后
- 脑脊液常规与细胞学两种方法检测脑脊液白细胞计数结果的比较被引量:3
- 2014年
- 目的比较脑脊液常规(以下简称"常规")和脑脊液细胞学(以下简称"细胞学")检测脑脊液白细胞计数的结果并探讨两者间存在差异的可能原因。方法回顾性分析287例于作者医院行脑脊液检查患者的临床资料,统计常规及细胞学两种方法计数脑脊液白细胞的结果 ,并结合临床进行比较。结果细胞学方法检测显示白细胞计数结果正常119例,结果异常168例(58.5%);常规白细胞计数结果正常178例,结果异常109例(38.0%);常规计数正常而细胞学计数异常62例,常规计数异常而细胞学计数正常3例;常规计数及细胞学计数均为异常结果的106例样本中,98例的细胞学计数明显高于常规。与临床诊断对比,细胞学计数结果与临床符合程度高于常规计数法(χ2=24.287,P=0.000)。结论细胞学在脑脊液白细胞计数中更为准确,临床符合程度高于常规计数法。
- 刘强牛晓艳何学仙王振海
- 关键词:脑脊液细胞学
- 单纯疱疹病毒性脑炎小鼠脑组织Mx1、IFN-α的表达被引量:1
- 2012年
- 目的通过检测Mx1、IFN-α在单纯疱疹病毒性脑炎(herpes simplex encephalitis,HSE)小鼠模型脑组织中的表达,初步评价其抗病毒作用。方法建立HSE小鼠模型为病毒组,设置假手术组及正常对照组,分别应用RT-qPCR、RT-PCR方法检测小鼠脑组织Mx1、IFN-αmRNA的相对表达并采用Pearson相关分析分析两者的相关性;对Mx1进行测序。结果 HSE小鼠脑组织中Mx1、IFN-αmRNA的相对表达较假手术组、正常对照组明显增加(P<0.01),Mx1、IFN-αmRNA的表达呈正相关(r=0.806,P<0.01);Mx1测序后在BLAST进行比对,显示同源性为99.8%,证实合成Mx1基因片段的正确。结论 IFN-α可能诱导机体产生Mx1,从而对HSE发挥抗病毒作用。
- 惠晶赵春梅刘强王振海
- 关键词:单纯疱疹病毒脑炎小鼠IFN-Α
- HSV-Ⅰ感染后人小胶质细胞MX1蛋白表达变化及其作用初探被引量:2
- 2014年
- 目的观察人小胶质细胞在单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)感染后抗黏液病毒(Mx1)蛋白表达及干扰素-α(IFN-α)、IFN-β表达变化,初步探讨Mx1蛋白在单纯疱疹病毒(HSV)性脑炎中的可能抗病毒作用。方法应用流式细胞技术检测人小胶质细胞感染HSV-Ⅰ后4、12、48hMx1蛋白的相对表达,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测细胞培养上清液中IFN-α、IFN-β的表达。结果 HSV-Ⅰ实验组各时间点人小胶质细胞Mx1蛋白表达、IFN-α及IFN-β表达均高于正常对照组(均P<0.01);HSV-Ⅰ实验组48h内人小胶质细胞Mx1蛋白表达及IFN-α、IFN-β表达随时间延长升高,且Mx1蛋白表达与IFN-α、IFN-β表达均存在正相关(r=0.632,P<0.01;r=0.714,P<0.01)。结论 HSV-Ⅰ感染可引起体外培养的人小胶质细胞Mx1蛋白表达上调及IFN-α、IFN-β分泌增加,Mx1蛋白可能参与了中枢神经系统抗HSV-Ⅰ过程。
- 刘强牛晓艳汪超王振海
- 关键词:小神经胶质细胞干扰素Α干扰素Β
- 回顾性分析成人化脓性脑膜炎细菌构成及其脑脊液分布特点被引量:12
- 2017年
- 目的回顾性分析宁夏地区成人化脓性脑膜炎(purulent meningitis in adult,APM)患者脑脊液(cerebrospinal Fluid,CSF)细菌构成及特点。方法收集宁夏医科大学总医院2002年01月至2014年07月诊治并行细菌培养的144例化脓性脑膜炎患者临床资料,分析比较致病菌检出阳性与阴性的实验室检查特点,以及不同致病菌(革兰阳性球菌、革兰阴性杆菌及革兰阳性杆菌)患者之间实验室检查特点。结果 144例化脓性脑膜炎的细菌检出阳性率为36.8%(53例),致病细菌以革兰阳性球菌常见[64.15%(34例)],其中以葡萄球菌属为主;细菌检出阳性组患者的血中性粒细胞比例、脑脊液白细胞计数及脑脊液蛋白含量均高于阴性组(分别(82.52±9.43)%,(78.13±13.25)%,P=0.022;(4078.13±5739.24)×10~6/L,(2181.61±4440.87)×10~6/L,P=0.010;(2.99±2.67)g/L,(2.18±2.01)g/L,P=0.041)。发病10d内就诊的101例患者,细菌检出阳性组脑脊液压力、脑脊液白细胞计数、脑脊液中性粒细胞比例亦均高于阴性组((263.82±55.05)mmH_2O,(236.03±66.26)mmH_2O,P=0.032;(4660.45±5756.37)×10~6/L,(2745.97±5193.33)×106/L,P=0.008;(70.21±30.51)%,(56.79±35.54)%,P=0.048),脑脊液淋巴细胞比例较阴性组低((18.92±24.10)%,(32.02±32.10)%,P=0.023)。结论成人化脓性脑膜炎的致病菌以革兰阳性球菌多见,其细菌培养阳性患者的脑脊液与培养阴性者具有一定差异,可能会为临床诊疗提供参考价值。
- 牛晓艳杨娟刘强王妍柏王振海
- 关键词:成人化脓性脑膜炎脑脊液细菌培养
- 宁夏地区成人化脓性脑膜炎脑脊液细菌构成及特点被引量:7
- 2015年
- 目的分析宁夏地区成人化脓性脑膜炎(purulent meningitis in adult,APM)脑脊液细菌构成,并探讨其细菌培养阳性患者的特点。方法收集我院近13年来收治的201例APM患者的临床资料,回顾性分析144例行细菌培养的脑脊液细菌构成并比较致病菌检出阳性病例(CP组)与阴性病例(CN组)的临床及实验室特点。结果 APM的细菌检出阳性率为36.81%,致病菌以革兰阳性球菌常见(64.15%),其中以凝固酶阴性葡萄球菌最多,金黄色葡萄球菌次之;CP组年龄、男性病例数、以意识障碍及癫痫发作表现者显著高于CN组(P<0.05),且其血中性粒细胞比例、脑脊液白细胞计数及脑脊液蛋白含量均较CN组高(P<0.05);在发病10 d内就诊的患者,CP组脑脊液压力、脑脊液白细胞计数、脑脊液中性粒细胞比例均较CN组高,脑脊液淋巴细胞比例较CN组低(P<0.05)。结论成人APM的致病菌以革兰阳性球菌多见,其细菌培养阳性患者的临床特点与培养阴性者有差异,可早期预测细菌培养结果。
- 牛晓艳王妍柏刘强王振海
- 关键词:成人化脓性脑膜炎脑脊液细菌培养
- S100BmRNA在单纯疱疹病毒性脑炎小鼠脑组织中的表达
- 2012年
- 目的检测单纯疱疹病毒性脑炎(HSE)小鼠脑组织中S100BmRNA的含量,初步探讨S100BmRNA对HSE小鼠脑损害的评估价值。方法使用已制造成功的HSE小鼠模型48只,分为HSE组、正常组、假手术组,分别提取小鼠脑组织总RNA,反转录为cDNA,采用RT-qPCR检测S100BmRNA含量,并对S100BmRNA进行测序。结果 HSE组S100B含量显著高于假手术及正常组(P<0.01);S100B基因测序结果在BLAST中进行比对,显示同源性100%证实合成S100B基因片段的正确。结论 S100B在HSE、正常、假手术组均有表达,但其表达的程度并不一致,提示S100B可能为HSE小鼠脑损害的标志物,其含量的高低与损害程度有关。
- 惠晶赵春梅刘强王振海
- 关键词:单纯疱疹病毒脑炎小鼠S100B
- HSE模型小鼠的水迷宫实验观察被引量:1
- 2012年
- 目的对HSE模型小鼠进行经典的Morris水迷宫实验,以观察评估HSV-1感染后小鼠的学习记忆功能。方法雄性C57BL/6小鼠100只,随机法分为模型组、假手术组、正常组。采用颅内注射法建立HSE动物模型,接种后每日观察各组小鼠的一般状况,并于感染后20天进行经典的Morris水迷宫实验评价认知功能。水迷宫实验共训练5d,记录每天的潜伏期与游泳轨迹,第6天去除平台,记录小鼠在目标象限的停留时间。结果接种后3天开始,模型组小鼠出现进食减少、毛发蓬松、倦怠少动等症状;水迷宫实验中模型组小鼠逃避潜伏期明显延长,目标象限停留时间及经过平台次数较其它两组明显减少(P<0.05)。结论 HSV-1感染后小鼠认知功能明显减退。
- 赵春梅刘强王振海
- 关键词:单纯疱疹病毒-1MORRIS水迷宫小鼠