艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项(2008ZX10002-019)
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 相关作者：马小军王为郭昕李双月吕国军更多>>
- 相关机构：中国科学院大连医科大学中国科学院研究生院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 微囊微环境体外扩增人脐血造血干/祖细胞
- 2009年
- 背景:由于单份脐血所含的造血细胞数量有限,目前只能用于儿童或低体质量成人血液病和急性辐射损伤等疾病患者,有效扩增脐血造血干/祖细胞已成为研究热点。目的:观察微囊微环境对脐血造血干/祖细胞扩增的影响,以及此过程中可否使造血干/祖细胞在扩增的同时仍维持其未分化状态。设计、时间及地点:单一样本观察,于2006-06/2007-09在中国科学院大连化学物理研究所完成。材料:正常足月产新生儿脐带血由大连市妇产医院提供,提供者知情同意。方法:Ficoll法梯度分离人脐血单个核细胞,采用静电液滴法在生理条件下进行微囊化包封和体外培养。以同条件平面培养的脐血单个核细胞作为对照。主要观察指标:观察微囊化脐血细胞的生长特点及脐血细胞总数的变化;流式细胞仪检测培养过程中CD34+细胞扩增情况;应用甲基纤维素半固体培养法观察扩增细胞的集落形成能力。结果:脐血细胞在微胶囊内持续增殖,并以聚集成团的三维方式生长,两种培养方式对脐血细胞总数均无明显影响(P>0.05)。对比CD34+细胞扩增和细胞集落的生成发现,微囊化培养脐血细胞的CD34+细胞数量和集落密度均在培养第6天达到高峰,明显高于平面培养3d时所达到的峰值;之后逐渐下降,至12d后平面培养细胞的CD34+细胞和集落形成能力几乎检测不到,而此时微囊化培养的CD34+细胞数量和集落密度仍与平面培养的扩增高峰相近。结论:微囊化培养能有效扩增人脐血造血干/祖细胞,并显著减缓造血干/祖细胞的分化进程,维持其多分化潜能,提示微囊为造血干/祖细胞维持未分化状态的扩增提供了特殊的微环境。
- 李双月王华郭昕孙志杰吕国军王为马小军
- 关键词：造血干祖细胞扩增微胶囊微环境脐血
- 微囊微环境对脐血细胞造血相关基因表达的影响
- 2009年
- [目的]利用基因芯片技术研究微囊微环境对脐血细胞造血相关基因表达的影响。[方法]将新鲜分离的人脐血细胞在生理条件下进行微囊化包封、培养7 d后,对其进行总RNA提取、纯化、体外转录合成cRNA探针、cRNA探针生物素标记、与基因芯片杂交、扫描杂交信号,最后进行芯片数据处理和生物学信息分析。[结果]基因芯片筛选结果显示,与平面培养对照组相比,微囊化培养脐血细胞中差异表达2倍及以上的造血相关基因有32个,其中19个表达上调,13个表达下调。[结论]微囊微环境影响脐血细胞造血相关基因的表达。
- 李双月王为王秋艳孙志杰吕国军郭昕朴丰源马小军
- 关键词：脐血细胞基因表达培养环境
- 可降解海藻酸钠-壳聚糖支架用于细胞黏附生长的研究被引量：5
- 2009年
- 通过调节海藻酸钠与壳聚糖的比例制备了具有不同降解速度的组织工程支架,并以HepG2为细胞模型考察可降解支架对细胞黏附生长的影响。研究表明:壳聚糖含量越高,支架被溶菌酶降解的速度越快,但支架在培养液中的稳定性越高;MTT结果显示细胞在壳聚糖含量为100%和67%的支架中培养时活性较高,但活死染色显示细胞多以分散状态黏附在支架上,降低壳聚糖含量时细胞活性较低且多以聚集形式存在于支架空隙内部。通过调节海藻酸钠与壳聚糖的比例制备出可降解的组织工程支架,可以控制细胞的生长速度及黏附状态,有望为细胞的生长及功能发挥提供更适宜的环境。
- 李晓霞于炜婷郭昕张英李双月马小军
- 关键词：海藻酸钠壳聚糖降解
- 微囊化共培养诱导骨髓间充质干细胞体外定向成骨分化研究被引量：6
- 2010年
- 为了模拟体内成骨微环境,为骨组织工程提供一种调控干细胞体外向成骨细胞定向分化的共培养新方法,SD大鼠骨髓间充质干细胞和包埋在海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(alginate-poly-lysine-alginate,APA)微胶囊中的SD大鼠成骨细胞进行体外共培养。共培养过程中,通过碱性磷酸酶(ALP)定量、定性分析以及钙化结节(von Kossa)染色等手段来评价骨髓间充质干细胞向成骨细胞定向分化。结果表明在体外微囊化共培养过程中,被诱导细胞的胞内ALP酶活性逐渐高于对照组的干细胞,接近于成骨细胞;ALP以及von Kossa定性染色证实被诱导细胞具有较高的ALP活性以及具有分泌钙基质的能力。微囊化成骨细胞和外部干细胞的共培养体系较好地模拟了体内干细胞向成骨细胞转化的成骨微环境,促进了干细胞向成骨细胞的体外定向分化;微胶囊膜将成骨细胞和干细胞进行了隔离,避免了两者的直接接触和可能的细胞交叉污染混合,同时利于分离目的细胞,这种微囊化共培养体系为骨组织工程提供了一种安全调控干细胞体外成骨定向分化的工程化新方法。
- 刘洋于滨滨王为马小军贺欣
- 关键词：骨髓间充质干细胞定向分化体外共培养
