国家高技术研究发展计划(2006AA10A411)
- 作品数：57 被引量：393H指数：12
- 相关作者：常亚青丁君周遵春董颖胡炜更多>>
- 相关机构：大连水产学院大连海洋大学辽宁省海洋水产科学研究院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程化学工程更多>>
- 刺参vasa-like基因克隆及其在组织中的表达分析被引量：7
- 2008年
- vasa基因编码DEAD-box家族成员中一种ATP依赖的RNA解旋酶,在生殖系分化过程中发挥着重要的作用。本研究采用同源克隆和cDNA末端快速扩增技术(RACE),从刺参(Apostichopus japonicus)精巢中克隆得到vasa的全长cDNA序列。该cDNA序列全长2167bp,开放阅读框1593bp,编码530个氨基酸,具有DEAD-box家族蛋白的全部9个保守域。经同源比对和系统进化分析,确定其属于DEAD-box家族的VASA亚家族成员。利用半定量RT-PCR检测,vasa mRNA专一性的在刺参性腺中表达,据此,刺参vasa基因有望用于其生殖系起源和分化的研究。
- 隋娟张志峰邵明瑜胡景杰
- 关键词：刺参VASA全长CDNA
- 黄海北部仿刺参养殖池塘关键环境因子的周年变化与管理研究被引量：16
- 2009年
- 研究了黄海北部非投喂型仿刺参Apostichopus japonicus养殖池塘的温度、溶氧、盐度、pH和大型生物等环境因子的周年变化特点，以及春季化冰期池塘的温度、盐度、pH的日变化规律，同时对池塘的纳潮换水、水位管理以及敌害生物的控制等技术环节进行了探讨，分析了环境因子与仿刺参养殖的关系。结果表明：（1）池塘周年水温变化在-1．2～30．4℃，最高在8月，最低在1月；溶解氧值波动于3．5—21．3mg／L，冬季高，夏季低；溶解氧与温度之间的回归关系为Do=0．018T^2-0．818T＋15．805；pH值波动于7．印～8．72，冬、夏季高，春、秋季低；盐度波动于22．5～33．5，夏季偏低。（2）冬季水温下降到-1．0℃时，池塘表层开始结冰并逐渐封冰；春季在化冰时存在温度和盐度跃层，可采用将表层水排放掉的方法消除跃层。（3）池塘的大型植物主要包括缘管浒苔、刚毛藻、沟草等，大型动物主要有矛尾缎虎鱼、石鲽、花鲈、蓝点马鲛、鲮、斑鲦、鳐等鱼类，太平洋牡蛎、菲律宾蛤仔、黑荞麦蛤等贝类以及脊尾白虾、口虾蛄等。（4）在化冰期注意池塘盐度变化，化冰前池塘冰下水位应控制在120～130cm以上，化冰后池塘水深应控制在150—170cm以上。（5）在夏季高温期应注意监测溶解氧的变化，防止因藻类死亡腐败、溶解氧含量下降而导致仿刺参发生缺氧死亡的现象。
- 于金海冷晓飞李春艳常亚青郭吉德苏德海
- 关键词：仿刺参养殖池塘环境因子
- 仿刺参不同组织液的抗菌活性被引量：5
- 2010年
- 采用平板菌落计数法测定仿刺参Apostichopus japonicus体腔液、体腔液上清液、体腔细胞悬液和体壁内皮组织匀浆液对哈氏弧菌Vibrio harveyi的抑制作用,并对健康仿刺参与感染后仿刺参的体壁内皮组织匀浆液的抑菌作用进行了比较;采用乙醇沉淀、离心等方法从仿刺参体壁内皮组织中粗提得到一种水溶性成分,测定了该成分对哈氏弧菌、白色葡萄球菌Staphylococcus albus和迟钝爱德华氏菌Edwardsiella tarda的抑菌活性,并初步研究了该成分的基本性质。结果表明:仿刺参体壁内皮组织匀浆液对哈氏弧菌的抑制效果显著,体腔液、体腔液上清液、体腔细胞悬液对哈氏弧菌的抑制效果不显著;感染状态下,仿刺参体壁内皮组织匀浆液的抑菌作用与健康状态相比有所降低。提取的水溶性成分对哈氏弧菌、白色葡萄球菌和迟钝爱德华氏菌均有明显的抑制作用;该成分的茚三酮反应呈阳性,其中蛋白质的质量分数为17.48%;该成分经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离得到5个蛋白条带,相对分子质量大约为55 300、46 100、34 700、19 500和14 500,初步认为其含有肽类抗菌活性物质。
- 王斌胡亮程振远姜白洁宋坚杨笑谈袁甜
- 关键词：仿刺参抗菌活性
- 5种重金属对光棘球海胆胚胎的毒性作用被引量：5
- 2012年
- 采用静态毒性试验方法,在水温(21±0.5)℃、盐度32条件下,研究Zn、Hg、Cu、Pb、Cd单独暴露对光棘球海胆的精卵结合和胚胎发育的毒性作用。观察了5种重金属对光棘球海胆精子超微结构的损伤。试验结果表明,3个暴露浓度下,5种重金属均可导致光棘球海胆受精率极显著下降,胚胎延滞率和胚胎畸形率极显著上升,并呈剂量—效应关系。5种重金属对海胆精子细胞超微结构的损伤,可能是导致海胆受精率降低、胚胎延滞率和畸形率升高的原因之一。
- 王摆于喆吕涵董颖关晓燕杨爱馥姜北陈仲周遵春
- 关键词：光棘球海胆受精率胚胎发育
- 低温对不同群体仿刺参幼参某些生理现象的影响被引量：27
- 2008年
- 在实验室条件下研究了低温对仿刺参的中国群体（C×C）、俄罗斯群体（R×R）、中俄杂交群体（R×C）和韩国群体（K×K）幼参的影响。试验最低温度为-2℃，各试验组仿刺参幼参在0℃以下持续时间分别为48-57d。试验期间，溶解氧为7．5-10．5mg／L，pH为7．30-8．20。结果表明：低温下不同群体仿刺参都出现排脏、皮肤溃烂（化皮）和死亡等现象；在1．8-1．0℃以下，仿刺参幼参紧缩不动并停止摄食活动；体重为（0．813±0．043）g的不同群体仿刺参，低温下平均死亡率最高的是仿刺参的韩国群体（95．8％），最低的是仿刺参中俄杂交群体（R♀×C♂）（20．8％），对低温耐受能力的顺序是：R♀×C♂〉C♀×R♂〉R×R〉C×C〉K×K；平均体重为0．21、0．80、2．00g3个规格仿刺参的中国群体，其平均死亡率分别为73．5％、16．7％和10．0％，说明大规格的仿刺参比小规格的耐低温能力强。低温过程以后，当温度缓慢上升到14．0℃时，仿刺参恢复活力，轻度溃烂的皮肤可再生、痊愈。
- 于明志常亚青
- 关键词：仿刺参
- 人工繁殖虾夷马粪海胆生长模型被引量：2
- 2010年
- 以虾夷马粪海胆（Strongylocentrotus intermedius）家系为实验材料,对比分析了每个母系从孵化后到17月龄（性成熟）的体重、壳径、壳高的生长情况,并进行了生长性状间的相关分析及预测模型的构建。结果表明：5~15月龄,各家系虾夷马粪海胆在壳径、壳高与体重方面的差异均不显著（P〉0.05）,17月龄时,各家系的生长指标出现差异（P〈0.05）;虾夷马粪海胆壳径、壳高生长呈线性模型,而体重生长呈指数模型;利用虾夷马粪海胆各月龄生长性状数据,进行了虾夷马粪海胆壳径、壳高与体重相关关系分析,R2值为0.68~0.86,而虾夷马粪海胆父母本的生长性状与子代的生长性状相关性较低（0~0.25）。虾夷马粪海胆体重、壳径和壳高的生长预测模型表明,通过11月龄体重预测17月龄体重的准确率可达73.6%;本研究有助于深入了解虾夷马粪海胆的生长发育特征,并为其健康养殖模式构建提供理论依据。
- 丁君王永华银学祥常亚青
- 关键词：虾夷马粪海胆生长性状
- MYP基因在中间球海胆及杂交海胆生殖腺不同发育时期的转录表达差异被引量：8
- 2008年
- 应用实时荧光定量PCR技术对主要卵黄蛋白(Major yolk protein,MYP)基因在中间球海胆和杂交海胆(中间球海胆♀×光棘球海胆♂)的生殖腺不同发育时期的转录表达差异进行了分析。结果表明,MYP基因在海胆雌雄个体生殖腺中转录水平上的表达差异不明显;MYP基因在中间球海胆生殖腺发育的4个时期的表达呈快速下降的趋势,而在杂交海胆呈缓慢下降的趋势。在分析的生殖腺4个发育期中,中间球海胆雌雄个体MYP基因的表达量(以18S rRNA为参照)分别从44.55%和41.17%下降到9.59%和1.83%;杂交海胆的雌雄个体分别从37.66%和36.66%下降到19.22%和12.55%。MYP基因的转录表达量差异与杂交后生殖腺产生的变异密切相关。
- 周遵春包振民董颖王丽梅赫崇波刘卫东
- 关键词：海胆生殖腺
- 光棘球海胆3个地理亚群的遗传多样性AFLP分析被引量：2
- 2012年
- 应用AFLP技术对光棘球海胆的大连长海县群体、大连旅顺群体及日本青森县群体进行遗传多样性分析。试验结果表明,4对引物组合扩增得到231个扩增位点,其中168个多态位点,多态位点总比例为72.73%;3个群体的遗传多样性指数分别为0.3020±0.1925、0.2995±0.1977和0.2945±0.1935;Shannon多样性指数分别为0.4390±0.2767、0.4344±0.2820和0.4298±0.2766;群体内遗传变异系数为0.2987±0.0366,群体间遗传分化系数为0.0230,说明群体内的遗传多样性比较丰富。3个群体之间的遗传距离无显著差异,遗传相似度基本一致,用UPGMA方法对3个群体的143个个体的聚类分析显示,3个群体的个体交互混杂在一起,3个群体间没有因为地理隔离而产生明显的遗传分化。
- 张磊董颖杨爱馥陈仲汪笑宇关晓燕姜北王摆周遵春
- 关键词：光棘球海胆AFLP
- 仿刺参生殖腺发生与早期分化的组织学观察被引量：1
- 2011年
- 采用组织学方法,初步研究了仿刺参(Apostichopus japonicus Selenka)生殖腺的发生及早期分化的过程。结果表明,仿刺参的生殖腺位于背肠系膜处,在体长为0.1 cm的稚参中出现含有约10个原生殖细胞的原始生殖腺;体长0.5cm的稚参,原始生殖腺的中央腔明显,生殖腺初具雏形;体长3 cm的幼参中,生殖腺出现二分枝并且生殖腺上皮出现分层结构,内层为排列较松散的生殖细胞,外层为排列紧密的个体较小的上皮样细胞,此时仿刺参生殖腺的基本结构已经具备;幼参体长4 cm时,生殖腺的部分管壁内层细胞向内发生褶皱,形成以生殖细胞为主的嵴状突起,随着发育的进行,生殖腺管腔内侧的嵴状突起更加密集。
- 晏萌隋娟邵明瑜胡景杰张志峰
- 关键词：仿刺参生殖腺组织学
- 仿刺参铁蛋白ferritin基因的序列分析及表达被引量：13
- 2010年
- 通过构建仿刺参cDNA文库,获得铁蛋白全长cDNA序列。该基因序列全长792bp,5′-非翻译区长133bp,开放阅读框长522bp,编码173个氨基酸,3′-UTR长137bp;预测蛋白分子量为20ku。5′-UTR具有一个高度保守的铁离子应答元件。仿刺参ferritin氨基酸序列具备脊椎动物ferritin的亚铁氧化酶活性中心所特有的保守结构。该序列与海参的同源性最高,达84%,与其它无脊椎动物如:海星、鲍、牡蛎、海葵、线虫、小龙虾和果蝇的同源性为74%～34%;与脊椎动物ferritin重链亚基同源性高于轻链亚基。系统进化分析表明,仿刺参的ferritin与大部分无脊椎动物聚为一支。利用半定量RT-PCR检测,ferritin mRNA在仿刺参未受精卵、受精卵、多细胞期、囊胚期、原肠期、小耳状幼体、中耳状幼体、大耳状幼体、樽型幼体、五触手幼体、稚参11个发育阶段和幼参的体壁、体腔细胞、肠道和呼吸树中均表达。Quantitative real-time PCR结果显示,ferritin mRNA在未受精卵至原肠期表达量低,从小耳状幼体至稚参表达量显著增高;在幼参的不同组织中,ferritin mRNA在呼吸树中的表达量显著低于其他3种组织;幼参注射LPS后,4种组织中ferritin mRNA表达量与注射前无显著差异。
- 杨爱馥周遵春孙大鹏董颖姜北汪笑宇陈仲关晓燕王摆
- 关键词：仿刺参基因表达LPS刺激
