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重组8型腺相关病毒介导双荧光素酶基因在小鼠体内的表达被引量：1: 2012年; 目的利用共表达的分泌型荧光素酶Gluc（gaussiaprincepsluciferase）和非分泌型荧光素酶Fluc（fireflyluciferase）研究重组8型腺相关病毒（recombinantadeno—associatedvirustype8，rAAV8）介导的转基因在小鼠体内的表达特点。方法制备携带双荧光素酶基因的重组8型腺相关病毒rAAV8－Gluc／Fluc，体外感染HEK293细胞并检测上清和胞内Gluc和Fluc活性；将不同剂量的rAAV8－Gluc／Fluc尾静脉注射或肌内注射至BALB／c小鼠，通过尾静脉采血检测Gluc活性，通过活体成像和裂解组织检测Fluc活性。结果成功制备了rAAV8－Gluc／Fluc，可以有效感染HEK293细胞，同时分泌表达Gluc和胞内表达Fluc；尾静脉注射或肌内注射rAAV8．Gluc／Fluc至小鼠后，外周血Gluc活性均在注射后10—20d达到高峰并稳定持续120d以上，Gluc活性随注射剂量增加而增高；静脉注射rAAV8-Gluc／Fluc时Fluc主要在肝脏表达，在骨骼肌和心肌有少量表达，而肌内注射时Fluc既在肌内注射局部表达同时也在肝脏中表达。结论本研究成功制备了携带双荧光素酶基因rAAV8－Gluc／Fluc，研究了其介导的转基因在小鼠体内的表达特点，为rAAV8的临床前应用打下基础。; 王刚尉迟捷董小岩田文洪吴小兵; 关键词：依赖病毒荧光素酶

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国家科技重大专项(2012AA020810)