国家科技重大专项(2011ZX08009004)
- 作品数：2 被引量：10H指数：1
- 相关作者：陈伟陈祥桓聪聪许厚强李飞更多>>
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- 发文基金：国家科技重大专项贵州省科技厅重大专项贵州省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 关岭牛MyoD I基因组织特异性启动子的筛选和功能研究
- MyoD I(MyoGenic differentiation I)基因是成肌调节因子(Myogenic regulatory factors,MRFs)家族的成员之一,于1987年被首次克隆,该基因是骨骼肌生长发育过程...
- 桓聪聪
- 关键词：启动子基因表达量C2C12细胞
- 文献传递
- 关岭牛MyoDⅠ基因启动子报告质粒的构建及活性验证被引量：10
- 2013年
- 为了克隆关岭牛MyoDⅠ基因启动子并验证其启动活性,根据GenBank中牛的MyoDⅠ基因序列设计PCR引物,用PCR技术扩增牛MyoDⅠ基因的启动子,构建重组克隆载体pUCmT-MyoDⅠ;并通过PCR扩增、限制性酶切、测序及生物信息学分析对阳性克隆进行鉴定;构建报告质粒pGL3-MyoDⅠ,并将其转染小鼠C2C12、3T3-L1细胞系,检测其24h后的双荧光素酶活性。实验结果获得了关岭牛MyoDⅠ基因启动子,其序列长度为993bp,并成功构建了MyoDⅠ启动子报告质粒;双荧光素酶活性检测表明pGL3-MyoDⅠ在小鼠C2C12细胞中的表达是pGL3空载体40.65倍,在小鼠3T3-L1细胞中的表达是空载体的1.13倍,MyoDⅠ启动子在小鼠C2C12细胞中的表达高于3T3-L1细胞(**p<0.01)。结果表明关岭牛MyoDⅠ基因启动子具有启动活性,在小鼠骨骼肌细胞中特异性表达。
- 李飞许厚强陈伟陈祥刘敏桓聪聪
- 关键词：启动子荧光素酶C2C123T3-L1
- 关岭牛MyoD基因CDS区的克隆、序列分析及其真核表达载体构建
- 2015年
- [目的]通过关岭牛MyoD基因CDS区的克隆、序列分析及pcDNA3.1(+)-MyoD真核表达载体的构建,为后续研究MyoD基因的调控机制奠定基础。[方法]通过设计特异性引物克隆关岭牛MyoD基因的CDS区,并用DNAStar、Ex PASy等软件对该基因CDS区进行序列分析;同时利用双酶切的方法构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-MyoD。[结果]关岭牛MyoD基因的CDS区全长957bp,编码318个氨基酸;其编码的蛋白属于亲水性蛋白,蛋白二级结构主要以α-螺旋及无规则卷曲为主,含有b HLH结构域,无明显的跨膜区域。同源性分析显示,关岭牛MyoD基因的CDS区序列与海福特牛和山羊的同源性最高,核苷酸同源性为98.96%和96.9%,氨基酸同源性为100%和89.3%。MyoD蛋白的氨基酸肽链长度由低等动物到高等动物有逐渐加长的趋势。[结论]成功克隆了关岭牛MyoD基因的CDS区,并构建了其真核表达载体pcDNA3.1(+)-MyoD,为进一步研究MyoD基因在成肌分化过程中的作用及其调控机制奠定基础。
- 张雯张雯许厚强陈伟陈祥桓聪聪夏丹
- 关键词：真核表达载体
