浙江省自然科学基金(Y2110911)
- 作品数：3 被引量：21H指数：1
- 相关作者：金立方倪坚袁翊朦胡祎瑞屠慧渭更多>>
- 相关机构：绍兴文理学院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 对乙酰氨基酚耐受肝细胞株的建立及其作用机制研究被引量：1
- 2018年
- 对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)是引起急性肝衰竭最主要的原因,但其确切的作用机制仍不明了。该研究建立了不同浓度的APAP耐药肝细胞,并对其耐药机制进行初步研究。克隆状密度培养的AML-12小鼠肝细胞浓度递增诱导建立APAP耐药细胞系;细胞计数检测细胞增殖能力;Mito Tracker和H_2DCF-DA分别检测线粒体膜电位和氧自由基水平;GSH/GSSH检测细胞抗氧化能力;q PCR检测细胞基因表达水平;Western blot检测蛋白质水平。成功建立了增殖和耐药稳定的1.25和2.50 mmol/L APAP耐药AML-12肝细胞。在相应浓度APAP处理后,与对照组相比,耐药组细胞增殖能力强,氧自由基水平低,线粒体膜电位水平高,GSH/GSSH值高。进一步研究结果显示,耐受组细胞抗氧化通路Nrf2及其靶基因表达活性提高,而凋亡相关信号通路JNK及其相关基因活性下降。肝细胞表型特征分析显示,耐药组细胞肝功能相关基因表达水平并未发生显著变化,但与染色体重塑相关的转录因子Foxa1和Foxa2 m RNA和蛋白质水平显著升高。该研究建立了增殖和耐药性状稳定的APAP耐药肝细胞,耐药性状的获得与抗氧化能力和抗凋亡能力的提高相关,并提示染色体重塑相关转录因子也可能参与这一过程,为深入研究耐药机制奠定了基础。
- 曹欢欢茅育蕾陈娟慧陈佳媛郑锐攀岑梦娇倪坚金立方
- 关键词：肝细胞对乙酰氨基酚耐药
- 兔骨髓间充质干细胞的分离培养及肝内示踪
- 2011年
- 通过分离培养兔骨髓来源的间充质干细胞(MSCs),示踪其肝内移植命运,为MSCs的细胞治疗肝脏疾病提供理论依据和试验支持。采取全骨髓贴壁培养法分离培养兔骨髓MSCs,利用携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的慢病毒载体感染MSCs,选择最优转染效率,并移植入经D﹣氨基半乳糖诱导的急性/亚急性肝衰竭受体兔体内,荧光显微镜下直接观察EGFP阳性细胞在肝内分布。分离出兔骨髓来源的MSCs,在体外可稳定传代,并具有成骨和成脂的分化潜能;慢病毒可高效感染MSCs;移植后第3、7、15天在肝功能衰竭的受体兔肝组织内可见GFP阳性细胞。携带EGFP的慢病毒载体具有高效转染兔MSCs的能力,并可作为报告基因简单有效示踪MSCs的肝内分布。
- 张芙蓉屠慧渭钱波孙何金立方
- 关键词：骨髓间充质干细胞示踪增强型绿色荧光蛋白
- 六价铬的细胞毒理效应及其机制研究进展被引量：20
- 2013年
- 六价铬[Cr(VI)]是一种普遍存在于土壤、大气与水环境中的污染物,可通过呼吸道、消化道及皮肤接触进入人体,产生直接或间接的毒性作用。该文着眼于近年来的研究进展,从Cr(VI)导致胞内活性氧累积效应、诱发细胞凋亡、导致细胞癌变、毒理效应的基因组学研究等几方面,论述了Cr(VI)对人体和动物的细胞毒理效应及其作用机制。随着研究的深入,从基因组水平研究Cr(VI)毒理效应成为新的热点。
- 金立方袁翊朦胡祎瑞倪坚
- 关键词：六价铬活性氧凋亡癌变
