国家自然科学基金(81070251)
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
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- 相关机构：首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所更多>>
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- 组织蛋白酶S在人和小鼠腹主动脉瘤组织中的表达被引量：2
- 2013年
- 目的探讨组织蛋白酶S（CathepsinS）在人腹主动脉瘤（AAA）组织和血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）灌注载脂蛋白E基因缺陷小鼠（ApoE-／-）引起AAA病变中的表达。方法收集符合临床诊断的腹主动脉瘤患者标本（AAA组），以正常血管为对照（对照组）；AngⅡ以1000ng·kg^-1·d^-1的剂量持续灌注ApoE-／-小鼠28d建立小鼠AAA模型，以0．9％氯化钠注射液灌注作为对照。弹力纤维染色观察人和小鼠AAA病变组织弹力纤维断裂，免疫组化观察人和小鼠AAA病变组织CathepsinS的蛋白表达。结果弹力纤维染色显示，人和小鼠AAA组织的弹力纤维断裂显著增加（P〈0．05）；免疫组化结果显示人和小鼠AAA组织的CathepsinS表达较对照组显著增加（P〈0．05）。结论CathepsinS在人和小鼠AAA病变组织中被激活，可能参与AAA的发病过程。
- 秦彦文张耀中方微刘欧曹旭张宏家
- 关键词：腹主动脉瘤组织蛋白酶S载脂蛋白E基因缺陷小鼠
- 小鼠主动脉血管平滑肌细胞分离培养及鉴定被引量：8
- 2012年
- 目的建立体外分离培养小鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)的技术方法并观察其生长特征。方法比较组织贴块法及酶联合消化法原代分离小鼠主动脉来源的VSMC,利用倒置显微镜观察细胞生长情况;苏木精-伊红(HE)染色观察细胞形态及免疫荧光染色法鉴定细胞;台盼蓝法、绘制生长曲线法、3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法分别测定主动脉VSMC传代细胞的成活率、生长、增殖特征;观察不同血清含量对主动脉VSMC生长的影响。结果组织贴块法培养的细胞6 d后,细胞从组织块边缘长出,14 d后生长迅速可传代;酶联合消化法分离培养的细胞3 d后,细胞呈梭形生长,7～8 d后生长迅速可传代;第2代细胞在显微镜下观察可见呈典型"峰-谷"状生长;2种方法获得的细胞行免疫荧光染色显示胞浆内α-平滑肌肌动蛋白表达阳性,细胞成活率均为96%;细胞生长曲线近似"S"形,MTT法显示细胞生长第3～5天光密度值变化较明显;用含体积分数20%血清的杜尔伯科改良伊格尔培养基高糖培养液培养的细胞出现明显对数期。结论本研究建立了高效分离和培养主动脉VSMC的2种方法,细胞均稳定地表达α-平滑肌肌动蛋白,为血管疾病的研究提供了理想的细胞模型。
- 辛毅张耀中林筝张颖秦彦文
- 关键词：小鼠血管平滑肌细胞原代培养
- 组织蛋白酶抑制剂胱抑素C的表达和炎性反应在腹主动脉瘤发病中的意义被引量：1
- 2013年
- 目的探讨组织蛋白酶抑制剂胱抑素C(Cystatin C)和炎性反应在腹主动脉瘤(AAA)发病中的意义。方法收集31例AAA患者(AAA组)和32例非AAA患者(对照组)的血浆和AAA组的病变样本,免疫组织化学法检测AAA组病变组织中Cystatin C的表达和巨噬细胞表面抗原2(Mac-2)的含量;酶联免疫吸附法测定AAA组和对照组血浆的Cystatin C水平,常规生物化学法检测血脂、血糖水平,采用免疫散射比浊法检测超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平。结果对照组血管动脉壁高表达Cystatin C,而AAA组血管动脉壁的Cystatin C表达显著降低(P<0.01),同时Mac-2表达较对照组显著增加(P<0.01);AAA组患者血浆Cystatin C水平为(32.55±17.31)μg.L-1,显著低于对照组的(78.13±43.13)μg.L-1,2组比较差异有统计学意义(P<0.01),且与AAA直径呈显著负相关(r=-0.560,P<0.01);AAA组患者hs-CRP水平较对照组显著升高,与AAA直径大小呈显著正相关(r=0.762,P<0.01);血浆Cystatin C与hs-CRP水平显著负相关(r=-0.530,P<0.01);多元线性逐步回归分析结果显示,在校正了与AAA直径大小的相关因素后,Cystatin C和hs-CRP水平与AAA直径大小独立相关(P<0.05,0.01)。结论血浆Cystatin C联合hs-CRP水平检测结果可作为判断AAA炎性反应的参考指标。
- 秦彦文曹旭方微刘静张耀中王淼
- 关键词：腹主动脉瘤组织蛋白酶胱抑素C炎性反应超敏C反应蛋白巨噬细胞
- 组织蛋白酶S敲除对小鼠腹主动脉瘤巨噬细胞MMP-9表达的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨组织蛋白酶S(Cat S)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)灌注载脂蛋白E基因缺陷小鼠(Apo E-/-)导致腹主动脉瘤(AAA)病变中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法 AngⅡ以1 000 ng/(kg.min)的剂量持续灌注Apo E-/-小鼠及Cat S、ApoE双敲除小鼠(CTSS-/-ApoE-/-小鼠)28 d建立小鼠AAA模型,以等量生理盐水灌注的小鼠作为对照组,采用免疫组织化学法观察小鼠AAA病变中MMP-9的蛋白表达。分离ApoE-/-小鼠和CTSS-/-ApoE-/-小鼠的腹腔巨噬细胞,以0.1μmol/L的AngⅡ刺激12 h,采用酶联免疫吸附法(ELISA)观察细胞上清液中MMP-9的蛋白表达。结果 Cat S敲除后小鼠AAA的MMP-9的蛋白表达显著减少(P<0.05);Cat S敲除后小鼠巨噬细胞MMP-9的蛋白表达显著减少(P<0.05)。结论 Cat S可能通过减少小鼠AAA病变和巨噬细胞的MMP-9分泌参与小鼠AAA的发病过程。
- 秦彦文张耀中曹旭刘欧陈忠张宏家
- 关键词：腹主动脉瘤组织蛋白酶S基质金属蛋白酶-9
