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国家自然科学基金(30371304)

作品数:26 被引量:64H指数:5
相关作者:赵跃然焦玉莲王来城刘义庆张捷更多>>
相关机构:山东省立医院山东大学山东省医学科学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金山东省自然科学基金更多>>
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文献类型

  • 26篇中文期刊文章

领域

  • 20篇医药卫生
  • 6篇生物学

主题

  • 16篇细胞
  • 15篇基因
  • 12篇受体
  • 11篇免疫
  • 10篇蛋白
  • 10篇杀伤
  • 10篇杀伤细胞
  • 9篇杀伤细胞免疫...
  • 9篇球蛋白
  • 9篇细胞免疫
  • 9篇细胞免疫球蛋...
  • 9篇免疫球蛋白
  • 9篇免疫球蛋白样...
  • 6篇多态
  • 6篇克隆
  • 5篇多态性
  • 5篇基因克隆
  • 4篇真核
  • 4篇真核表达
  • 4篇基因型

机构

  • 13篇山东省立医院
  • 12篇山东大学
  • 4篇山东省医学科...
  • 2篇山东省血液中...
  • 1篇济南市中心医...
  • 1篇山东大学第二...

作者

  • 25篇赵跃然
  • 17篇焦玉莲
  • 11篇王来城
  • 8篇崔彬
  • 8篇刘义庆
  • 8篇马春燕
  • 8篇张捷
  • 5篇侯丽
  • 5篇张雪
  • 5篇高新谱
  • 4篇刘正敏
  • 3篇陈子江
  • 3篇游力
  • 3篇卢志明
  • 2篇侯岩峰
  • 2篇张海清
  • 2篇李建峰
  • 2篇许晓群
  • 2篇王来诚
  • 2篇孙红胜

传媒

  • 7篇山东大学学报...
  • 2篇山东医药
  • 2篇中华微生物学...
  • 2篇微生物学免疫...
  • 2篇现代免疫学
  • 1篇中国肿瘤生物...
  • 1篇中华医学杂志
  • 1篇中华检验医学...
  • 1篇生物工程学报
  • 1篇细胞与分子免...
  • 1篇中华风湿病学...
  • 1篇中国生物工程...
  • 1篇检验医学
  • 1篇Cellul...
  • 1篇国际肿瘤学杂...
  • 1篇中华肿瘤防治...

年份

  • 3篇2009
  • 6篇2008
  • 6篇2007
  • 5篇2006
  • 6篇2005
26 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
杀伤细胞免疫球蛋白样受体及HLA-Cw基因多态性与强直性脊柱炎遗传易感性研究
2008年
目的探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIRs)2D基因及其配体HLA-Cw等位基因与强直性脊柱炎的遗传易感性是否相关。方法以PCR-SSP基因分型技术检测105例强直性脊柱炎患者KIB2D基因(KIR2DL1、2DS1、2DL2、2DL3、2DS2)和HLA-Cw01~08等位基因,并将HLA-Cw01~08分成HLA-cw^lys和HLA-Cw^asn两组,分别计算KIR2D基因、HLA-Cw等位基因及活化性KIR/HLA-Cw组合基因型频率,并与51例骨关节炎患者和120名健康人群比较。结果强直性脊柱炎组患者HLA-Cw^lys基因频率为0.2697,高于骨关节炎组患者的0.1482(P=0.024)和健康对照者的0.1388(P=0.001)。强直性脊柱炎组患者KIR2DS1/HLA-Cw^lys组合基因型阳性率为26.67%,明显高于骨关节炎组的11.76%(P=0.039)和健康对照组的13.33%(P=0.018)。结论HLA-Cw^lys可能与强直性脊柱炎遗传易感性相关;当抑制性受体KIR2DL1的特异性配体HLA-Cw^lys存在时,KIR2DS1基因携带者可能是强直性脊柱炎的高危人群。
张炳昌卢志明刘芸焦玉莲赵跃然李建峰
关键词:HLA抗原疾病遗传易感性
杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因多态性与强直性脊柱炎的关联性被引量:6
2006年
目的:探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer cell immunogloblin-like receptors,KIRs)基因多态性与强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)的关联性。方法:采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)法,分析86例AS患者和412例无血缘关系的正常人中迄今发现的14个KIR基因和假基因KIRZ的基因频率、基因型和单倍型。结果:AS患者组活化型KIR3DS1、抑制型KIR2DL2和KIR2DL5的基因频率较对照组显著升高(P<0.05);携带2个或2个以上活化型KIR基因的AS患者明显高于对照人群;其余各KIR的基因频率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:活化性/抑制性杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因的失衡可能与AS的发生相关。
焦玉莲马春燕崔彬王来城张捷刘义庆张雪陈子江赵跃然
关键词:杀伤细胞受体基因分型
人NKp46基因克隆及其在大肠杆菌中的表达和纯化
2006年
目的:对人NKp46进行基因克隆并探讨其在大肠杆菌中重组表达和纯化。方法:用RT-PCR法自人外周血单个核细胞总RNA扩增hNKp46片段(约900 bp),克隆至质粒载体pMD18-T,并对克隆的DNA片段进行序列分析。用限制酶EcoRⅠ和NcoⅠ消化pMD18-T-hNKp46重组质粒,分离hNKp46片段,并插入原核表达载体pET30a(+)的相应限制酶位点,酶谱分析鉴定重组表达载体pET30a(+)-hNKp46。转化菌株BL21(DE3)经IPTG诱导,用SDS-PAGE和Western Blotting鉴定表达的重组蛋白。采用His.BindPurification Kit对重组蛋白进行纯化。结果:RT-PCR扩增的DNA片段与hNKp46 cDNA大小一致。重组质粒pMD18-T-hNKp46的DNA序列分析显示,克隆的DNA序列与文献报道的hNKp46的cDNA序列一致。SDS-PAGE表明,重组蛋白相对分子质量为38.5 kD,其表达量达菌体总蛋白的40%左右。Western Blotting分析显示,重组蛋白能特异地与抗His.Tag抗体结合。纯化得到纯度为95.5%的重组蛋白,纯化回收率达40%。结论:成功构建了人NKp46表达载体,并获得了稳定表达的工程菌株,纯化了重组蛋白。
高新谱刘正敏王来城焦玉莲刘义庆张雪赵跃然
关键词:基因克隆原核表达大肠杆菌蛋白纯化
重组hKGF2原核表达载体的构建及其蛋白质的纯化被引量:3
2007年
角质细胞生长因子2(keratinocyte growth factor2,KGF2)是新近发现的成纤维细胞生长因子家族中的一员,又称FGF10,是上皮细胞特异性的促有丝分裂剂,具有广泛的应用前景。为构建其高效原核表达体系,用RT-PCR法从培养的人胚胎肺成纤维细胞中提取成熟hKGF2cDNA,进行T-A克隆;经测序后,构建pET-30a(+)-hKGF2重组表达载体,将其转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株。IPTG诱导表达后,重组蛋白经SDS-PAGE及Western blot鉴定为高效可溶性表达。镍亲和层析(Ni+-NTA)一步法纯化后获得纯度达95%以上的目的蛋白,生物活性研究表明,重组hKGF2能有效促进人胚胎肾上皮细胞的增殖。
余德荣游力王郡甫许晓群赵跃然高春义
关键词:克隆原核表达
小鼠SLC基因真核表达载体的构建及表达被引量:1
2005年
次级淋巴组织趋化因子(secondary lymphoid tissue chemokine,SLC)是重要的CC趋化因子,对多种免疫细胞特别是T淋巴细胞、树突状细胞(dendritic cell,DC)及NK细胞具有趋化作用.研究证实,SLC通过募集T淋巴细胞、DC和NK等免疫效应细胞到肿瘤组织、促进细胞因子的释放以增强肿瘤局部非特异性免疫以及抑制肿瘤血管生成等作用,达到其显著的抗肿瘤效果,是目前肿瘤免疫治疗的理想效应分子.为了进一步探索SLC在肿瘤基因治疗中的应用,我们构建了小鼠SLC基因的真核表达载体pVAX1-mSLC,为今后开展体内基因治疗肿瘤奠定基础.
侯丽赵跃然王来城焦玉莲张捷马春燕崔彬
关键词:基因真核表达载体SLC次级淋巴组织趋化因子抑制肿瘤血管生成小鼠趋化作用
桥本甲状腺炎患者杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因多态性分析被引量:1
2008年
目的探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer cell immunoglobulin-like receptor,KIR)基因多态性与桥本甲状腺炎(HT)的关联性。方法选择100例散发HT患者,260例无血缘关系的正常人作为对照,提取全血基因组DNA,采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR—SSP)的方法,对KIR2DL1~5、KIR3DL1—3、KIR2DS1~5、KIR3DS1及KIR2DP1共15个KIR基因进行检测,其中除KIR2DS5基因外,每个基因均采用2对不同的特异性引物。结果HT病例组中KIR2DL5基因的基因频率较对照组显著降低(0.200vs0.312,RR=0.64,P〈0.01)。结论KIR2DL5基因频率的降低可能与HT的发病相关。
张海清赵家军赵跃然高聆廖琳管庆波焦玉莲
关键词:杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因甲状腺炎自身免疫性
山东地区汉族人群KIR基因多态性分析被引量:6
2008年
目的分析山东地区汉族人群杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因多态性及基因型和单倍型多态性,为进一步研究KIRs与疾病的关系奠定基础。方法采用序列特异性引物PCR法(PCR-SSP)对412例山东地区无血缘关系的汉族健康志愿者进行KIR基因频率检测及基因型和单倍型分析。结果①KIR基因频率:可检测到目前已知的18种KIR基因;所有个体均检测到3个框架基因(2DL43、DL2、3DL3)以及KIRZ,其基因频率均为100%。3DP12、DL3、2DL1、3DL1和2DS4基因较为常见,频率分别为99.03%、98.79%、98.79%、98.79%、96.84%;而2DL2、2DS23、DP1v基因频率较低。②KIR基因型频率:共检出基因型28种,以AJ(2,2)、AF(1,2)型最常见,其次为AH(5,2)、G(4,5)、AI(1,5);另外有11种基因型在白人中尚未见报道。③KIR基因单倍型频率:共检出单倍型16种,最常见的是单倍型2,频率为46.36%;其次为单倍型1,频率为25.61%。结论山东地区汉族人群有其独特的KIRs基因频率、基因型频率和单倍型频率分布;本研究可为进一步研究KIRs与疾病的相关性提供依据。
邵松刘义庆许丽崔相法陈国建王子娥卢志明赵跃然
关键词:杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因型单倍型
人CCL21基因真核表达载体的构建及表达被引量:2
2005年
为了构建可在哺乳动物细胞内高效表达人次级淋巴组织趋化性细胞因子(hCCL21)的真核表达质粒pVAX1-hCCL21,以便用于hCCL21基因治疗研究。以BamHI和XhoI双酶切重组克隆pSK-hCCL21,胶回收约540bp的hCCL21目的基因片段,以亚克隆法构建于真核表达载体pVAX1的相应酶切位点,转化后进行菌落PCR分析和BamHI、XhoI双酶切鉴定。阳性克隆提取质粒,体外电穿孔法转染COS-7细胞,Westernblot法检测转染细胞中hCCL21的瞬时表达,趋化小室法检测表达产物对淋巴细胞的免疫趋化作用。结果显示,菌落PCR和酶切鉴定证实,目的基因hCCL21正确插入到真核表达载体pVAX1中,转染COS-7细胞后,细胞培养上清及裂解产物中可检测到重组蛋白hCCL21的表达,并且表达产物对人外周血单个核细胞有明显的趋化活性。已成功构建了可在哺乳动物细胞内高效表达hCCL21基因的真核表达质粒pVAX1-hCCL21,为进一步研究hCCL21基因治疗肿瘤奠定了基础。
侯丽赵跃然焦玉莲张捷王来城马春燕崔彬
关键词:CCL21真核表达COS-7细胞电穿孔
Association of KIR Genotypes and Haplotypes with Susceptibility to Chronic Hepatitis B Virus Infection in Chinese Han Population被引量:13
2008年
Killer immunoglobulin-like receptor (KIR) genes can regulate the activation of NK and T cells upon interaction with HLA class I molecules. Hepatitis B virus (HBV) infection has been regarded as a multi-factorial disorder disease. Previous studies revealed that KIRs were involved in HCV and HIV infection or clearance. The aim of this study was to explore the possibility of the inheritance of KIR genotypes and haplotypes as a candidate for susceptibility to persistent HBV infection or HBV clearance. The sequence specific primer polymerase chain reaction (SSP-PCR) was employed to identify the KIR genes and pseudogenes in 150 chronic hepatitis B (CHB) patients, 251 spontaneously recovered (SR) controls, and 412 healthy controls. The frequencies of genotype G, M, FZ1 increased in CHB patients compared with healthy control subjects. The frequency of genotype AH was higher in SR controls than that in both CHB patients and healthy controls. The carriage frequencies of genotype G and AH were higher; while, the frequencies of AF and AJ were lower in SR controls than those in healthy control subjects. The frequency of A haplotype was lower, whereas, the frequency of B haplotype was higher in CHB patients and SR controls than those in healthy controls. In healthy controls, haplotype 4 was found lower compared with that in CHB patients and SR controls and the frequency of haplotype 5 was higher in SR controls than that in other two groups. Based on these findings, it seems that the genotypes M and FZ1 are HBV susceptive genotypes; AH, on the other hand, may be protective genotypes that facilitate the clearance of HBV. It appears that the haplotype 4 is HBV susceptive haplotype, whereas, haplotype 5 may be the protective haplotype that facilitates the clearance of HBV.
Zhiming LuBingchang ZhangShijun ChenZhongtao GaiZhaolei FengXiangdong LiuYiqing LiuXin WenLi LiYulian JiaoChunyan MaSong ShaoXiangfa CuiGuojian ChenJianfeng LiYneran Zhao
关键词:乙肝病毒KIR单体型
人NKG2A、CD94的基因克隆和真核共表达载体的构建
2007年
目的构建真核共表达载体pNKG2A-IRES-CD94。方法提取人外周血淋巴细胞总RNA,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增NKG2A、CD94基因,分别克隆pMD-NKG2A、pMD-CD94,对克隆基因进行DNA序列分析。pMD-CD94经XbaⅠ和SalⅠ酶切,插入相应酶切的真核表达载体pIRES(多克隆位点B),NKG2A经XhoⅠ和MluⅠ酶切,插入相应酶切的pIRES-CD94(多克隆位点A)。结果扩增的DNA片段和预期的人NKG2A和CD94大小一致;DNA序列分析显示,克隆的基因序列和GenBank数据库中人NKG2A和CD94基因序列一致。酶谱分析显示,NKG2A和CD94正向插入表达载体pIRES。结论成功构建了含人NKG2A和CD94的真核共表达质粒pNKG2A-IRES-CD94,为研究NKG2A和CD94基因的功能奠定了基础。
焦玉莲王来城张捷崔彬马春燕赵跃然
关键词:NKG2ACD94内部核糖体进入位点
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