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国家重点基础研究发展计划(G1999053904)

作品数:18 被引量:32H指数:4
相关作者:陈慰峰韩克军杨美香李燕钱晓萍更多>>
相关机构:北京大学山东大学赣南医学院更多>>
发文基金:国家重点基础研究发展计划北京市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 18篇中文期刊文章

领域

  • 11篇医药卫生
  • 8篇生物学

主题

  • 10篇细胞
  • 7篇基因
  • 6篇蛋白
  • 6篇肿瘤
  • 6篇抗原
  • 4篇肿瘤相关
  • 4篇克隆
  • 3篇免疫
  • 3篇T细胞
  • 2篇蛋白质
  • 2篇胸腺
  • 2篇胸腺细胞
  • 2篇原基因
  • 2篇肿瘤相关抗原
  • 2篇细胞癌
  • 2篇细胞发育
  • 2篇细胞内
  • 2篇相关抗原
  • 2篇酶联
  • 2篇酶联免疫

机构

  • 16篇北京大学
  • 3篇山东大学
  • 2篇赣南医学院
  • 1篇山东省立医院

作者

  • 16篇陈慰峰
  • 4篇钱晓萍
  • 4篇韩克军
  • 4篇杨美香
  • 4篇李燕
  • 3篇王歈
  • 3篇张君
  • 3篇曲迅
  • 2篇张华刚
  • 2篇王月丹
  • 2篇肖士云
  • 2篇田甜
  • 2篇高凌
  • 1篇冷希圣
  • 1篇张毓
  • 1篇董学员
  • 1篇尹艳慧
  • 1篇庞学雯
  • 1篇李国栋
  • 1篇付文先

传媒

  • 4篇中国生物化学...
  • 3篇中华微生物学...
  • 2篇自然科学进展
  • 2篇自然科学进展...
  • 1篇中国肿瘤生物...
  • 1篇生命科学
  • 1篇药物生物技术
  • 1篇北京大学学报...
  • 1篇中华医学杂志
  • 1篇细胞生物学杂...
  • 1篇Cell R...

年份

  • 1篇2006
  • 2篇2005
  • 4篇2004
  • 4篇2003
  • 2篇2002
  • 4篇2001
  • 1篇2000
18 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
蛋白质组学新技术及其在肿瘤标志物探索性研究中的应用被引量:2
2005年
作为基因组研究的延伸,蛋白质组学已成为世界生命科学领域的一个极其活跃的部分,是功能基因组时代或后基因组时代的核心。近年来发展起来的几种蛋白质组学新技术克服了传统蛋白质组学技术的不足,有力推进了肿瘤标志物的探索性研究。尽管如此,我们仍应该强调对实验结果的验证,这一点在探索性研究中尤其重要,力求使结果更精确、可靠和有效。
徐清问张玉霞王月丹尹艳慧陈慰峰
关键词:蛋白质组激光捕获显微切割飞行时间质谱
肿瘤抑制基因PTEN的研究进展被引量:2
2004年
评述了PTEN作为一个重要的肿瘤抑制基因 ,在功能、表达调控机制及与同源基因的关系等方面的最新研究进展 .PTEN不仅有脂质磷酸酶活性 ,还有蛋白磷酸酶活性 .通过这两种活性 ,PTEN调节细胞的生长、增殖、迁移与凋亡 ;PTEN基因和蛋白的表达被包括 p5 3,Egr 1 ,PPARγ与Sp1在内的多种因子调控 ;PTEN的同源基因PTEN 2是一种肿瘤睾丸抗原基因 ,在肝癌与肺癌中表达 。
董学员陈慰峰
关键词:肿瘤抑制基因PTEN蛋白磷酸酶细胞凋亡免疫系统
生物信息学在新基因HCA520研究中的作用被引量:2
2004年
利用生物信息学对新基因HCA5 2 0的基因和蛋白序列进行分析 ,探讨生物信息学在新基因研究中的作用。以人类基因组数据库为基础 ,利用电子PCR和SAGE对HCA5 2 0进行染色体定位和组织表达分布分析 ;BLAST程序进行HCA5 2 0的基因结构分析和相似序列搜索 ;ORFfinder和GeneRunner3.0 5程序对HCA5 2 0编码蛋白进行序列预测和功能分析。RT PCR检测HCA5 2 0的组织表达谱。通过以上分析得出HCA5 2 0的全长cDNA为 2 396bp ,定位于染色体 16 p12 .2 ,其最长的开放读码框架为 5 91bp ,编码 196个氨基酸。编码氨基酸含有典型的EF hand保守序列 ,与CHP具有很高的同源性 ,为一胞内蛋白。在多种组织中有表达。提示HCA5 2 0可能是新的钙离子结合蛋白家族成员 ,可能通过调节Na+ /H+ 交换子的活性影响细胞的生物学功能。
杨美香曲迅韩克军冯进波陈慰峰
关键词:生物信息学
肿瘤相关抗原基因HCA519在昆虫细胞中的表达和纯化被引量:4
2002年
为进行肿瘤细胞免疫应答的研究及制备肿瘤诊断用抗体 ,利用昆虫细胞表达系统表达了肿瘤相关性抗原HCA5 19的重组蛋白 ,并进行了纯化 .所表达的重组蛋白分子量约 10 0kD ,含 75 5个氨基酸残基 ,在HCA5 19cDNA3′端接入FLAG序列 ,则在重组蛋白C端接入 1个 8肽的FLAG尾 .利用其特异性抗体可以有效地纯化重组蛋白 .该FLAGTAG不影响整个重组蛋白的免疫反应性 .纯化的重组蛋白与天然蛋白具有相同或相似的免疫反应性 .它可与识别天然蛋白的血清抗体发生同样的阳性反应 .HCA5 19的足量提供 ,可以免疫动物 ,制备抗体 ;可作为抗原 ,分析其诱导肿瘤病人CTL的特异应答 。
王歈李燕陈慰峰
关键词:重组蛋白免疫反应性昆虫细胞纯化
抗mEET蛋白单克隆抗体的制备、鉴定及mEET组织学分布的分析被引量:4
2006年
目的 制备抗小鼠雌激素增强的转录子(mouse estrogen-enhanced transcript,mEET)的单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb),探讨mEET蛋白在小鼠各组织器官中的定位与分布,为进一步了解和研究mEET功能奠定基础。方法 以纯化的原核表达mEET蛋白免疫的SD大鼠脾细胞与Sp2/0融合,经HAT筛选获得稳定分泌抗mEET蛋白的McAb的杂交瘤。采用McAb通过免疫组织化学及间接免疫荧光染色分析mEET在胸腺上皮细胞系MTEC1及各组织器官中的定位与分布。结果 获得4株能高效分泌特异性McAb的抗mEET的杂交瘤细胞系DA10、DB4、4A5和4D8,Ig亚类均为IgM,其腹水效价为1:10^7~1:10^8。Western blot结果表明该抗体能特异性识别原核表达的mEET蛋白,免疫荧光及免疫组化显示mEET蛋白在胞浆点状弥散分布,部分细胞可见核内分布。免疫组化提示该蛋白在全身多个器官有表达,尤其在骨髓中的巨核细胞胞浆中高表达。结论 成功获得抗mEET的特异性的单克隆抗体,为进一步研究mEET的功能及在胸腺发育中的作用创造了条件。
邵启祥金容钱晓萍张君张毓陈慰峰
关键词:单克隆抗体
用酶联免疫斑点法检测肝癌患者抗原特异性免疫应答能力被引量:4
2001年
目的 研究HLA A2阳性肝细胞癌 (HCC)患者及正常人外周血CD8+T细胞对流感病毒抗原肽 (Flup58 66)的免疫应答能力。方法 用免疫磁珠法分离出HCC患者与正常人外周血CD8+T细胞 ,以照射后自体CD8- 外周血单个核细胞 (PBMC)或树突状细胞 (DC)作为抗原提呈细胞 (APC) ,加载Flu抗原肽 ,经 7d培养诱导 ,用酶联免疫斑点 (ELISPOT)法检测诱导后产生γ干扰素的效应CD8+T细胞频数。结果 当效应细胞为 5× 1 0 4个 /孔时 ,CD8- PBMC作为APC ,Flu抗原肽特异的CD8+T细胞频数在HCC患者组 (n =8)为 2 2个± 9个 /孔 ,正常人组 (n =1 2 )为 59个± 2 7个 /孔 ,两组间差异有非常显著意义 (P <0 0 1 ) ,但均为阳性应答 ;在 5名正常人 ,Flu抗原特异的CD8+T细胞频数以DC为APC时高于以CD8- PBMC为APC时 (P <0 0 5)。结论 HCC患者对Flup58 66的免疫应答程度虽较正常人低 ,但大多数中晚期HCC患者仍然具有对抗原肽产生特异免疫应答的能力。
庞学雯商小英吕建峰彭吉润张华刚冷希圣陈慰峰
关键词:肝细胞癌抗原
HLA-A2限制性NY-ESO-1b肽段诱导的CD8^+T细胞对稳定表达NY-ESO-1的HepG2肝癌细胞系的杀伤效应
2005年
目的分析体外诱导的NY-ESO-1特异性杀伤性T淋巴细胞对稳定表达NY-ESO-1蛋白的肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞系的杀伤效应,为进一步分析NY-ESO-1蛋白作为疫苗用于治疗HCC的可能性提供实验支持。方法从HLA-A2阳性的肝癌患者体内分离出外周血单个核细胞,用NY-ESO-1肽段体外诱导特异性杀伤性T淋巴细胞,并通过酶联免疫斑点法分析特异性杀伤性T淋巴细胞对稳定表达NY-ESO-1蛋白的HCC细胞系HepG2细胞的杀伤效应。结果转染了NY-ESO-1的HepG2细胞(HLA-A2+)可有效地被NY-ESO-1157-165抗原肽诱导的特异性CD8+T淋巴细胞所识别。效应细胞中大量GrB的释放表明其对稳定转染了NY-ESO-1基因的HepG2细胞有很强的杀伤作用。结论HepG2细胞中表达的NY-ESO-1蛋白可被此肝癌细胞有效地加工处理,而且HLA-A2限制性的抗原肽NY-ESO-1157-165也可被有效地提呈到细胞表面,从而被效应T细胞所识别。
乔欢钱晓萍张华刚田婵陈慰峰
关键词:酶联免疫吸附测定
固相PF18-3单抗促进亚适量ConA诱导的胸腺细胞活化后凋亡
2000年
目的 研究PF18 3单抗识别分子和胸腺细胞活化及凋亡的关系。方法 应用3H TdR掺入实验及流式细胞术 (FACS)技术 ,分析了胸腺细胞与固相单抗PF18 3共育后细胞活化过程中3H TdR掺入、细胞周期及DNA亚二倍体变化、早期活化及凋亡分子的表达。结果 固相单抗PF18 3有弱的促胸腺细胞3H TdR掺入和促进CD2 5的表达 ,当有亚适量ConA存在时作用更明显。与对照组相比 ,PF18 3及亚适量ConA共育后 ,2 4、48h时活细胞数量减少。细胞周期分析 ,G0 /G1期细胞相对减少 ,S期相对增多 ,但G2 /M期无明显变化。凋亡相关分析 ,共育后 2 4、48h时DNA亚二倍体阳性细胞及 12h时AnnexinV结合阳性细胞增多。结论 PF18 3单抗识别分子能协同亚适量ConA对胸腺细胞的活化 。
肖士云陈慰峰
关键词:胸腺细胞T细胞CONA
CHP与钙调神经磷酸酶的活性调节被引量:3
2004年
作为惟一受Ca2 + 调节的蛋白磷酸酶 ,钙调神经磷酸酶 (CN)在多种生物学过程中发挥关键性的调控作用 ,包括T细胞活化 ,记忆的形成 ,心肌肥大的发生 ,细胞周期调控等 .CN的丝 /苏氨酸蛋白磷酸酶活性受Ca2 + /Calmodulin等诸多生物因子的共同调节 ,其中钙调神经磷酸酶B亚基同源蛋白 (CHP)是最近研究较多的CN调节分子之一 .近年来CN的研究进展主要体现在其生物学功能 ,相关信号传导通路及活性调节等方面 .
李国栋王月丹陈慰峰
关键词:钙调神经磷酸酶活性调节CHP细胞生物学
Kinetics of thymocyte developmental process in fetal and neonatal mice
2003年
Kinetics of thymocyte development in vivo during embryogenesis was pursued. The early development of thymocytes in the fetal and neonatal BALB/c mice was discontinuous, with four waves of cell proliferation occurring at fetal day (Fd) 14 to 17, Fd 18 to day (D) 1 after birth, D 2 to D 5 and D6 thereafter. The first three proliferation waves coincided with the generation of CD4/'CD8/' (DP), TCR+CD4/hiCD8-/lo (CD4 SP), and TCR+CD4-/loCD8int/hi (CD8 SP) thymocytes, respectively. The transition from DN to DP cells was further investigated and it was found out that there were two differential pathways via immature single positive (ISP) cells in the BALB/c mice, each functioning at different fetal ages. One is via TCR-CD4-CD8+ cells, occurring between Fd 15 and Fd 17 and the other is via TCR-CD4+CD8- cells, occurring from Fd 17 until birth. In contrast, the TCR-CD4-CD8+ pathway dominated overwhelmingly in the C57BL/6 mice. These findings shed new light on the hypothesis that the differential pathway preference varies with mouse strains. With respect to the shift in the intensity of CD4 and CD8 expression on thymocytes from fetal to adult mice, the TCR+CD4/hiCD8-/lo, and TCR+CD4-/loCD8int/hi subsets might be equivalent to the medullary type TCR+CD4/CD8 SP cells.
SHI YUN XIAO, YAN LI, WEI FENG CHENDepartment of Immunology, School of Basic Medical Sciences, Peking University Health Science Center, 38 Xueyuan Road, Beijing 100083, China
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