江苏省卫生厅科研基金(H201012)
- 作品数：5 被引量：14H指数：2
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- 大麻素受体CB2选择性抑制剂对RAW264．7细胞分化为破骨细胞的作用被引量：9
- 2011年
- 目的观察大麻素受体CB2选择性抑制剂-AM630对核因子（NF）-κB受体活化因子配体（RANKL）诱导的小鼠单核／巨噬细胞株RAW264．7向破骨细胞分化的影响。方法实验分3组，即空白组，诱导组和药物组。采用噻唑蓝（MaT）法检测不同浓度AM630（0、50、103、200nmol／L）刺激RAW264．7后24、48、72h的细胞增殖活性。以50μg/L RANKL诱导RAW264．7，6d后加入103nmoL／LAM630再培养24h；抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色检测成熟破骨细胞，定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）测量CPK、RANK基因mRNA含量，Westernblot检测ERK及p-ERK表达水平。结果M1rr结果表明AM630浓度为50、103、200nmol／L时对RAW264．7细胞增殖能力无影响。TRAP染色结果表明药物组成熟破骨细胞数（65．60±4．83）／em2明显少于诱导组（181．00±6．86）／cm2，差异有统计学意义（P〈0．05）。定量RT—PCR结果证实，诱导组CPK和RANK基因mRNA含量分别为18．50±5．12和12．70±2．61；加入AM630后，上述基因mRNA含量为7．00±1．03和4．80±1．25；差异有统计学意义（P〈0．05）。Westernblot检测显示，AM630能下调RANKL诱导的p-ERK表达水平。结论大麻素受体CB2选择性抑制剂-AM630能有效地抑制RANKL诱导的RAW264．7向破骨细胞分化。
- 耿德春徐耀增朱雪松王骏骅王根林杨惠林
- 关键词：大麻素受体破骨细胞RANKL
- 选择性环氧化酶-2抑制剂调控RANKL／RANK通路抑制钛颗粒诱导的炎症性骨溶解被引量：1
- 2013年
- 目的观察选择性环氧化酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）抑制剂——帕瑞昔布对钛颗粒诱导骨溶解的治疗作用以及COX-2与NF—κB受体活化因子配体（receptor activator of NF—κB ligand，RANKL）／NF～KB受体（receptor activator of NF—κB，RANK）通路的关系。方法雌性BALB／c小鼠45只，其中15只作为颅骨供体，其余采用随机数字表法分为空白组、对照组和药物组，每组10只。采用钛颗粒诱导小鼠骨溶解模型，药物组建模前2d注射帕瑞昔布（6mg·kg^-1～·d^-1），持续至建模后2周。采用抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate—resistant acid phosphatase staining，TRAP）染色检测成熟破骨细胞；免疫组织化学检测COX-2和RANKL表达变化；ELISA法检测囊壁中前列腺素E2（dinoprostone，PGE2）、IL-1β和TNF—α含量；定量RT—PCR检测COX～2、IL-1β、TNF—α RANK和RANKL基因mRNA含量。结果TRAP染色结果显示，药物组TRAP阳性区域面积占植入骨片面积比例为（0．27±0．03）％，与对照组[（0．60±0．06）％]比较差异有统计学意义（P〈0．01）。免疫组织化学结果显示，钛颗粒植入后囊壁内COX-2和RANKL深染区域增多；药物组RANKL阳性区域减少，但COX-2表达未见明显减少。RT—PCR结果显示，钛颗粒上调COX-2、IL-1β、TNF-α、RANK和RANKL基因mRNA表达水平，药物组RANK和RANKL基因mRNA水平较低，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。ELISA结果显示，药物组PGE2含量为（202．62±11．49）pg／ml，与对照组[（407．60±13．55）pg／m1]比较差异有统计学意义（P〈0．01）；药物组IL-1β和TNF-α含量与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论选择性COX-2抑制剂——帕瑞昔布能下调RANKL／RANK的表达，减少TRAP阳性破骨细胞数量，减轻骨溶解；但对COX-2以及TNF—Or．和IL-1β的表达未产生明显影响。
- 耿德春徐耀增杨惠林朱雪松毛海青王骏骅孟斌陈亮
- 关键词：人工关节破骨细胞环氧化酶2
- Ⅱ型大麻素受体选择性抑制剂对钛颗粒诱导破骨细胞活化的作用被引量：4
- 2013年
- 目的观察Ⅱ型大麻素受体（CB2）选择性抑制剂AM630对钛颗粒（Ti）诱导炎性破骨细胞（OC）活化的影响。方法实验分5组，即空白组、核因子-κB（NF-κB）受体活化因子配体（RANKL）组、Ti组、R＋Ti组、药物组。采用噻唑蓝（MTT）法检测0．1g／LTi颗粒和不同浓度AM630（50、100、200nmol／L）处理小鼠单核／巨噬细胞株RAW264．7后24、48、72h细胞增殖活性；以0．1g／LTi颗粒和（或）50μg／LRANKL诱导RAW264．7，6d时加入AM630再培养24h，以抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色检测成熟OC，以逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测CB2、NF-κB受体活化因子（RANK）、肌酸磷酸激酶（CPK）基因mRNA含量，酶联免疫吸附试验（EusA）检测炎性因子白细胞介素（IL）-1β和肿瘤坏死因子（TNF）-α表达水平。结果MTF结果表明0．1g／LTi颗粒和（或）AM630（50、100、200nmol／L）对RAW264．7细胞增殖能力无影响。TRAP染色，RANKL组、R＋Ti颗粒组均可见大量的紫红色多核细胞；Ti组、药物组阳性细胞较少，统计分析结果表明AM630≥100nmol／L时，TRAP阳性细胞数量与RANKL组[（18L80±14．23）／孔]比较差异有统计学意义（P〈0．05）。定量RT-PCR结果显示R＋Ti组CB2、RANK以及CPKmRNA含量分别为11．26±1．39、9．68±0．91和9．93±0．56；药物组（100nmol／LAM630）上述基因mRNA含量为4．73±0．55、3．85±0．45和5．42±0．87，差异有统计学意义（P〈0．05）。ELISA结果显示，Ti颗粒加入24h后IL-1β、TNF-α的含量分别为（176．9±9．2）、（159．7±8．2）ng/L；与药物组[IL-1β：（105．5±7．0）ng／L，TNF-α：（75．9±8．1）．g／L]比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Ⅱ型大麻素受体选择性抑制剂AM630能够抑制Ti颗粒引起的炎性破骨细胞活化。’
- 耿德春徐耀增杨惠林朱雪松毛海青王骏骅孟斌陈亮
- 关键词：破骨细胞炎症钛颗粒大麻素受体2
- 硫酸钙骨水泥对骨质疏松性椎体强化作用的体内实验观察
- 2010年
- 目的观察硫酸钙骨水泥(CSC)在骨质疏松椎体内的组织学和生物力学表现,为椎体成形术或后凸成形术寻找更为合适的充填材料。方法对12只去势法制备的骨质疏松成年绵羊的L2～L5椎体制作骨缺损,随机注入CSC和聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA),并以L1和L6作正常对照。分别进行大体标本、组织学切片观察和生物力学测试。结果大体标本可见,2周时各组骨缺损处可见少量纤维疤痕形成,24周时CSC组椎体周围完全被骨性疤痕覆盖。生物力学测试显示,CSC组椎体力学性能在2周时弱于PMMA组和对照组(P<0.05),24周时几乎接近PMMA组和正常对照组。组织学切片显示,2周时CSC组材料与骨质接触的界面开始模糊;24周时CSC组仅见极少量的材料残留,可见成熟骨小梁贯穿骨缺损区域;PMMA组与骨质界面间出现膜性结构。结论 CSC材料同样能增强骨质疏松的椎体;随着时间的推移,CSC在体内能修复骨缺损,进一步提升椎体的力学性能。CSC材料可作为椎体成形或椎体后凸成形术的可选充填材料之一。
- 朱雪松施勤张志明耿德春毛海青陈春茂王根林杨惠林
- 关键词：骨质疏松硫酸钙骨水泥
- Ⅱ型大麻素受体选择性抑制剂在钛颗粒诱导炎症性骨溶解中的作用被引量：2
- 2011年
- 目的观察Ⅱ型大麻素受体：（eannabinoid receptor 2, CB2）选择性抑制剂（AM630）对磨损颗粒诱导炎症性骨溶解的治疗作用。方法雌性cBALB／c小鼠45只，其中15只作为颅骨供体，其余采用随机数字表法分为空白组、对照组和药物治疗组，每组10只。采用钛颗粒诱导的小鼠air—pouch骨溶解模型，药物组建模前2d经腹膜下注射CB2抑制剂-AM630（200μg·kg-1·d-1），持续至建模后2周。小鼠处死取材，大体观察植入骨片周围炎症变化；HE染色观察细胞浸润程度；形态计量学检测囊壁厚度；抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate—resistant acid phosphatase staining, TRAP）染色检测成熟破骨细胞；定量RT—PCR检测CB2、IL-1β、TNF-α、核因子NF—KB配体的受体（receptor activator of NF - κB ligand, RANKL）和核因子NF—κB配体（receptor activator of NF—κB，RANK）mRNA含量。结果标本大体观察，对照组植入骨片周围有红肿、渗出等明显的炎症变化，药物治疗后，炎症改变明显减轻。HE染色结果表明，对照组囊壁内大量巨噬细胞浸润；空白组及药物组囊壁内细胞少，多为成纤维细胞；对照组囊壁较厚（192．2±19．4）μm，空白组和药物组囊壁厚度分别为（88．5±14．7）¨m、（122．1±15．2）Ixm，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；对照组植入骨片周围TRAP深染区域较多，AM630治疗后深染区域明显减少；定量RT—PCR结果表明，钛颗粒刺激能够上调CB2、IL-1β、TNF-α、RANKL和RANKmRNA表达水平，药物组上述基因mRNA水平较低，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论CB2选择性抑制剂能降低磨损颗粒引起的炎症反应，抑制破骨细胞活化。CB2有望成为治疗人工关节无菌性松动的新靶点。
- 耿德春徐耀增杨惠林朱雪松王根林毛海青
- 关键词：人工关节假体失效
