卫生部科学研究基金(WKJ2004-2-011)
- 作品数：17 被引量：35H指数：3
- 相关作者：李德春朱东明张子祥朱学锋张克君更多>>
- 相关机构：苏州大学泰兴市人民医院青岛大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基质金属蛋白酶-2在胰腺癌组织中的表达及其临床意义被引量：2
- 2009年
- 目的探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）在胰腺癌组织中的表达及其与肿瘤临床病理特征的关系。方法采用S—P免疫组织化学法检测36例胰腺癌（胰腺癌组）组织及14例正常胰腺（对照组）组织中MMP-2的表达。结果胰腺癌组织中MMP-2的表达率为66．7％（24／36），正常胰腺组织中表达率为14．3％（2／14），2组比较差异有统计学意义（χ2=3．587，P〈0．01）；有淋巴结转移的胰腺癌组织MMP-2表达率为86．7％（13／15），高于无淋巴结转移者的52．4％（11／21），2组比较差异有统计学意义（χ2=4．629，P〈O．05）；胰腺癌TNM分期中Ⅰ期和Ⅱ期MMP-2表达率为41．2％（7／17），Ⅲ期和Ⅳ期表达率为89．5％（17／19），2组比较差异有统计学意义（χ2=9．418，P〈0．01）；胰腺癌高分化、中分化和低分化组织MMP-2表达率分别为50．0％（5／10）、66．7％（10／15）和72．8％（8／11），组间比较差异无统计学意义（χ2=1．073，P〉0．05）。结论MMP-2在胰腺癌组织中表达明显增强，并与胰腺癌侵袭转移密切相关，可视为反映胰腺癌侵袭特性的又一标志物．
- 朱学锋陈益君顾继礼李德春朱东明
- 关键词：胰腺癌基质金属蛋白酶-2免疫组织化学
- 2型重组腺相关病毒/增强型绿色荧光蛋白转染胰腺癌细胞PANC-1的体外研究被引量：2
- 2007年
- 基因治疗的关键是目的基因的高效转染和表达。我们采用2型重组腺相关病毒（rAAV2／EGFP）对人胰腺癌细胞PANC-1进行体外基因转移，观察EGFP基因能否在PANC-1中有效表达及其细胞毒性，探讨rAAV2介导目的基因转导胰腺癌细胞的效率。
- 朱东明李德春张子祥张克君潘新亭
- 关键词：2型重组腺相关病毒PANC-1胰腺癌细胞增强型绿色荧光蛋白体外研究EGFP基因
- 胆囊收缩素-A受体在胰腺癌细胞Panc-1中的表达及相关作用
- 2007年
- 目的探讨胰腺癌细胞Panc-1中胆囊收缩素-A受体(CCK-AR)的表达及其相关作用。方法逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Panc-1细胞表面CCK-AR的表达情况,不同浓度的CCK-AR激动剂CCK-SS、拮抗剂Lorglumide分别与Panc-1细胞共同培养,噻唑蓝(MTT)比色法、流式细胞术、TUNEL法和侵袭试验分别观察细胞的生长情况、周期改变、凋亡发生以及侵袭能力变化,Western blot法检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达变化情况。结果Panc-1细胞表面存在CCK-AR mRNA的表达,与对照组生长细胞数(70.2±1.5)及侵袭细胞数(102.1±2.7)比较,CCK-8S作用下Panc-1细胞数(85.1±1.7)明显增加,S期细胞比例增多,体外侵袭细胞数(123.8±1.1)显著增多,MMP-2的表达量增加,而Lorglumide则明显抑制Panc-1细胞(52.1±1.8)的生长,细胞被阻滞于G_0/G_1期,凋亡发生增多,同时显著抑制Panc-1细胞(77.6±0.9)的体外侵袭及MMP-2的表达,CCK-SS组、Lorglumide组分别与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论CCK-8S可能通过"CCK-CCK-AR"途径促进Panc-1细胞增殖、侵袭,而Lorglumide在一定程度上抑制这一恶性生物学行为。
- 周进李德春张子祥朱兴国
- 关键词：胆囊收缩素受体胰腺肿瘤
- 靶向MMP-2基因的RNA干扰质粒表达载体的构建被引量：1
- 2009年
- 目的构建基质金属蛋白酶2(MMP-2)特异的RNA干扰(RNAi)质粒载体,用于探讨抑制MMP-2基因表达在抗胰腺癌侵袭转移中的意义。方法根据GenBank中提供的MMP-2基因序列,设计能在体内转录小发夹结构RNA(shRNA)的cDNA序列,合成该序列并将其连接到pGCsi-U6/Neo/GFP质粒,构建受控于人U6启动子的质粒表达载体。结果PCR鉴定和测序鉴定显示构建的重组质粒pGCsi-MMP-2含有目的基因序列。结论靶向MMP-2基因的RNAi质粒表达载体被成功构建。
- 朱学锋李德春朱东明
- 关键词：基质金属蛋白酶2RNA干扰质粒胰腺癌
- RNAi抑制胰腺癌细胞株VEGF表达的实验研究被引量：2
- 2007年
- 赵鑫李德春张子祥赵华岑建农
- 关键词：RNA干扰PANC-1ELISA
- siRNA沉默EPAS1基因抑制裸鼠胰腺癌模型血管生成被引量：1
- 2009年
- 目的通过RNA干扰技术抑制缺氧诱导因子2(EPAS1)表达,从而抑制肿瘤新生血管形成来治疗胰腺癌。方法建立人胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,分为实验组、阴性组和空白组,分别注射rAAV2-EPAS1-siRNA、rAAV2-EGFP和生理盐水。测量肿瘤体积和质量,免疫组化检测肿瘤EPAS1、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达及微血管密度(MVD)值。结果与阴性组和空白组比较,实验组皮下瘤体积和质量降低,EPAS1、VEGF蛋白表达受抑制,微血管密度减小。结论siRNA沉默EPAS1基因能抑制肿瘤血管生成和胰腺癌生长。
- 赵华朱东明李德春张子祥赵鑫
- 关键词：血管内皮生长因子基因胰腺癌裸鼠
- 重组腺病毒携带人血管抑素基因抑制胰腺癌血管生成的研究
- 2007年
- 目的 研究重组腺病毒介导的人血管抑素基因（Ad—hAG）对胰腺癌血管生成的抑制作用。方法 通过病毒重组技术将人血管抑素K5基因克隆入增殖缺陷型腺病毒基因组中，获得腺病毒滴度达5．5×10^0pfu／ml。转染人胰腺癌细胞，Western印迹和ELISA法检测人血管抑素基因的蛋白表达情况，并通过建立荷人胰腺癌的裸鼠动物模型（每组15例），微血管密度计数分析血管抑素对胰腺癌血管形成的影响。结果 成功构建了携带血管抑素K5基因的腺病毒Ad—hAG；检测到重组腺病毒载体介导的血管抑素基因在胰腺癌细胞内高表达，微血管密度计数（MVD）治疗组为8．75±2．12。对照组MVD分别为20．52±1．25、18．52±1．36（t=6．165，P〈0．05）。结论 重组腺病毒介导的血管抑素基因在体内、外均获得高效表达，可明显抑制裸鼠胰腺癌血管形成和肿瘤生长。
- 潘新亭李德春朱青云张子祥朱兴国
- 关键词：血管生成抑制剂血管抑素腺病毒
- 基质金属蛋白酶及其抑制剂与肿瘤关系的研究进展被引量：4
- 2008年
- 基质金属蛋白酶(MMPs)是一组含Zn2+的蛋白水解酶,其高表达与肿瘤的恶性表型和侵袭表型有关。本文综述了MMPs及金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)的分类、特征及功能,并分析其与肿瘤的关系,MMPs及TIMPs两者的动态平衡改变是肿瘤侵袭转移的关键因素。
- 朱学锋李德春
- 关键词：金属蛋白酶组织抑制剂肿瘤关系肿瘤侵袭转移恶性表型ZN^2+
- 重组腺病毒介导PUMA基因对胰腺癌细胞的放射增敏作用被引量：3
- 2009年
- 目的探讨重组腺病毒（Ad）介导PUMA基因联合γ线对人胰腺癌的作用。方法以不同感染复数（MOI）的Ad-PUMA（10、50、100）转染胰腺癌PANC-1细胞，RT-PCR和Westernblot检测转染前后细胞内PUMA表达。PANC-1细胞分为4组：对照组、转染组、照射组、转染联合照射组。MTT比色法和流式细胞术检测各组细胞存活率和凋亡率。人胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型分为4组：对照组、转染组、照射组、转染联合照射组，在不同时间测量肿瘤生长速率和凋亡指数。结果PUMA表达随病毒MOI增加而进行性增加（MOI=10、mRNA=0．46±0．02、蛋白：0．75±0．09；MOI=50、mRNA=1．12±0．09、蛋白=1．01±0．18；MOI=100、mRNA=1．50±0．08、蛋白=1．80±0．15；P〈0．05），细胞增殖随病毒MOI增加逐渐受抑制（r=-0．98655），经7线照射后增殖抑制更加明显（r=-0．97126，P〈0．05），而凋亡率上升（照射前=45．4％±5．26％，照射后=73．2％±6．62％，P〈0．05）。Ad—PUMA转染和γ线联合照射后7～35d，裸鼠肿瘤生长速率明显低于单纯照射组、单纯转染组和对照组[第35天肿瘤体积分别为（19．82±6．45）、（39．5±9．23）、（33．6±10．3）、（52．0±11．43）mm^3，P〈0．05]，凋亡指数升高（A1分别为0．43±0．05、0．29±0．10、0．24±0．05、0．00±0．00，P〈0．05）。结论PUMA基因转染联合γ线照射可增强对胰腺癌细胞杀灭作用，联合治疗明显优于单纯照射和单纯基因治疗。
- 朱东明张克君李德春朱学锋杨勇
- 关键词：重组腺病毒基因治疗胰腺癌
- siRNA沉默EPAS1基因对胰腺癌细胞凋亡和增殖的影响被引量：2
- 2008年
- 目的研究由2型重组腺相关病毒(rAAV2)介导的靶向缺氧诱导因子2(EPAS1/HIF-2)的小干扰RNA(siR-NA)对人胰腺癌PANC-1细胞凋亡和增殖的影响。方法将人胰腺癌细胞株PANC-1分为实验组、阴性对照组(阴性组)和空白对照组(空白组),实验组和阴性组分别转染rAAV2-EPAS1-siRNA和rAAV2-EGFP病毒,空白组不转染病毒,进行常氧和缺氧培养。RT-PCR和Western blot检测EPAS1基因表达,Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡,MTT法检测细胞增殖能力。结果在常氧和缺氧状态下,实验组细胞EPAS1 mRNA和蛋白表达受抑制,显著低于阴性组和空白组,差异均有高度统计学意义(P<0.001)。在缺氧状态下,实验组细胞的凋亡率明显升高,增殖受抑制,与阴性组和空白组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论通过siRNA抑制缺氧状态下胰腺癌细胞中EPAS1基因表达,能诱导胰腺癌细胞凋亡,抑制胰腺癌细胞增殖。
- 滕宝群李德春朱东明
- 关键词：胰腺癌缺氧诱导因子2凋亡小干扰RNA
