国家自然科学基金(30230370)
- 作品数：142 被引量：995H指数：17
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- 相关机构：解放军总医院第一附属医院中国人民解放军总医院军事医学科学院更多>>
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- 骨髓间充质干细胞参与皮脂腺导管构成的初步研究被引量：1
- 2003年
- 目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为皮肤附属器的可行性。方法:抽取小型香猪的骨髓,经密度梯度离心分离、体外纯化间充质干细胞及培养扩增后,应用5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记技术进行细胞标记。将已标记的细胞(1×10~6)以注射方式回植到提供骨髓的猪的皮内及皮下,分别于注射后1、2、4周取材,常规石蜡包埋、切片,行 HE 染色及 BrdU 和角蛋白免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜观察。结果:部分 BrdU 阳性标记细胞出现在皮脂腺周围的导管中参与皮脂腺导管的形成,这些细胞经双染证实也同时表达角蛋白。提示这部分双染的导管细胞来自于植入的 MSCs。结论:在皮肤微环境下骨髓间充质干细胞可能分化为皮脂腺导管细胞。
- 方利君付小兵程飚孙同柱李建福曹荣王玉新
- 关键词：骨髓间充质干细胞分化
- 上皮细胞向免疫细胞转分化促进创伤后假性上皮瘤样肉芽肿的形成被引量：2
- 2003年
- 目的:早期创伤处理不当和创面感染可导致假性上皮瘤样肉芽肿(PEG)。本研究探讨创伤愈合过程中上皮细胞转分化与 PEG 病变发生之间的关系。方法:将11例来自创(烧)伤后继发 PEG 病变(n=11)及其边缘正常皮肤(PEG-N,n=6)标本,采用组织病理学、电子显微镜技术观察 PEG 上皮组织形态改变,并结合免疫组化和间接免疫荧光双标记技术,观察抗入广谱角蛋白(p-CK)、CK19、Ⅳ型胶原和层粘连蛋白(LN)、上皮细胞钙粘附蛋白(E-Cad)、β-连环蛋白(β-Cat)、粘着斑激酶(FAK)、干细胞因子(SCF)和受体(c-Kit)、增殖细胞核抗原(PCNA)、分化抗原簇14(CD14)、CD68和肥大细胞类胰蛋白酶(MCT)在 PEG 组织中定位和分布特征。结果:与PEG-N 组相比,PEG 呈现鳞状上皮化生,间质密布微血管结构和炎症细胞,可见上皮基底部结构崩溃、细胞顶-基极性丧失或减弱并有较多的细胞向间质迁移;超微结构显示上皮基底细胞变形、核/浆比增加和细胞间隙增宽.可见单核-巨噬细胞样细胞和肥大细胞样细胞原位"脱壳"样改变并与基底膜解离。在相同部位免疫标记显示基底细胞 p-CK、Ck19和 E-Cad 被显著下调,几乎不表达基底膜Ⅳ型胶原和 LN 成分,但对β-Cat 和 FAK 有较高的免疫反应活性,并在上皮组织和间质内发现大小不一的 CD14^+-单核细胞、CD68^+巨噬细胞、MCT^+-肥大细胞和CD68^+/MCT^+-双阳性细胞,并有较强的 SCF、c-Kit 和 PCNA 标记。结论:在 PEG 形成过程中,普遍存在上皮细胞向单核-巨噬细胞和肥大细胞的转分化现象,可能与上皮细胞差异性表达β-Cat/E-Cad 信号落差和 SCF-c—Kit信号通路被活化有关。上皮细胞向免疫细胞的异常取向可能是皮肤免疫系统过度动员的体现。上皮细胞跨胚层转分化机制将有助于肿瘤免疫和创伤修复失控机理的再认识。
- 姜笃银付小兵陈伟孙同柱盛志勇
- 关键词：肉芽肿转分化间接免疫荧光
- Leptin受体在人胚胎皮肤附件发育过程中的表达特征
- 2006年
- 目的:探讨Leptin受体在人胚胎皮肤形成和附件发育过程中的表达特点及可能的生物学意义。方法:取8-38周龄人胚胎的背部全层皮肤,制成石蜡切片．进行常规组织学观察和免疫组织化学染色(SP法),动态观察皮肤形成过程和附件发育过程中Leptin受体的表达特点。结果:胚胎8周开始,胎儿周皮已有Leptin受体表达,随后逐渐增强。至胚胎11-16周表达最强,尤其在附件原基中呈局灶性表达;胚胎22周后,Leptin受体的表达逐渐减弱,至胚胎31周后仅在皮脂腺中表达。结论:Leptin可能通过其受体参与皮肤附件的发育过程。
- 程飚方利君付小兵孙同柱
- 关键词：人胚胎皮肤附件发育过程胚胎皮肤皮脂腺
- 脂肪组织提取液促进大鼠皮肤生长的实验研究被引量：1
- 2005年
- 目的 观察脂肪组织提取液对大鼠皮肤体外培养生长的影响。方法 将 2 m m× 2 mm大小的新生大鼠皮肤接种到 2 4孔培养板内 ,分别加入含有体积分数为 10 %脂肪组织提取液 (提取液组 )或体积分数为10 %磷酸盐缓冲液 (PBS组 )的胎牛血清 Dulbecco改良 Eagle培养基培养 6 d,测量皮肤培养后的面积。结果 两组皮肤培养后均有生长 ,脂肪组织提取液组皮肤培养后面积为 (8.4 3± 1.4 0 ) mm2 ,而 PBS组为 (4.18±1.11) mm2 ,脂肪组织提取液组皮肤培养后面积约是 PBS组的 2倍 ,两组间差异有显著性 (P<0 .0 5 )。结论 脂肪组织提取液对皮肤生长有促进作用 ,其机制可能是脂肪组织提取液内含有促细胞增殖的某些生长因子和其他有利于细胞生存的物质。
- 鲁刚付小兵李海红陈伟马秀玲孙同柱
- 关键词：皮肤生长细胞增殖
- 人皮肤成纤维细胞的培养和鉴定被引量：26
- 2005年
- 目的 探索和建立人皮肤成纤维细胞体外分离、培养及鉴定的技术方法。方法 通过酶消化法分离人皮肤外分泌汗腺 ,在外分泌汗腺生长的同时 ,成纤维细胞也在生长 ;用质量分数为 0 .2 5 %的胰酶和0 .0 2 %的乙二胺四乙酸 (EDTA)消化分离汗腺细胞和成纤维细胞 ;以 Dulbecco改良的 Eagle培养液 (DMEM)为基础培养基 ,添加胎牛血清 (体积分数 10 % )、青霉素 (10 0 k U/ L)和链霉素 (10 0 mg/ L) ,置 37℃、体积分数为 5 % CO2 、95 %空气、饱和湿度条件下培养。倒置相差显微镜和苏木素伊红染色 ,观察成纤维细胞形态 ,并对培养细胞行波形蛋白免疫组化及染色体鉴定。结果 分离的成纤维细胞可在体外快速贴壁生长、增殖 ,波形蛋白免疫组化染色为阳性 ,染色体分析为 4 6条。结论 该方法所获得的皮肤成纤维细胞可在体外稳定培养 ,为在细胞水平上研究伤口愈合的机制提供了充足、可靠的靶细胞。
- 李海红周岗付小兵屈振亮孙同柱顾绍峰
- 关键词：皮肤成纤维细胞细胞培养免疫组化染色体细胞分离
- 干细胞的可塑性与皮肤再生医学被引量：1
- 2005年
- 干细胞具有稳定的存活、增殖和保持多向分化潜能的特性,在皮肤再生医学和未来组织工程皮肤领域具有广泛的研发潜力。在成年动物皮肤、神经系统、骨髓造血系统和肝脏等多种组织中存在着增殖和分化能力强的干细胞。本文主要就干细胞的分类、干细胞的可塑性、成熟细胞向干细胞逆分化、干细胞基因治疗与皮肤再生医学,以及干细胞临床应用的安全性等内容系统地进行了概述。
- 姜笃银杨定文
- 关键词：干细胞基因治疗胚胎干细胞
- PCNA、EGF、EGFR在正常口腔黏膜中的表达及其意义被引量：2
- 2003年
- 孙鹏付小兵陈伟张建强闫颖
- 关键词：增殖细胞核抗原表皮细胞生长因子表皮细胞生长因子受体口腔黏膜
- 筛选瘢痕疙瘩差异表达基因表达谱芯片的构建被引量：1
- 2003年
- 陈伟付小兵葛世丽孙晓庆孙同柱赵志力周岗盛志勇
- 关键词：基因表达谱芯片多聚酶链反应
- FGFs及其受体对胚胎器官发生的调控作用被引量：2
- 2003年
- 在胚胎器官形成过程中 ,成纤维细胞生长因子 (FGFs)是担负上皮 间质相互作用的重要调控因子 ,特别是FGF10 ,无论在外胚层上皮还是在内皮层上皮都是重要的间质调控因子。FGFs信号对早期胚胎、四肢、牙齿、肺 支气管、肝脏和胰腺、眼睑和皮肤、颅骨、下颌腺、中枢神经系统、骨骼肌、乳腺、外生殖器、泌尿器、骨骼。
- 姜笃银付小兵
- 关键词：器官形成
- 重组人血小板源性生长因子增加细胞外信号调节激酶磷酸化促进糖尿病大鼠全层皮肤缺损创面愈合(英文)被引量：2
- 2006年
- 目的 在体观察重组人血小板源性生长因子（recombinant human platelet—derived growth factor，rhPDGF）促进糖尿病大鼠全层皮肤缺损创面修复可能涉及的细胞和分子机制，研究其可能涉及的信号通路。方法 26只糖尿病大鼠，每只动物背部制备4个全层皮肤缺损创面，选取其中52个创面，随机分成3组，即对照组，创面自然愈合；rhPDGF治疗组，创面rhPDGF用量为7．0μg／cm^2；赋形剂组，创面用等量赋形剂凝胶。观察治疗后3、7和14d创面肉芽形成、胶原沉积、再上皮化速率以及炎性细胞浸润情况，并采用免疫荧光和免疫组织化学技术观察创面周围和创面修复细胞内细胞外信号调节激酶1／2（extracellular signal—regulated kinase1／2，ERK1／2）磷酸化和增殖细胞核抗原（proliferative cell nuclear antigen，PCNA）的表达。结果 组织学观察，rhPDGF治疗组创面可见大量炎性细胞浸润，毛细血管胚芽及成纤维细胞明显多于另两组（P〈0．05）；胶原沉积明显，肉芽组织生长活跃，创面收缩显著，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。免疫学研究显示，应用rhPDGF7～14d后，rhPDGF治疗组ERK1／2明显强于对照组和赋形剂组（P〈0．05）；且损伤后3～7d rhPDGF治疗组修复细胞PCNA的表达明显高于对照组和赋形剂组（P〈0．05）。结论 rhPDGF促糖尿病大鼠刨面愈合的作用部分是通过ERK1／2信号通路的磷酸化来完成的。
- 程飚刘宏伟付小兵盛志勇孙同柱
- 关键词：糖尿病血小板源性生长因子创面愈合细胞外信号调节激酶
