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电离辐射对肠上皮细胞NF-κB p65和Akt表达的影响被引量：3: 2006年; 目的观察电离辐射对肠上皮细胞PI3K/Akt通路和NF-κB通路的激活模式。方法将对数生长期的IEC-6细胞用无血清培养基培养24h后进行60Coγ射线12Gy照射,检测IEC-6细胞辐照前后不同时间Akt磷酸化水平和胞浆、胞核NF-κB P65蛋白水平变化。结果辐射可使肠上皮细胞受照20min后迅速诱导p65的核转位,但检测不到明显的Akt磷酸化;肠上皮细胞Akt磷酸化的高峰于受照后1h才出现。结论电离辐射诱导的NF-κB p65快速核转位早于辐射诱导Akt的磷酸化。; 王锋超冉新泽杜智勇艾国平王军平粟永萍; 关键词：IEC-6 PI3K/AKT NF-ΚB P65

采用RNAi技术抑制PeroxiredoxinⅠ的表达被引量：3: 2005年; Peroxiredoxin Ⅰ(PrxⅠ) is involved in many important cellular progresses such as cell proliferation and differentiation. To further elucidate its roles in ionizing radiation, eukaryotic expression vector containing siRNA targeting mRNA of peroxiredoxin 1 gene was constructed and transected into NIH3T3 cell line following sequencing.Western blot analysis showed that this siRNA significantly inhibited PrxⅠ expression by 65% at protein level; cell proliferation experiment demonstrated that the double proliferation time of NIH 3T3PrxⅠ cells was postponed for 1.8 hours as compared with control group. MTT results showed that 12 and 48 hours after irradiation the survival rate of NIH 3T3PrxⅠ was dramatically decreased when comparing with sham-irradiated group.These results suggested that peroxiredoxin 1 has radiation-cytoprotection role.; 章波艾国平王燕王峰超白云粟永萍; 关键词：RNAI技术硫氧还蛋白真核生物原核生物超氧化物

小鼠小肠上皮细胞经γ射线照射后蛋白质组差异分析被引量：17: 2003年; 目的　分析γ射线照射后 ,在辐射损伤期和修复期小鼠肠上皮细胞蛋白质组的改变 ,以探讨肠上皮细胞损伤与修复的分子机理。方法　采用 9Gy全身照射BALB c小鼠 ,分别于照射后3h和 72h取小肠制备卷肠切片 ,染色并观察小肠形态。分离未照射小鼠及照射后 3h和 72h小鼠的肠上皮细胞 ,制备蛋白样品 ,采用双向电泳技术分离样品 ,PDQuest软件处理双向电泳图谱 ;并对差异的蛋白质点进行肽质量指纹分析。结果　小鼠肠上皮在照射后 3h以损伤性改变为主 ,72h后出现明显再生修复。采用双向电泳技术在正常对照组、照射后 3h组以及照射后 72h组分别检测到(6 38± 39)、(5 6 6± 32 )和 (5 91± 2 9)个蛋白质点。对其中 2 8个差异蛋白质点进行了肽质量指纹分析 ,经数据库检索 ,初步鉴定为一些与代谢、过氧化应急、信号转导相关的蛋白质。结论　电离辐射能诱导小鼠肠上皮细胞蛋白表达的改变 ,双向电泳技术对从整体方面揭示辐射损伤的分子机理有重要价值。; 章波粟永萍刘晓宏艾国平冉新泽魏永江王军平程天民; 关键词：小鼠 Γ射线照射蛋白质组双向电泳肽质量指纹谱

氯胺酮对放烧复合伤小鼠肠源性感染影响的实验研究被引量：3: 2004年; 目的　探讨氯胺酮对放烧复合伤小鼠肠源性感染的影响。方法　以放烧复合伤小鼠 (5Gyγ射线全身照射 +15 %Ⅲ度烧伤 )为动物模型 ;伤后 30min ,腹腔内注入氯胺酮 (2 0mg/kg)进行麻醉 ;伤后 3、5、7d检测肠道形态及功能变化 ;主要检测指标为小肠湿重、小肠绒毛高度及隐凹深度的显微测量、细菌移位检测实验、血浆内毒素含量检测等。结果　放烧复合伤后 ,氯胺酮麻醉组小肠绒毛高度及小肠湿重明显高于对照组 ,移位至肠系膜淋巴结、肝及血中的细菌和内毒素浓度较对照组降低。结论　氯胺酮麻醉能减轻放烧复合伤小鼠肠道损害 ,降低肠源性感染程度。; 谭虎杨天德粟永萍陶军艾国平刘晓宏楼淑芬李广阔; 关键词：氯胺酮放烧复合伤肠源性感染

不同伤情血清可有效激活IEC-6细胞PI3K/Akt通路被引量：7: 2006年; 目的检测不同伤情血清对肠上皮细胞PI3K/Akt通路的激活。方法将对数生长期的IEC-6细胞无血清培养基培养24 h后,加入单放、单烧和复合伤24 h大鼠血清,并设正常大鼠血清组和无血清组作对照,刺激12 h后检测细胞AKT磷酸化水平。利用SELD I(surfaced enhanced laser desorption/ion ization)蛋白质芯片技术对单放、单烧、复合伤24 h大鼠血清差异蛋白进行筛选和分析。结果单放、单烧和复合伤24 h大鼠血清刺激后的IEC-6细胞Akt磷酸化水平较正常大鼠血清刺激的高,其中烧伤组最高。单放组血清与单烧血清比较有11个差异峰,复合伤组与单烧组相比有6个差异峰。结论单放、单烧和复合伤血清均可有效激活IEC-6细胞的PI3K/Akt通路,烧伤组最强,可能和烧伤组血清特殊变化有关。; 王锋超王涛艾国平王军平冉新泽杜智勇李军徐辉粟永萍; 关键词：P13K/AKT IEC-6 血清复合伤 SELDI

小肠上皮细胞电离辐射损伤修复的分子机制研究进展被引量：2: 2007年; 小肠属于快速自我更新组织，隐窝细胞对细胞毒性损伤十分敏感，全身放射性损伤（核爆炸、核事故所致）以及腹部肿瘤局部放射治疗等都可引起肠道粘膜屏障受损和吸收功能障碍。另一方面，小肠上皮有独特的组织学结构，隐窝前体细胞区和绒毛分化细胞区有明显界限，细胞增殖、分化移行路线清楚，用射线诱导隐窝细胞凋亡，观察肠上皮细胞的反应和细胞更新是研究小肠干细胞生物学的重要手段。笔者介绍了小肠上皮细胞等级性排列特点，以及对电离辐射的敏感性，; 王锋超粟永萍宁宇冉新泽王军平王崧; 关键词：小肠上皮细胞电离辐射分子机制组织学结构吸收功能障碍肠道粘膜屏障

微波电磁辐射对生物体的影响被引量：14: 2008年; 生物电磁学的研究最早可以追溯到1789年,人们对它的认识和利用随着科研水平的提高有了长足的进步,近年来国内国外的研究业已证明,电磁辐射对生物体的各个脏器均可造成不同程度的影响,其中中枢神经、内分泌、心血管、生殖、造血、免疫、视觉等系统为敏感器官,尽管各研究者的研究结论不尽相同。本工作就微波电磁辐射对各敏感器官作用效应的研究结果做一综述。; 夏红杰王德文; 关键词：电磁辐射生物体

人小肠黏膜防御素5mRNA的表达特点及意义: 2004年; 目的　检测人小肠黏膜防御素 5基因 (Alphadefensin 5 ,DEFA5)的表达 ,为从分子水平上探讨小肠黏膜抗菌防御机制提供实验依据。方法　从 2例新鲜尸体和 2例右半结肠癌患者的回肠部位取小肠黏膜提取总RNA ,通过RT PCR扩增出DEFA5的两个外显子序列 ,比较其个体间的差异 ;沿小肠轴间隔 30cm取新鲜尸体小肠黏膜提取总RNA ,仍通过RT PCR扩增编码HD 5的阅读框序列 ,比较HD 5沿肠轴的表达趋势。结果　DEFA5在个体间的表达是一致的 ,通过RT PCR获得的外显子序列大小为 4 5 1bp ,且碱基序列与GenBank中的DEFA5标准序列相一致 ;通过PCR获得的编码HD 5的阅读框序列为 30 3bp ,其中 ,酶切位点 12bp ,保护性碱基 6bp ,终止子 3bp ,编码HD 5的序列 2 82bp(94AA) ;沿着空肠到回肠的肠轴方向 ,DEFA5在空回肠黏膜均有表达 ,至回肠末端最强 ,并有逐渐增强的趋势。结论　DEFA5基因的表达在个体间是保守的 ,而且沿着空肠到回肠的肠轴方向在mRNA水平的表达有逐渐增加的趋势 ,提示HD 5作为天然免疫物质在小肠黏膜屏障功能的维护中起着十分重要的作用。此外 ,本实验获得的HD 5阅读框序列为进一步重组表达HD 5奠定了基础。; 李广阔粟永萍李旭刘晓宏艾国平田伏洲程天民; 关键词：防御素5 小肠黏膜

人源性高血糖素原基因的克隆: 2007年; 目的克隆人高血糖素原基因(proglucagonc DNA,PG cDNA),构建其真核表达质粒载体。方法从人切除脑组织中提取总RNA,并分离mRNA,经过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增出PGcDNA,并将其插入经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切的真核表达质粒载体pVITRO3中,构建重组质粒载体pVITRO3-PGcDNA。结果经过限制性酶切鉴定和测序证明,PGcD-NA全长543bp,编码181个氨基酸,并已插入到pVITRO3中。结论成功获得了PGcDNA,构建了含PGcDNA的真核表达质粒载体,为研究重组PG的功能奠定了基础。; 谭虎粟永萍杨天德艾国平黄岚陶军; 关键词：聚合酶链式反应基因表达

HD-5分泌性表达载体构建: 2007年; 目的构建防御素5分泌性表达载体。方法通过PCR重叠延伸技术得到HD-5信号肽及成熟肽的嵌合分子,并将其插入真核表达质粒pVITRO3。结果测序结果显示,成功拼接HD-5的信号肽及成熟肽,并插入到真核表达质粒pVITRO3,阅读框正确。结论PCR重叠延伸技术适用于分泌性载体构建。; 谭虎粟永萍杨天德艾国平黄岚陶军; 关键词：防御素-5 基因克隆肠源性感染

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