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RANTES、MIP-1α趋化因子对人肝癌细胞侵袭转移能力的影响被引量：18: 2006年; 目的探讨RANTES、MIP-1α趋化因子对人肝癌细胞侵袭转移能力的影响。方法应用Transwell小室研究RANTES、MIP-1α对人肝癌细胞侵袭力的影响,分别使用细胞-细胞黏附试验、细胞-基质黏附试验了解RANTES、MIP-1α预处理后人肝癌细胞黏附能力的变化。采用明胶酶谱法观察RANTES、MIP-1α刺激后人肝癌细胞基质金属蛋白酶活性改变。结果RANTES、MIP-1α等趋化因子能显著提高人肝癌细胞侵袭能力。黏附试验提示RANTES、MIP-1α可以增加人肝癌细胞与纤连蛋白和人脐静脉内皮细胞黏附。明胶酶谱显示RANTES、MIP-1α刺激后肝癌细胞基质金属蛋白酶活性显著增加。结论RANTES、MIP-1α等趋化因子可以增加人肝癌细胞侵袭转移能力。; 王晓颖樊嘉周俭邱双健余耀刘银坤汤钊猷; 关键词：趋化因子肿瘤转移

趋化因子与肿瘤侵袭转移被引量：5: 2005年; 趋化因子是一类具有趋化作用的分泌型小分子蛋白质,其受体属于G 蛋白偶联的7 次跨膜受体超家族。越来越多的证据表明趋化因子与肿瘤生长、侵袭和转移密切相关。现综述趋化因子在肿瘤细胞增殖、迁移、粘附、降解细胞外基质、肿瘤血管生成及肿瘤器官特异性转移等过程中的作用。; 王晓颖樊嘉; 关键词：趋化因子肿瘤侵润肿瘤转移

质粒介导外源性microRNA下调CCR1降低人肝癌细胞侵袭性被引量：4: 2007年; 目的观察趋化因子受体CCR1在高转移潜能人肝癌细胞HCCLM3侵袭中的作用。方法设计并合成3对靶向CCR1 mRNA的寡核苷酸片段,将其连接pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR载体构建表达microRNA(miRNA)真核载体S1、S2、S3,脂质体转染法将重组质粒转入HCCLM3细胞。实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)分析CCR1 mRNA抑制效率;Western印迹测定CCR1蛋白的表达量改变;MTT法检测HCCLM3增殖的影响;Matrigel侵袭实验检测HCCLM3细胞侵袭力的改变。结果转染48 h后,S3组CCR1 mRNA较空转染组(Mock)和非特异序列组(Neg)减少80%以上,且明显少于其他组(P<0.01);72 h后S3组CCR1蛋白表达明显少于其他组;转染后,HCCLM3细胞的增殖改变差异无统计学意义。Matrigel侵袭实验结果示转染S3后HCCLM3细胞穿过人工基底膜的数量减少80%,显著低于其他组(P<0.01)。结论人肝癌细胞HCCLM3的CCR1表达可被质粒导入的外源性miRNA有效抑制,进而降低HCCLM3细胞侵袭性,但对细胞增殖无明显影响。; 吴晓峰樊嘉王晓颖周俭邱双健余耀刘银坤汤钊猷; 关键词：CCR1 MICRORNAS

肝癌肝移植术后复发转移相关分子的定量蛋白质组学研究被引量：10: 2007年; 目的筛查肝癌肝移植术后转移复发关键分子。方法取具有相同疾病背景肝癌肝移植患者原发瘤标本,根据临床随访资料,分为复发和未复发组(各取6例)。激光显微切割分别从原发瘤标本肿瘤组织中切取同质肝肿瘤细胞,提取总蛋白,按组别等量混合蛋白后,分别进行稳定同位素轻重链标记,2D-LC-MS/MS 鉴定差异蛋白;免疫组织化学及免疫印迹验证选取的差异蛋白。结果质谱鉴定出149个有定量信息蛋白,其中表达上调2倍以上蛋白29个,表达下调2倍以上蛋白共23个。利用免疫组织化学和蛋白免疫印迹对其中上调差异蛋白 Capn4进行了验证,验证结果和质谱鉴定的结果相吻合。结论肝癌肝移植术后转移复发与多种蛋白表达改变相关,其中 Capn4高表达可能在复发转移中发挥作用,可能作为肝癌肝移植术后转移复发潜在的分子靶标。; 柏斗胜樊嘉代智周俭刘银坤; 关键词：肝移植复发蛋白质组学

CCR1趋化因子受体在人肝癌组织中表达及其临床意义被引量：21: 2006年; 目的了解 CCR1趋化因子受体在人肝癌组织中表达分布情况,探讨其表达水平与临床病理特性的关系。方法采用 RT-PCR、免疫组化、Western blot 技术检测45例肝癌组织及相应癌旁肝组织 CCR1趋化因子受体表达及分布情况,并分析其表达水平与临床病理特性的关系。结果RT-PCR、Western blot 在肝癌组织及相应癌旁肝组织中均可以检测到 CCR1趋化因子受体 mRNA及蛋白,肝癌组织表达水平高于癌旁肝组织。免疫组化显示 CCR1趋化因子受体主要表达于肝癌细胞膜。CCR1mRNA 表达水平与病人性别、年龄、血清 AFP 水平、肿瘤大小、分期无明显相关性,而与肿瘤是否有包膜(t=2.305,P<0.05)、门静脉浸润显著相关(t=3.004,P<0.01)。无门静脉浸润的肝癌组织中,47.4%免疫组化染色强度为++～+++,而有门静脉浸润的肝癌组织中.80.8%染色强度为++～+++,两者比较差异具有显著意义(X^2=5.511,P<0.05)。结论肝癌细胞表达CCR1趋化因子受体,其表达水平与肝癌侵袭性尤其是门静脉浸润相关,有望成为判断肝癌侵袭性及预后的指标。; 王晓颖樊嘉周俭邱双健余耀刘银坤汤钊猷; 关键词：肝细胞肿瘤浸润肿瘤转移门静脉癌栓

RANTES、MIP-1α趋化因子促人肝癌细胞侵袭运动的机制研究: 2007年; 目的探讨RANTES、MIP-1α趋化因子促人肝癌细胞侵袭运动的机制。方法使用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜观察RANTES、MIP-1α刺激后人肝癌细胞聚合型肌动蛋白（F-actin）聚合的变化。采用明胶酶谱法分析RANTES、MIP-1α对人肝癌细胞基质金属蛋白酶分泌及活性的影响。结果RAN-TES、MIP-1α可诱导人肝癌细胞内F-actin的聚合，并刺激细胞突起和伪足形成。明胶酶谱显示RANTES、MIP-1α刺激后人肝癌细胞基质金属蛋白酶MMP-2、MMPO等活性显著增加，降解基质能力增强。结论RANTES、MIP-1α趋化因子可以诱导F-actin聚合促进人肝癌细胞定向运动，并通过增加基质金属蛋白酶活性提高人肝癌细胞侵袭能力。; 王晓颖樊嘉周俭邱双健吴晓峰刘银坤汤钊猷; 关键词：趋化因子细胞运动肿瘤浸润

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国家自然科学基金(30471668)