国家自然科学基金(81201679)
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
- 相关作者：郭丹陈茜黄佳祎王婷王薛更多>>
- 相关机构：重庆医科大学重庆医科大学附属第二医院重庆市生物化学与分子药理学重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 外源性HBx在昆明小鼠体内促进肝前体细胞上皮间质转化被引量：2
- 2017年
- 目的构建靶向作用于小鼠肝前体细胞的动物模型,研究乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)对肝前体细胞上皮间质转化(EMT)的影响。方法每周2次给予昆明小鼠2 m L/L四氯化碳灌胃,4周后行经门静脉注射稳定表达HBx的肝前体细胞和稳定表达空载体的肝前体细胞同时切除部分肝脏。术后继续每周2次进行灌胃,并分别于术后3、5、7、14、21、28 d,处死小鼠取肝脏标本;实时定量PCR检测小鼠肝组织HBx的mRNA水平、免疫组织化学染色检测肝组织中外源性细胞的存活。实时荧光定量PCR检测上皮钙黏素(E-cadherin)、神经钙黏素(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)和细胞角蛋白18(CK18)mRNA水平,Western blot法检测E-cadherin、N-cadherin、vimentin、CK18蛋白水平。结果免疫组织化学染色结果显示,术后肝脏组织明显有外源性细胞存活.随注射时间延长,肝组织HBx的含量增加,表达区域增大;实时荧光定量PCR和Western blot结果均显示过表达HBx能够使小鼠肝组织中E-cadherin、CK18水平降低,而N-cadherin、vimentin的水平增加。结论动物模型证实HBx在肝前体细胞EMT过程中起着重要的调控作用。
- 陈茜王婷程俊雄黄佳祎
- 关键词：HBX蛋白肝前体细胞
- 人胚胎干细胞对肝癌HepG2细胞体外抑制作用的研究
- 2017年
- 目的:研究体外共培养情况下人胚胎干细胞H9对肝癌HepG2细胞的抑制作用。方法:建立人胚胎干细胞(H9)与肝癌HepG2细胞共培养体系,显微镜下观察胚胎干细胞对肿瘤细胞生物学行为的影响,流式细胞仪检测H9细胞对肿瘤细胞的凋亡与周期的影响,Transwell小室法检测H9细胞对HepG2细胞侵袭和迁移的影响,基因芯片分析共培养后HepG2细胞全基因组的表达谱变化。结果:结果发现共培养过程中,肝癌HepG2细胞生长受到抑制,随共培养时间延长,细胞数量逐渐减少,出现老化或凋亡迹象;流式细胞术检测发现HepG2细胞凋亡率显著增加,细胞周期被阻滞于G0/G1期;Transwell实验发现HepG2细胞侵袭、迁移力均降低;基因芯片结果发现HepG2细胞全基因组表达谱发生了显著变化,差异基因涉及多条信号通路。结论:人胚胎干细胞H9体外对人肝癌细胞HepG2有一定程度的抑制作用。
- 郑良栋何雪梅张婷刘洁霍本念刘梦楠王薛冯涛
- 关键词：胚胎干细胞肝癌共培养
- 乳腺癌拉帕替尼耐药模型建立及二甲双胍逆转其耐药性的初步探讨被引量：3
- 2018年
- 目的:建立乳腺癌拉帕替尼耐药模型并初步探讨二甲双胍对其耐药性的逆转作用。方法:体外建立乳腺癌拉帕替尼耐药模型;实验分为亲本组、空白耐药组、拉帕替尼组二甲双胍组和联合用药组(n=3);CCK-8法检测并计算空白耐药组细胞耐药倍数及二甲双胍组细胞逆转耐药倍数;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测各组细胞凋亡率和周期;Western blot检测各组细胞PI3K信号通路相关蛋白的表达水平。结果:空白耐药组细胞对拉帕替尼敏感性降低;亲本组、空白耐药组及二甲双胍组细胞IC50值分别为(2.64±0.12)、(11.21±0.03)、(5.62±0.13)μmol/L,耐药倍数约为4.25,逆转耐药倍数约为2.0;二甲双胍组(0.73±0.04)细胞增殖指数较空白耐药组(1.11±0.02)明显降低(P=0.004),联合用药组(0.63±0.06)细胞增殖指数较空白耐药组(1.11±0.02)同样明显降低(P=0.031);二甲双胍组[(10.70±0.76)%]细胞凋亡率较空白耐药组[(5.05±0.59)%]明显增高(P=0.007),联合用药组[(24.68±1.52)%]细胞凋亡率较空白耐药组[(5.05±0.59)%]同样明显增高(P=0.006);联合用药组中PI3K信号通路相关磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白表达较空白耐药组均下降。结论:成功建立乳腺癌拉帕替尼耐药模型;二甲双胍通过抑制PI3K信号通路逆转乳腺癌拉帕替尼耐药性。
- 王婷陈鹏徐婷郭丹黄佳祎
- 关键词：乳腺癌二甲双胍拉帕替尼逆转耐药PI3K信号通路
- 依维莫司协同拉帕替尼降低HER2^+乳腺癌对拉帕替尼耐药被引量：3
- 2020年
- 研究依维莫司(Everolimus)联合拉帕替尼(Lapatinib)对HER2^+乳腺癌耐药细胞的影响。CCK-8法测定乳腺癌亲本细胞(skbr3)和耐药细胞(skbr3-LR)的细胞活性、半数抑制浓度(Half inhibitory concentration,IC50);CompuSyn软件计算联合作用指数(combined effect index,CI)值;流式细胞术检测对照组实验组skbr3-LR的周期;Western blotting方法检测各组AKT、m TOR、S6相关蛋白的表达量。依维莫司联合拉帕替尼使skbr3-LR对拉帕替尼的IC50从(27.13±0.3)下降到(6.79±0.04);20 nmol/L依维莫司联合5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L拉帕替尼CI指数分别为0.24367、0.27861、0.28219、0.36679、0.41667;拉帕替尼联合依维莫司组G1期细胞百分数(69.84±0.93)%显著大于对照组(52.91±1.64)%(p<0.001),也显著高于拉帕替尼组(59.77±0.52)%(p<0.001)和依维莫司组(58.73±0.64)%(p<0.001);Western blotting结果显示skbr3-LR中p-mTOR比skbr3表达上调(p<0.001),20 nmol/L依维莫司或10μmol/L拉帕替尼单独处理skbr3-LR,以及联合用药组与skbr3-LR组相比p-mTOR均有显著下调(p<0.001,p<0.01,p<0.001)。依维莫司联合拉帕替尼可协同抑制skbr3-LR增殖,降低其拉帕替尼耐药性,其作用机制部分是通过下调AKT/mTOR/S6通路实现的。
- 徐婷陈鹏郭丹黄佳祎
- 关键词：依维莫司拉帕替尼乳腺癌MTOR
