广东省卫生厅资助课题(B2013293) 作品数:6 被引量:8 H指数:2 相关作者: 王森 胡新荣 姚运红 陈章权 郑晓璇 更多>> 相关机构: 广东医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 广东省卫生厅资助课题 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
成骨细胞培养微环境对结肠癌细胞的STAT3转录表达及细胞增殖的影响 2013年 目的:探讨恶性肿瘤骨转移过程中成骨细胞微环境(OBM)对结肠癌细胞信号传导与转录激活因子3(STAT3)的mRNA表达及细胞增殖的作用。方法:取成骨细胞培养液与DMEM血清培养基按照1:1比例混合,培养SW480细胞。实验分对照组及实验组(添加成骨细胞培养液)。STAT3的mRNA水平的检测采用RealtimePCR方法,结肠癌细胞SW480的增殖能力改变采用CCK-8法。结果:取成骨细胞培养液作用于SW480细胞后,与对照组相比,在1d,2d,3d三个时间点,实验组STAT3 mRNA水平均升高,其增强水平约为12.1%,21.8%,23.9%;与此相似的是,CCK-8检测实验组细胞增殖能力在三个时间点分别升高约5.6%,23.9%,18.8%。结论:OBM可上调SW480细胞中STAT3的转录表达并促进细胞增殖。 王森 陈泓臻 雍伟伟 曾超 熊晖 陈章权 胡新荣关键词:结肠癌 STAT3 新型抗炎因子IL-37对肺癌A549细胞增殖及E-cadherin转录表达的影响 被引量:4 2014年 目的:探讨IL-37对肺癌A549细胞增殖及E-cadherin(E-cad)转录表达的影响。方法:将IL-37过表达载体转染肺癌A549细胞,采用Real time PCR检测IL-37及E-cadherin的mRNA表达,Western blot检测蛋白表达,CCK-8法检测A549细胞增殖。结果:在转录水平,IL-37组mRNA表达较NC组升高约200倍;在蛋白水平,NC组A549细胞中几乎未见IL-37蛋白表达,IL-37组则检测到明显的IL-37蛋白,显示IL-37重组质粒成功转染A549细胞。IL-37组与NC组相比,E-cad的mRNA水平升高约20%。在对A549细胞的增殖影响方面,与NC组相比,在24h,48h,72h,IL-37组细胞增殖抑制率约为15.6%,29.2%,28.1%。结论:新型抗炎因子IL-37可抑制A549细胞增殖并上调E-cad表达。 王森 郑晓璇 陈章权关键词:A549 RNA干扰信号转导与转录因子3基因对宫颈癌Hela细胞增殖的影响 2014年 目的:利用RNA干扰技术沉默信号转导与转录因子STAT3的基因表达,检测其对Hela细胞的增殖的影响。方法:本次实验将其分组为Normal Control组(NC组)及siSTAT3组两组。采用脂质体法转染siSTAT3,用Real time PCR检测STAT3的mRNA表达,用Westernblot检测蛋白表达,用CCK-8法检测Hela细胞的增殖。结果:将两组的各项数据进行对比。对转录结果进行对比发现,siSTAT3组中的STAT3 mRNA表达较NC组中的STAT3 mRNA表达下降显著,其下降水平约为70%;对蛋白表达结果进行对比发现,siSTAT3组中的STAT3蛋白表达较NC组中的STAT3蛋白表达下降显著,其下降水平约为53%,上述数据显示,利用RNA干扰技术可成功地干扰了STAT3的基因表达。而siSTAT3组在对Hela细胞增殖的影响方面与NC组相比,其在24h,48h,72h,Hela细胞增殖的抑制率约分别为15.5%,29.4%,30.4%。结论:利用RNA干扰技术沉默信号转导与转录因子STAT3的基因表达可抑制Hela细胞的增殖。 王森 陈荏槐 郑晓璇 朱伟 姚运红 胡新荣关键词:STAT3 HELA RNA干扰 利用RNA干扰技术探讨STAT3对宫颈癌C33a细胞增殖的影响 被引量:1 2014年 目的为了探讨信号转导与转录活化因子3(STAT3)对宫颈癌细胞的作用,我们利用RNAi干扰其表达,检测其对C33a细胞增殖的影响。方法实验分组为对照组(即正常C33a细胞组)及干扰组(即RNA干扰STAT3组)。利用新型阳离子脂质体转染试剂Hilymax导入STAT3 RNA干扰序列,而后检测STAT3的表达,并利用CCK-8法检测C33a的细胞增殖水平改变。结果与对照组相比,干扰组STAT3 mRNA下降约75%,显示成功干扰STAT3的基因表达。与对照组相比,在1、2、3 d,干扰组细胞增殖水平较对照组抑制了约19.1%,31.2%,32.0%。结论本研究成功干扰C33a细胞STAT3的表达,且STAT3沉默可进一步抑制C33a细胞增殖。 王森 陈荏槐 康海鲜 姚运红 胡新荣 朱伟关键词:STAT3 RNA干扰 新型抗炎因子IL-37真核表达载体pIRES2-EGFP/IL-37的构建及鉴定 被引量:3 2014年 目的构建新型抗炎因子IL-37的真核表达载体p IRES2-EGFP/IL-37(p IEIL37)并进行鉴定。方法 Trizol法提取THP-1细胞RNA,RT-PCR扩增IL-37基因,将目的基因片段定向克隆到真核表达载体p IRES2-EGFP;将重组质粒转化大肠杆菌DH5,并进行PCR、双酶切和DNA测序鉴定。结果琼脂糖凝胶电泳显示1条约710 bp大小的条带;双酶切结果显示约675 bp大小的条带;DNA测序表明IL-37基因正确插入真核表达载体p IRES2-EGFP。结论成功构建IL-37真核表达载体p IRES2-EGFP/IL-37。 陈荏槐 胡新荣 姚运红 陈章权 王森关键词:基因克隆 真核表达载体