福建省自然科学基金(2009J01196)
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
- 相关作者：马素娟龙敏南陈清西陶毅明邬小兵更多>>
- 相关机构：厦门大学福建师范大学国家药典委员会更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 发酵产物对灰绿曲霉β-葡萄糖苷酶活力的影响被引量：4
- 2014年
- 从自行筛选出的灰绿曲霉XC-9菌株的发酵液得到活力较高的纤维素酶,分离纯化出其中的β-葡萄糖苷酶(BG).探讨发酵产物对酶活力的影响,乙醇、乙酸、乳酸对酶活力有不同程度抑制,抑制强度依次为乳酸>乙酸>乙醇,其半抑制浓度(IC50)分别为0.09,0.34和4.4mol/L.它们对BG的抑制作用均表现为非竞争性可逆抑制,抑制常数分别为0.7%(0.083mol/L)、2%(0.315mol/L)、26%(4.25mol/L),实验结果表明它们不是结合在酶活性中心的底物结合部位上,而是结合在其以外的必需基团上抑制酶活力.随着乙醇浓度上升,BG最适反应温度逐渐降低,乙醇达到20%(体积分数,下同)时,BG最适温度由60℃降到50℃.在低体积分数乙醇溶液(小于16%)中的BG活力高过无乙醇溶液中的BG活力.荧光光谱分析表明,高浓度乙醇可使BG分子构象松散,导致变构失效.该研究为纤维素酶发酵进程控制提供了理论依据.
- 许鑫琦任跃明马素娟龙敏南陈清西
- 关键词：灰绿曲霉Β-葡萄糖苷酶发酵产物构象
- 灰绿曲霉产纤维素酶的研究被引量：6
- 2010年
- 灰绿曲霉（Aspergillus glaucus）发酵液通过硫酸铵盐析、Sephadex G-100分子筛、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换柱和Phenyl Sepharose Fast Flow疏水层析,分离纯化一种外切葡聚糖酶（CBH）和一种内切葡聚糖酶（EG）.通过SDS-PAGE和凝胶柱层析法测定分子质量表明：CBH全酶分子质量为71 ku,由两个分子质量为35 ku的同型亚基组成;EG为单体蛋白,全酶分子质量为32 ku.酶学性质研究表明：CBH催化pNPC的最适pH为6.0,最适温度为55℃,酶活在pH 5.0~8.0区间和温度低于55℃时稳定;EG催化CMC-Na的最适pH为4.0,最适温度为50℃,酶活在pH3.5~7.5区间和温度低于65℃时稳定.Na＋、K＋、Ba2＋、Mg2＋以及NO3-和SO42-对CBH和EG酶活均无影响;Ca2＋和Mn2＋对CBH有激活作用,Fe2＋和Mn2＋对EG有激活作用,而Zn2＋、Cd2＋和Cu2＋对CBH和EG均有不同程度的抑制效应.酶动力学分析表明：CBH催化pNPC水解的米氏常数Km值为1.4 mmol/L（pH 6.0,55℃）,EG催化CMC-Na水解的米氏常数Km值为5.0 mg/mL（pH 4.0,50℃）.
- 陶毅明马素娟邬小兵龙敏南黄建忠陈清西
- 关键词：灰绿曲霉纤维素酶内切葡聚糖酶分离纯化酶学性质
