国家自然科学基金(30973033) 作品数:4 被引量:27 H指数:2 相关作者: 黄霖 沈慧勇 唐勇 叶记超 王鹏 更多>> 相关机构: 中山大学孙逸仙纪念医院 中山大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
人神经干细胞移植对脊髓损伤大鼠后肢运动功能恢复的影响 被引量:11 2010年 目的:探讨人神经干细胞(hNSCs)移植对脊髓损伤大鼠后肢运动功能恢复的影响及可能机制。方法:取2~3个月流产胎儿海马区组织,体外培养神经干细胞;采用通用型脊髓打击器将24只成年SD大鼠制成脊髓损伤模型,伤后第8天随机分为移植组和对照组,于损伤中心分别注入CM-DiI标记的hNSCs悬液和DMEM/F12培养液。分别于hNSCs移植后当天及1、2、3、4、6、8周采用Basso,Beattie,Bresnahan(BBB)行为功能评定量表评估大鼠后肢运动功能恢复情况。移植后第4、8周取损伤部位脊髓,行病理切片,免疫组化方法观察移植细胞的存活和迁移,并检测损伤脊髓处胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经元核心抗原(NeuN)、2,3-环核苷酸磷酸二酯酶(CNPase)、神经巢蛋白(Nestin)等抗原的表达。结果:移植组后肢运动功能评分随时间延长而逐渐升高,移植1周时后肢运动功能有所改善,与对照组无明显差异(6.4±0.99 vs 6.0±0.93,P>0.05);移植4周时后肢运动功能比1周时有明显恢复,BBB评分明显高于对照组(9.7±1.04 vs 7.4±0.95,P<0.05);移植的hNSCs可在损伤脊髓处长时间存活(至少8周),并分化为神经元、少突胶质细胞和星形胶质细胞。结论:人神经干细胞可在损伤脊髓处向神经元和神经胶质细胞分化,并能促进脊髓损伤大鼠后肢运动功能的部分恢复。 贺晓玉 沈慧勇 项鹏 吴燕峰 唐勇 史玉朋 黄霖 杨睿 叶记超关键词:脊髓损伤 神经干细胞 人胚胎神经干细胞延迟移植对脊髓损伤大鼠运动功能的影响及其机制 被引量:1 2011年 目的:初步探讨人胚胎神经干细胞(hunmn fetal neural stem cells,hfNSCs)延迟移植对脊髓损伤人鼠运动功能的影响及其机制。方法:体外分离、培养和鉴定hfNSCs,选取200~250g的Wistar大鼠28只建立T9~T11节段脊髓挫伤模型.损伤后第9天取20只BBB评分为4~5分的大鼠随机分为埘照组及移植组(每组10只),同时在T10水平脊髓中线两侧1.5mm处分别给予2μl小含hfNSCs的杜氏磷酸缓冲液(DPBS)及2μl含有10^5个体外培养第2代hfNSCs的DPBS,细胞移植后第7、14、28、42、56天用BBB评分评价两组后肢运动功能,移植后第28天及第56天用免疫组织化学法检测移植组大鼠损伤脊髓局部神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、做管相关蛋白2(MAP2)和2’,3'-环腺苷酸-3’-磷酸二酯酶(CNPase)的表达情况,以评价大鼠损伤脊髓局部hfNSCs的存活及分化情况。移植后第56天髓磷脂碱性蛋白(MBP)染色及透射电子显微镜扫描观察移植组与对组损伤局部髓鞘形成情况。结果:体外培养的hfNSCs表达Nestin,并可分化为星彤胶质细胞[(61.2±1.6)%]、神经元[(27.6±3.4)%]及少突胶质细胞[(6.0±5.5)%]。移植前及移植后第7、14天两组BBB评分比较尢统计学差异(P〉0.05).移植组在移植后第28、42、56天评分(分别为8.30±1.07分,11.30±1.05分,15.10±1.12分)较对照组(分别为7.00±0.98分,8.30±1.02分,9.10±0.96分)明显提高(P〈0.05)。在移植后第28天hfNSCs可分化为GFAP阳性的星形胶质细胞、MAP2阳性的神经元和CNPase阳性的少突胶质细胞,在移植后第56天hfNSCs仍在损伤局部存活并可分化为星形胶质细胞和少突胶质细胞,但未见神经元分化;移植后第56天星形胶质细胞的积分比密度(IOD)值(1502.31±131.92)大于移植后第28天(628.98±119.31)(P〈0.05),而少突胶质细胞仵移植后 王鹏 吴燕峰 孟庆奇 黄霖 王文豪 高梁斌 唐勇 沈慧勇关键词:脊髓损伤 神经干细胞 颈椎骨折合并急性颈髓损伤的手术时机探讨 被引量:2 2012年 目的探讨颈椎骨折合并急性颈髓损伤的手术时机。方法回顾性分析2000年1月~2011年1月我科治疗的颈髓损伤患者42例,其中急诊手术组(≤24h)18例,延期手术组(>24h)24例,对比分析手术前后神经功能变化、术后并发症和住院时间等临床资料,并进行统计学分析。结果急诊手术组感觉和运动功能改善明显,并发症发生率、重症监护时间和住院时间均低于延期手术组。结论颈椎骨折合并急性颈髓损伤的急诊手术减压是可行的,对神经功能的恢复有积极作用,并减少围手术期并发症。 陈铿 唐勇 唐勇 王鹏 黄霖 沈慧勇关键词:脊髓损伤 颈椎骨折 手术时机 改良一期后路全脊椎整块切除术治疗胸腰椎肿瘤 被引量:13 2011年 目的 探讨改良一期后路全脊椎整块切除术治疗胸腰椎肿瘤的手术要点、器械改进及短期疗效.方法 改良一期后路全脊椎整块切除术的整套器械包括:自制0.81 mm的钢缆式线锯、线锯改向器、L形骨刀和叉形骨刀;将Tomita后路全脊椎整块切除手术方法改良为前锯后刀会师两步截断法,即将线锯由前向后切割至约为椎间盘中后1/3处,再用L形骨刀经两侧由后向前凿至与线锯切割水平处会师,进而完成整个椎间盘的截断.而对于线锯引导过椎弓根困难的病例,则改为应用叉形骨刀截断椎弓根.用本术式治疗10例胸腰椎肿瘤患者,均有中重度疼痛和不同程度的脊髓神经受累表现.结果 7例胸椎肿瘤患者中,5例患者术后神经学功能均较术前提高ASIA分级1级,2例无变化;3例腰椎肿瘤患者术后神经根痛明显缓解,肌力均恢复至4级以上.平均手术时间7.8 h(6.0~10.3 h),平均术中出血2100 ml(1200~3500ml).未发生硬膜撕裂、脑脊液漏、医原性脊髓损伤和大血管损伤,术中胸膜撕裂2例,均予以留置胸腔闭式引流.术后平均随访8.1(3.3~18.1)个月,均无局部复发和内植物失败.结论 应用改良一期后路全脊椎整块切除术治疗胸腰椎肿瘤的易操作性和安全性增加. 沈慧勇 黄霖 杨睿 叶记超 陈铿 唐勇 王鹏关键词:胸椎 腰椎 脊椎肿瘤