国家自然科学基金(81160133)
- 作品数：8 被引量：14H指数：2
- 相关作者：陈文霞周俊王兆晶何璇韦维更多>>
- 相关机构：广西医科大学附属口腔医院广西医科大学阿拉巴马大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 富血小板纤维蛋白凝胶三维结构及其对人牙髓细胞体外增殖的影响被引量：8
- 2015年
- 目的:分析富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)凝胶的三维结构,并探索不同浓度PRF凝胶析出液对人牙髓细胞(human dental pulp cells,h DPCs)体外增殖的影响,评价PRF凝胶作为牙髓组织再生支架的可行性。方法:采用Choukroun一步离心法,制备PRF凝胶,分别行组织学和扫描电镜(SEM)观察。将新鲜制备的PRF凝胶浸泡于DMEM培养基中,于第7天取出析出液。分别用含PRF凝胶析出液浓度(体积分数)为25%(1PRF组)和75%(3PRF组)的DMEM培养基培养h DPCs。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测24、48、72、96、120、144、168 h各时间点的细胞增殖活性。采用SPSS16.0软件包对数据进行统计学处理。结果:光镜和SEM观察结果均表明,血小板和白细胞主要分布在PRF凝胶的白膜层,此层由粗大而密集的纤维蛋白条索构成。CCK-8结果显示,在24、48、72、96 h,1PRF组和3PRF组的光密吸光度(OD)值与对照组相比,差异无显著性(P>0.05);在120、144、168 h,1PRF组和3PRF组的光密度值显著高于对照组(P<0.05);1PRF组的OD值和3PRF组相比,差异无显著性(P>0.05)。结论:PRF凝胶的三维结构由纤维蛋白网构成,其白膜层聚集了大量可释放生长因子的血小板与白细胞;PRF凝胶析出液对h DPCs体外增殖的促进作用具有时间依赖性,提示PRF凝胶有望成为牙髓再生的良好支架材料。
- 何璇韦维陈文霞
- 关键词：人牙髓细胞
- 根管管腔中基质衍生细胞因子-1α诱导内源性细胞归巢的研究被引量：1
- 2015年
- 目的探讨基质衍生细胞因子-1α(SDF-1α)在根管预备后的根管管腔环境下诱导内源性细胞归巢的能力。方法临床收集因正畸需要拔除的前磨牙,制备成长5 mm的根管段共30个,分为实验组及对照组各15个,实验组根管段内植入复合100 ng/ml SDF-1α的多肽水凝胶胶原支架,对照组根管段内仅植入多肽水凝胶胶原支架。选取15只裸鼠,于左右两侧皮下组织分别植入对照组、实验组根管段样本,4周后取材,对样本进行组织切片观察。结果实验组根管段内见大量细胞和血管的结缔组织形成,对照组根管段内见均质状疏松组织,未见细胞、血管等新生组织。结论 SDF-1α在根管预备后的根管管腔环境下具备诱导内源性细胞归巢的能力。
- 王兆晶周俊陈文瑨苏心韵陈文霞
- 关键词：裸鼠细胞归巢
- 骨髓间充质干细胞与牙髓细胞共培养细胞特性的体外研究被引量：3
- 2015年
- 目的:研究大鼠骨髓间充质干细胞(BMMSCs)与牙髓细胞(DPCs)体外共培养后细胞增殖、分化的生物学特征,探讨采用BMMSCs与DPCs共培养获得牙髓再生组织工程学种子细胞的可行性。方法:分别在体外分离培养大鼠BMMSCs和DPCs,并分别传至第3代。通过成骨及成脂诱导进行BMMSCs鉴定。取第3代DPCs和BMMSCs分为3组,(1)DPCs组;(2)共培养组;(3)BMMSCs组。共培养时间为6d,取出细胞半定量聚合酶联反应检测基质细胞抗原-1(Stro-1)及牙本质涎磷蛋白(DSPP)的基因表达量,并用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法绘制细胞生长曲线。结果:1DPCs传至第3代后,细胞形态稳定均一,呈成纤维细胞样,长梭形;BMMSCs传至第3代后,细胞形态稳定均一,呈长梭形,平行排列或呈漩涡状生长,成脂成骨染色阳性。2细胞生长曲线示:共培养组的DPCs较DPCs组先进入指数生长期。共培养组BMMSCs较BMMSCs组后进入指数生长期。3Stro-1的表达量:BMMSCs组表达量最高,共培养组BMMSCs表达量下降;DPCs组表达量最低,共培养组DPCs表达量上升,差异有统计学意义(P=0.000)。DSPP的表达量:共培养组DPCs较DPCs组表达量下降;共培养组BMMSCs较BMMSCs组表达量上升,差异有统计学意义(P=0.019)。结论:BMMSCs与DPCs共培养,可以促进DPCs的增殖,以及有去分化的趋势;抑制BMMSCs的增殖,具有向DPCs分化的趋势。
- 陈文瑨周俊王兆晶苏心韵陈文霞
- 关键词：骨髓间充质干细胞牙髓细胞共培养
- 新型动物口腔诊疗支架的研制及应用
- 2017年
- 目的 :设计一种新型动物口腔诊疗支架,并将其应用于犬牙髓再生实验。方法 :该装置包括上支撑架、口腔限位架和下支撑架3个部分,并依上至下相连接。上、下支撑架高度和宽度为可调节式,且支撑架可旋转,末端为弧形结构。口腔限位架左右两侧为套筒结构,连接套筒结构的上限位杆与下支撑架中的下限位杆为可伸缩式。结果:该口腔诊疗支架能使实验动物稳定维持长时间的张口状态,并可根据不同种类动物的颌面部结构进行三维调整,方便医护人员对动物进行喉部检查、口腔检查、口腔护理及牙科治疗(如根管治疗、牙体充填)和其他医护行为。结论:该口腔诊疗支架设计合理、结构简单、便于携带,方便拆卸与组装,易于消毒与灭菌,且成本低廉,可以起到保护软组织、开放手术视野、隔离唾液污染的作用,值得在临床动物实验以及动物诊所推广使用。
- 欧永富陈文霞周俊王兆晶陈文瑨陈凤班桂飞
- 关键词：动物口腔诊疗口腔手术
- 富血小板纤维蛋白凝胶对人牙髓细胞体外增殖的影响
- 目的:探索不同浓度富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)凝胶析出液对人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)体外增殖的影响,评价PRF凝胶作为牙髓组织再生支架...
- 何璇韦维陈文霞
- 文献传递
- 富血小板纤维蛋白凝胶析出液对人牙髓细胞体外矿化的影响
- 2015年
- 目的探索富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)凝胶析出液对人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)体外矿化的影响。方法组织块法培养hDPCs。采用Choukroun一步离心法制备PRF凝胶。将新鲜制备的PRF凝胶浸泡于DMEM培养基中,于第7d取析出液。用PRF凝胶析出液孵育hDPCs 3d后更换矿化诱导液。采用茜素红染色和RT-PCR检测人牙髓细胞矿化的潜能。结果矿化诱导21d后,茜素红染色观察到实验组有少量钙结节生成,而对照组无钙结节生成;RT-PCR结果显示,实验组hDPCs碱性磷酸酶(ALP)的表达为对照组的1.5倍,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 PRF凝胶析出液可促进人牙髓细胞矿化。
- 何璇韦维陈文霞
- 关键词：人牙髓细胞矿化
- 模拟髓腔压力下牙本质深度对粘接系统剪切强度影响的比较研究被引量：1
- 2018年
- 目的:在模拟髓腔压力条件下,比较不同粘接系统对不同深度牙本质层的剪切强度的影响。方法:72颗无龋第三磨牙截冠暴露成36颗牙本质浅层和36颗牙本质深层并随机分至3个不同粘接剂亚组(Prime&Bond NT,PB;Clearfil SE Bond,SE;Clearfil S3 Bond,S3;n=12)。在模拟髓腔压力下,3个亚组样本分别采用不同的粘接剂进行树脂充填,然后涂抹指甲油封闭样本,储存于模拟髓腔压力装置,24 h后测试剪切强度。结果:3种粘接剂在浅层和深层的粘接强度分别为:PB组(17.11±2.71)MPa和(11.13±3.60)MPa(P<0.05);SE(16.53±5.29)MPa和(14.78±4.53)MPa(P>0.05);S3(9.08±1.74)MPa和(8.43±1.41)MPa(P>0.05)。结论:在模拟髓腔压力条件下,不同深度牙本质对全酸蚀粘接剂的剪切强度有明显影响,对自酸蚀粘接剂的剪切强度无显著影响。
- 刘谨申陈文霞
- 关键词：牙本质粘接剂
- 齿垢密螺旋体精氨酸激酶TDE2037的原核表达与纯化
- 2017年
- 目的:构建齿垢密螺旋体TDE2037基因的原核表达质粒,表达及纯化TDE2037精氨酸激酶蛋白。方法:以齿垢密螺旋体基因组DNA为模板,PCR扩增TDE2037基因,PCR产物经限制性内切酶消化后,由T4 DNA连接酶连接原核表达载体pET-21a以及pET28a-SUMO,连接产物分别转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达目的蛋白,采用镍柱亲和层析法纯化目的蛋白,并使用分子排阻预装柱提高蛋白纯度。结果:成功构建TDE2037基因的原核表达质粒,经测序与基因库(Genbank)的TDE2037序列一致,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功诱导表达目的蛋白,融合蛋白由pET-21a-TDE2037表达形成包涵体;由pET28a-TDE2037-SUMO表达部分形成包涵体,部分为可溶蛋白。镍柱亲和层析法成功纯化目的蛋白。结论:成功构建齿垢密螺旋体TDE2037基因的原核表达质粒,并表达纯化了重组融合目的蛋白,为下一步研究奠定基础。
- 陈宇星周鹏唐路陈文霞
- 关键词：齿垢密螺旋体蛋白纯化精氨酸激酶
- 自体富血小板血浆凝胶析出液对骨髓间充质干细胞迁移影响的体外研究被引量：1
- 2014年
- 目的:观察富血小板血浆凝胶(PRG)析出液对骨髓间充质干细胞(BMSCs)迁移的影响。方法:全骨髓贴壁法体外培养犬BMSCs,二次离心法分离提取富血小板血浆并制备其凝胶析出液;将第3代BMSCs接种于Transwell小室,分别用含PRG析出液体积分数为0%(对照组)、1%、5%、10%、20%、50%的DMEM进行培养,观察5%PRG析出液作用不同时间(12、24、36 h)对BMSCs迁移活性的影响。结果:当培养液中含PRG析出液的浓度为1%、5%、10%、20%时,能明显促进BMSCs的迁移(P﹤0.05),而当PRG析出液浓度为50%时,则抑制BMSCs的迁移(P﹤0.05);5%PRG析出液促迁移作用最强,此后随PRG析出液浓度升高,促迁移作用越来越低,各浓度组间两两相比差异均有统计学意义(P<0.05);5%PRG析出液组作用于BMSCs 12、24、36 h均能明显促进BMSCs迁移(P<0.05),12 h组低于24 h和36 h组(P﹤0.05),24 h组与36 h组相比P﹥0.05。结论:含1%、5%、10%、20%PRG析出液的培养基均可明显促进BMSCs的迁移,在一定浓度范围内呈时间依赖性。
- 谢蔓菁陈文霞黄杨李康婧
- 关键词：骨髓间充质干细胞细胞迁移
