国家自然科学基金(39670096)
- 作品数：7 被引量：30H指数：3
- 相关作者：史小林翁静许晴曹金燕诸定寿更多>>
- 相关机构：首都医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 微囊化卵巢细胞植入卵巢摘除小鼠腹腔对胰岛α和β细胞生物活性的影响被引量：2
- 2007年
- 目的:观察微囊化卵巢细胞种植于去卵巢小鼠腹腔后对胰岛细胞生物活性的影响。方法:实验于2005-06/2006-09在首都医科大学生殖医学研究中心完成。将30只成年雌性ICR小鼠随机分为3组,正常对照组、卵巢摘除组和微囊种植组,每组10只。卵巢摘除组经背部切口取出双侧卵巢;微囊种植组于卵巢摘除同时,将微囊化卵巢细胞种植到腹腔内。正常对照组于饲养第10天,卵巢摘除组和微囊种植组于术后60d处死采血并取出胰腺组织。以放射免疫法测定各组实验动物血清中雌二醇的质量浓度。胰腺组织分别应用免疫组织化学法标记胰高血糖素、胰岛素、胰岛素受体α和胰岛素受体底物2。实验结果用图像分析仪进行吸光度值的测定。结果:30只小鼠均进入结果分析。①卵巢摘除组血清雌二醇的质量浓度低于正常对照组、微囊移植组,差异有非常显著性意义[分别为(1.089±0.885),(37.582±20.019),(35.766±13.313)ng/L,t=5.759,8.219,P<0.01],正常对照组与微囊种植组之间差异无显著性意义。②卵巢摘除组胰高血糖素、胰岛素的阳性产物(A)显著高于正常对照组,差异有显著性意义(分别为1.282±0.076,1.038±0.053;1.023±0.055,0.822±0.090,P<0.01),微囊种植组与正常对照组比较差异无显著性意义;卵巢摘除组胰岛素受体α和胰岛素受体底物2的阳性产物(A)显著低于正常对照组,差异有显著性意义(分别为0.929±0.142,1.099±0.098;0.891±0.118,1.135±0.069,P<0.01),微囊种植组与正常对照组比较差异无显著性意义。结论:在去除卵巢的同时进行了微囊化卵巢细胞的种植,可明显提高血清雌二醇的质量浓度,较有效地调节胰岛α细胞和β细胞的生物活性。
- 周金玲许晴金洁史小林
- 关键词：胰岛微囊激素替代疗法
- 大鼠胚胎卵巢异体异位移植的研究被引量：3
- 2000年
- 为了解胚胎卵巢异体异位移植后的存活和生长发育情况 ,将大鼠胚胎卵巢分别移植到去势雌鼠颈部皮下或肾被膜下 ,HE染色观察。移植后第 1 0天时移植物周围有结缔组织包裹 ,内有原始卵泡 ;移植后第 2 5天开始 ,移植物内可见大量发育卵泡及黄体与间质腺 ,移植卵巢中有丰富的血管。移植后平均 2 2天阴道上皮细胞出现周期性改变。细胞化学及免疫组织化学反应显示 :移植 3 5天后卵巢的卵泡膜内层细胞 3 -β羟甾脱氢酶呈阳性反应 ,卵巢血管内皮细胞碱性磷酸酶和 ATP酶为阳性 ;雌 ,孕激素及其受体反应强度与正常对照无明显差异。放射免疫法测定血清雌激素 ,孕激素 ,卵泡刺激素 (FSH)及黄体生成素 (L H)显示 ,移植 3 5天后 ,FSH和 L H的浓度接近正常。以上结果说明胚胎卵巢能在异体异位存活。
- 史小林曹金燕翁静许晴路欣诸定寿
- 关键词：胚胎卵巢移植
- 大鼠胚胎性腺异体异位埋植的研究
- 2001年
- 为探讨胚胎性腺(睾丸与卵巢)异体异位埋植后的生长发育和内分泌功能,将大鼠胚胎睾丸和卵巢分别移入摘除性腺的成年雄性和雌性大鼠颈部皮下和肾被膜下,埋植后分不同时间取出埋植物,常规染色观察埋植物在异体异位的生长发育。细胞化学和免疫组织化学法观察埋植物的功能状态,放射免疫法测定血清性激素浓度,结果显示埋植的胚胎性腺在异体可生长发育至成年状,3-β羟甾脱氢酶、性激素与性激素受体在睾丸与卵巢的内分泌细胞中呈阳性反应,血清促性腺激素和性激素在埋植后均有明显增加,由此证明胚胎性腺埋植到异体成年大鼠体内后可正常发育并具内分泌功能。
- 史小林曹金燕许晴路欣翁静
- 关键词：性腺生长发育内分泌功能
- 大鼠胚胎卵巢移植的形态与功能研究被引量：18
- 2000年
- 目的 明确胚胎卵巢移植后的生存 ,生长及功能恢复情况。方法 将大鼠胚胎卵巢移植入去势成年雌鼠颈部皮下及肾被膜下 ,分别于移植后 5、10、2 5～ 35、35d以上取移植卵巢进行组织学和组织化学研究 ,并测定血清雌、孕激素水平。结果 移植后第 5d移植物内有大量血细胞 ;第10d移植物内有大量原始卵泡及初级卵泡 ;第 2 5d及以后移植物内可见不同阶段的发育卵泡 ,并可见间质腺及黄体。受体在移植后第 2 3d左右阴道涂片出现动情周期。组织化学显示移植物 3 β 羟甾脱氢酶及油红O呈不同程度阳性反应 ,与正常卵巢阳性部位一致。血清学研究显示移植卵巢具有与正常卵巢接近的分泌雌、孕激素的能力。
- 曹金燕史小林诸定寿
- 海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊化大鼠卵巢细胞腹腔异体移植以及对肾上腺的影响被引量：1
- 2009年
- 背景:应用海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊技术包裹细胞进行异体移植,被证明是一种可避免受体产生免疫排异的有效方法。目的:观察海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊化卵巢细胞种植于去卵巢大鼠腹腔后对受体大鼠肾上腺的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-03/2008-09在首都医科大学生殖医学研究中心完成。材料:取Wistar大鼠卵巢分离培养卵巢细胞,进行微囊化处理,制备包裹卵巢细胞的海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊。方法:将40只雌性Wistar大鼠随机分为4组:去势组于无菌条件下切除双侧卵巢;微囊移植组手术摘除双侧卵巢后腹腔移植包裹卵巢细胞的海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊;雌激素替代治疗组手术摘除双侧卵巢后腹腔注射乙烯雌酚0.2mg/kg,每3d注射1次。正常对照组不进行任何处理。主要观察指标:干预后30d放射免疫法检测大鼠血清中雌激素水平,观察肾上腺切片的形态学特点,并利用免疫组织化学SP法检测各组大鼠肾上腺皮质各层增殖细胞核抗原表达变化。结果:①放射免疫法检测正常对照组,雌激素替代治疗组以及微囊移植组雌激素水平明显高于去势组,而正常对照组,微囊移植组,雌激素替代治疗组之间雌激素水平差异无显著性意义。②去势组肾上腺皮质网状带增厚,网状带与球束状带比值增大,束状带和网状带增殖细胞核抗原阳性表达都增加;而微囊移植组及雌激素替代治疗组增殖细胞核抗原阳性细胞明显低于去势组,差异具有显著性意义。结论:微囊化大鼠卵巢细胞异体移植后,可在受体大鼠体内继续合成和分泌雌二醇,所分泌的雌激素可以纠正肾上腺皮质因卵巢摘除而导致的形态改变,并与雌激素替代治疗疗效相近。
- 刘玲翁静许晴史小林
- 关键词：微囊卵巢细胞肾上腺
- 大鼠胚胎睾丸异体异位移植的研究被引量：2
- 2002年
- 目的 探讨胚胎睾丸异位移植到成年大鼠体内是否能生长发育 ,并具内分泌功能。方法 将胚胎睾丸分别移植至成年雄性Wistar大鼠颈部皮下和肾被膜下 (移植实验组 ) ,并设实验对照组 (摘除睾丸 )和正常对照组 ,移植实验组于移植后第 5d和 10d、2 5～ 35d和 35d以上取出移植物 ,同时断头取血 ,经离心取上清液。常规染色观察移植物的生长发育情况 ;细胞化学染色、免疫组织化学染色和放射免疫法检测移植物功能状态。结果 移植的胚胎睾丸在成年大鼠体内可生长发育至成年状 ;睾丸间质 3 β羟甾脱氢酶和油红O细胞化学染色呈阳性反应 ,睾丸间质细胞雄性激素及其受体、孕酮及其受体呈不同程度的阳性反应 ;血清睾酮、孕酮、卵泡刺激素和黄体生成激素接近正常值。结论 胚胎睾丸异位移植到成年大鼠体内后可正常发育 。
- 史小林路欣翁静许晴曹金燕诸定寿
- 关键词：胚胎睾丸
- 海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊化大鼠卵巢激素分泌细胞异体移植对垂体形态学的影响被引量：4
- 2008年
- 目的:已有研究证实海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊对机体无明显毒副作用且生物相容性好,应用这一技术包裹细胞,可明显延长异体内移植物的存活时间。将海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊化大鼠卵巢细胞体外培养后进行异体移植,观察其治疗卵巢功能丧失模型大鼠的可行性及垂体形态学变化。方法:实验于2006-03/2007-09在首都医科大学生殖医学研究中心完成。①实验动物:30只Wistar雌性大鼠,随机分为正常对照组,卵巢摘除组,微囊移植组,每组10只。实验过程中对动物处置符合动物伦理学要求。②实验方法:卵巢摘除组:无菌条件下切除双侧卵巢;微囊移植组:海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠生物膜包裹传至P2代的大鼠卵巢细胞,制成微囊体外培养,收集24h培养液以检测雌二醇分泌状态;将微囊化的卵巢细胞移植入已行双侧卵巢切除术的大鼠腹腔。用阴道涂片观察大鼠动情周期恢复情况。术后40d麻醉后处死动物,放射免疫法检测血清雌二醇质量浓度,垂体组织常规石蜡包埋,连续切片,分别进行苏木精-伊红染色和雌、孕激素受体免疫组织化学染色。LEICAQ500IW自动图像分析仪对垂体细胞的面积,雌、孕激素受体吸光度值进行定量测定。结果:①放射免疫法检测培养液显示,微囊化的卵巢激素分泌细胞具有继续合成和分泌雌二醇的功能。②检测血清中雌二醇质量浓度结果显示,卵巢摘除组明显低于正常对照组和微囊移植组,差异具有显著性意义,正常对照组和微囊移植组之间差异无显著性。③动情周期未恢复。④苏木精-伊红染色可见卵巢摘除组大鼠垂体中有大量阉割细胞,平均面积>180μm2,与卵巢摘除组比较,微囊移植组大鼠垂体中细胞平均面积和阉割细胞数目均显著减少。⑤垂体雌、孕激素受体免疫组织化学吸光度值结果显示,卵巢摘除组明显低于正常对照组和�
- 吴桐翁静刘玲史小林
- 关键词：微囊卵巢
