国家自然科学基金(30960420)
- 作品数：9 被引量：8H指数：2
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- NBS1在大鼠唾液腺放射损伤中的表达变化及意义被引量：2
- 2012年
- 目的探讨大鼠γ射线照射后唾液腺组织NBS1基因和蛋白的表达，及其在唾液腺上皮细胞放射性损伤修复中的调控作用。方法将80只大鼠按随机数字表法均分为健康对照组和照射组，各40只。照射组大鼠以 ^60Coγ 射线分次照射，每次3Gy，隔天1次，共5次，累积剂量为3、6、9、12和15Gy。应用电镜观察唾液腺细胞超微结构变化。用免疫组织化学技术（IHC）和反转录聚合酶链技术（RT-PCR）分别检测照射后2-4h的腮腺、颌下腺NBS1mRNA和蛋白的表达情况。结果照射组腮腺组织萎缩和损伤程度重于颌下腺。腮腺组织吸收剂量为9．12和15Gy时、颌下腺组织吸收剂量为9和12Gy时，NBS1mRNA表达水平明显降低（t=7．10、17．93、20．86，P〈0．05；t=3．13和7．53，P〈0．05）。照射组腮腺浆液细胞吸收剂量为9．12和15Gy时、导管上皮细胞剂量为12和15Gy时，差异有统计学意义（t=4．29、17．91、91．29，P〈0．05；t=3．09和5．62，P〈0．05）。颌下腺浆液细胞在12Gy时，NBS1蛋白表达明显减少（t=4．61和11．84，P〈0．05）。颌下腺导管上皮细胞及黏液细胞其NBS1蛋白表达在整个照射过程中未见明显变化。结论 γ射线照射后大鼠唾液腺组织NBS1mRNA和蛋白水平均出现下降，推测NBS1可能参与唾液腺放射损伤和修复的过程。
- 林丹王代友杨亦萍卿海云曹阳陈超梅沈洁欧健波
- 关键词：唾液腺上皮细胞
- NBS1在口腔鳞癌组织中的表达及意义被引量：1
- 2012年
- 目的:检测口腔鳞癌组织(OSCC)中NBS1的表达水平,探讨其与OSCC病理分化级别的相关性以及在肿瘤发生发展中的作用。方法:①采用免疫组化(SP法)检测NBS1蛋白在30例口腔鳞癌组织、9例癌旁组织中的表达。②应用RT-PCR技术检测组织中NBS1的mRNA表达水平。结果:在OSCC与癌旁正常组织中,NBS1 mRNA和蛋白表达差异显著,在口腔癌组织中均表达较高,并随着病理级别增高而增高(P<0.05)。结论:NBS1在不同病理分化程度OSCC中表达水平的差别与多种因素密切相关,与肿瘤的恶性生物学行为有关,其表达水平可成为判断口腔鳞癌侵袭转移和预后的指标之一。
- 欧剑波王代友麦华明曹阳杨亦萍卿海云谢诚
- 关键词：口腔鳞癌免疫组织化学
- 大鼠唾液腺细胞体外原代培养的一种新方法
- 2014年
- 目的：建立大鼠唾液腺上皮细胞体外原代培养模型,为体外研究唾液腺疾病提供种子细胞。方法 ：在无菌条件下取出生1～2 d的Wistar大鼠腮腺组织,手术显微镜下去除腺体包膜,以无血清培养基（kerotinocyte-SFM）为培养液,并添加表皮生长因子（rat epidermal growth factor,r EGF）、牛垂体提取物（bovine pituitary extract,BPE）、氢化可的松（hydrocortisone,HC）、转铁蛋白（transferrin,Tf）、胰岛素（insulin,INS）等因子,应用组织块培养法进行培养。用倒置相差显微镜观察培养细胞体外生长的形态特征。用H-E染色及细胞角蛋白、波形蛋白免疫组织化学染色对培养的细胞进行形态学检查和鉴定。结果：培养的腮腺上皮细胞为三角形、多边形、圆形、短梭形,细胞单层生长,连接疏松。H-E染色可见细胞多为圆形,核蓝染,细胞有突起、细胞间桥。细胞角蛋白染色阳性,证实所培养细胞为上皮来源;Vimentin、actin和calponin染色细胞大部分呈阳性,进一步确定细胞主要为肌上皮细胞。原代细胞在3～5 d内保持良好的生长状态,并存活1周左右。结论：组织块培养法可以简捷、快速地获得大鼠腮腺上皮细胞,成功建立Wistar大鼠腮腺上皮细胞的体外模型。
- 韦毅王代友成梦苏曰松
- 关键词：唾液腺原代培养组织块培养法
- ^(60)Coγ射线照射大鼠涎腺组织后Mrell蛋白表达的初步研究被引量：2
- 2012年
- 目的:检测Mre11基因及其蛋白在放疗后的大鼠腮腺和颌下腺组织中的表达变化。方法:选取近交系雄性Wistar大鼠60只,按单次照射0 Gy,3 Gy、6 Gy、9 Gy、12 Gy、15 Gy剂量分成6组,用60Coγ射线照射大鼠头颈部,2h后收集大鼠两侧腮腺和颌下腺组织。用透射电镜观察涎腺上皮细胞超微结构变化;用RT-PCR检测Mre11的基因表达情况;用免疫组化检测Mre11蛋白表达情况。结果:透射电镜显示:放射后大鼠腮腺腺泡细胞胞质和胞膜均出现不同程度的损坏,随着剂量的增加,这种损坏逐渐加剧,未见到再生、恢复的变化。颌下腺和导管变化不明显。RT-PCR检测Mre11mRNA表达无统计学差异。免疫组化检测Mre11蛋白表达有统计学差异。结论:治疗剂量的60Coγ照射对正常涎腺组织呈不可逆的损伤,损伤的程度具有剂量依赖性;大鼠涎腺细胞Mre11mRNA的表达无剂量依赖性;大鼠涎腺细胞Mre11蛋白的表达与辐射剂量以及组织类型有关,随剂量的增加先增强后减弱。
- 沈洁王代友曹阳林丹陈超梅
- 关键词：DNA双链断裂
- 大鼠涎腺放射损伤模型的建立及NBS1的表达变化
- 2011年
- 目的:研究大鼠涎腺放射损伤模型中NBS1基因的表达,初步探讨其在放射性涎腺上皮细胞损伤修复中的调控作用。方法:放射组40只大鼠以60Coγ射线分次照射,每次3GY,隔天1次,共5次,累积剂量分别为3、6、9、12、15 GY,对照组40只大鼠同期进行麻醉。照射后2～4 h,收集大鼠腮腺,颌下腺。应用苏木素-伊红染色(HE)和透射电镜观察涎腺组织的显微和超微结构变化;应用逆转录聚合酶链技术(RT-PCR)检测腮腺、颌下腺NBS1mRNA的表达情况。结果:腮腺较颌下腺组织损伤严重;放射组和正常组比较,腮腺放射剂量9 GY组起,颌下腺于12 GY组起,NBS1mRNA表达水平减少(P<0.05)。结论:大鼠涎腺放射损伤模型建立成功,NBS1可能参与涎腺放射损伤修复。
- 林丹王代友杨亦萍卿海云曹阳陈超梅沈洁欧健波
- Rad50在放射后大鼠涎腺中的表达被引量：2
- 2012年
- 目的:检测Rad50在放射后大鼠涎腺组织中的表达水平。方法:选用60只Wistar大白鼠,随机分成6组,每组10只。分为对照组(未照射)、3 Gy组、6 Gy组、9 Gy组、12 Gy组、15 Gy组。放射组大白鼠用60Co一次性照射后2 h内处死,立即取出其腮腺、下颌下腺组织备用。用电镜观察放射后各组涎腺组织超微结构的变化,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Rad50基因表达水平的变化,用免疫组织化学法观察其蛋白表达水平的变化。结果:各放射组涎腺组织中Rad50的表达均高于对照组(P<0.05),但不同放射剂量的各放射组之间Rad50的表达无明显差异(P>0.05)。透射电镜下可见大鼠腮腺、下颌下腺细胞超微结构随着放射剂量的增加,发生较明显改变。结论:放射可引起涎腺组织Rad50表达水平增高,但其表达水平并未随放射剂量的增加而增高,提示Rad50在涎腺放射损伤修复中的表达水平有限,这可能是涎腺放射敏感性机制之一。
- 陈超梅王代友林丹沈洁陆新萍
- 关键词：腮腺下颌下腺
- 不同剂量放射线对大鼠涎腺Rad 50表达的影响
- 2012年
- 目的:研究不同剂量放射线对大鼠涎腺Rad 50表达的影响。方法:将36只雄性Wistar大鼠,随机分成6组:分为对照组(未放射),实验组为3 Gy组、6 Gy组、9 Gy组、12 Gy组、15 Gy组。实验组用Co60一次性放射后,2 h内处死大鼠。免疫组织化学法了解Rad 50在大鼠腮腺、颌下腺表达水平和定位。结果:Rad 50在大鼠腮腺中主要表达于导管系统和浆液性腺泡,在颌下腺浆液性腺泡中也有表达,在导管和黏液性腺泡中弱表达。大鼠浆液性腺泡中15 Gy组与对照组相比表达减少,差异有统计学意义(P<0.05),其余各放射组与对照组涎腺组织中的Rad 50表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Rad 50表达水平和定位在大鼠腮腺和颌下腺中有些差异,可能参与了涎腺放射敏感性的机制。
- 陈超梅王代友杨亦萍卿海云曹阳林丹沈洁尹恒山
- 关键词：RAD腮腺颌下腺
- ^(60)COγ射线照射大鼠涎腺组织后对Rad50蛋白表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:初步研究不同剂量60COγ射线照射大鼠涎腺组织后Rad50蛋白的表达变化情况。方法:选取Wistar大鼠60只,随机分成6组:可分为对照组(0Gy组),3、6、9、12、15Gy组,每组10只。用60COγ射线一次性照射大鼠的头颈部后,2h内处死大鼠,并收集大鼠腮腺及颌下腺组织。使用免疫印迹法检测Rad50蛋白在大鼠腮腺、颌下腺的表达情况。结果:放射后大鼠的腮腺及颌下腺组织中的Rad50蛋白的表达量随着放射剂量的不同而变化,并且分别在9Gy及12Gy时达到最高。结论:Rad50蛋白的表达量受放射剂量和组织类型的影响,可能参与了涎腺放射损伤修复的机制。
- 尹恒山王代友陈超梅麦华明
- 关键词：免疫印迹涎腺组织
- ^(60)Coγ射线照射后大鼠涎腺中Mre11蛋白的表达与细胞凋亡的初步观察被引量：2
- 2014年
- 目的:观察60Coγ射线照射对大鼠腮腺和下颌下腺Mre11蛋白表达及细胞凋亡的影响。方法:取近交系Wistar成年大鼠60只,分为正常对照组(10只)及放射组(50只),放射组用60Coγ射线照射大鼠头颈部,总吸收剂量为15 Gy,每次照射3Gy,1次/d。照射3、6、9、12、15 Gy后2 h分别随机处死10只大鼠,用Western blotting法检测Mre11蛋白的表达;TUNEL法检测照射后细胞凋亡情况。结果:照射后唾液腺组织中Mre11蛋白的表达水平和细胞凋亡率均随放射剂量的增大而增高,Mre11蛋白的表达水平在腮腺照射9 Gy后和下颌下腺照射6 Gy后到达最大值,细胞凋亡率在腮腺照射9 Gy后和下颌下腺照射12Gy后到达最大值,之后开始逐渐减小,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:治疗量60Coγ射线照射后大鼠唾液腺组织中Mre11蛋白的表达水平和细胞凋亡率与放射剂量及唾液腺类型有关。
- 谢诚王代友麦华明曹阳杨亦萍卿海云欧剑波
- 关键词：DNA双链断裂
