国家杰出青年科学基金(30225044)
- 作品数：14 被引量：264H指数：8
- 相关作者：刘祖国张梅肖启国罗丽辉陈家祺更多>>
- 相关机构：中山大学厦门大学广州市儿童医院更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 干眼模型的建立方法及评价被引量：26
- 2004年
- 干眼是一类非常常见的眼表疾病 ,理想的干眼模型对于干眼的研究具有重要的价值。目前 ,已有多种建立干眼动物模型的方法 ,如通过药物作用、改变动物性激素分泌水平、去除泪腺或眼表的神经支配、诱导泪腺产生自身免疫反应、手术摘除泪腺及手术封闭睑板腺开口等均可制作出干眼模型。这些干眼模型归纳起来主要有泪液缺乏型干眼及蒸发过强型干眼两大类型。常用于制作干眼模型的动物主要有兔、狗及鼠等 ,此外 ,还有使用猫、恒河猴、貂及马等制作干眼模型的报道。对几种常见的干眼模型的制作方法及其优缺点作一简要的综述。
- 肖启国刘祖国
- 关键词：干眼动物模型眼表疾病
- 角膜移植治疗Terrien边缘角膜变性被引量：2
- 2008年
- 目的探讨角膜移植治疗Terrien边缘角膜变性的临床效果与安全性。方法采用非随机回顾性系列病例研究。分析1995年1月至2004年12月期间在中山大学中山眼科中心行病灶切除联合角膜移植手术治疗的40例（48只眼）Terrien边缘角膜变性患者的临床资料，对其中9只眼进行手术前后的散瞳检影验光检查，对7只眼进行手术前后OrbscanⅡ角膜地形图检查。结果患者年龄（30±6）岁，术后随访时间为（7±6）年。手术前、后各参数采用（Q25，Q75）表示。息眼手术前裸眼视力为（0．05，0．4），最佳矫正视力为（0．1，0．5），手术后裸眼视力为（0．2，0．6），最佳矫正视力为（0．4，0．7）（Z=4．63，3．85；P均〈0．01）。息眼验光球镜度数的术前值为（-2．00D，-8．50D），术后值为（-1．25D，-4．75D）（Z=2．49，P=0．01）；柱镜度数的术前值为（2．50D，12．00D），术后值为（0．75D，4．25D）（Z=2．54，P=0．01）。术后OrbscanⅡ角膜地形图模拟角膜曲率、角膜散光度数、角膜直径3mm与5mm处的散光度数和屈光力度数均较术前有所下降，除角膜直径5mm处的散光度数改善外（Z=1．86，P=0．06），其余指标的改善差异均有统计学意义（P〈0．05）。手术并发症包括术中植床穿孔5只眼（10．4％）、术后角膜层间积液8只眼（16．7％）、角膜层间上皮植入4只眼（8．3％）、脉络膜脱离1只眼（2．1％）、术后植片排斥反应7只眼（14．6％）、复发3只眼（6．3％）。5只眼（10．4％）分别因层间积液、层间上皮植入及复发行二次手术治疗。结论病灶切除联合角膜移植是Terrien边缘角膜变性的优选治疗手段之一，可有效地保存或提高患眼视力。
- 梁凌毅刘祖国陈家祺黄挺王智崇邹文进陈龙山周世有林爱华
- 关键词：角膜疾病角膜基质角膜移植预后
- 局部滴用阿托品建立兔干眼模型的评价被引量：19
- 2005年
- 目的评价滴用阿托品建立兔干眼模型的优劣。方法新西兰大白兔16只,随机选1眼滴用1%硫酸阿托品滴眼液,对侧眼作对照。用药前及用药后不同时间点对实验组及对照组行Schirmer试验、结膜角膜虎红染色、角膜荧光素染色、结膜印迹细胞检查。第35d取结膜、角膜及泪腺组织行光学显微镜检查,泪腺组织同时行电镜检查并采用酶标仪检测其中的乙酰胆碱浓度。结果滴用阿托品后第1d,实验组Schirmer试验值下降,荧光素染色及虎红染色积分上升(P<0·05),至用药后第1周表现最明显,之后逐渐减轻。用药前后杯状细胞密度未出现差异(P>0·05)。滴药后第35d,实验组结膜、角膜、泪腺组织光镜及电镜检查未见异常,泪腺中乙酰胆碱浓度[(18·99±9·79)μmol/mg]比对照组明显增高[(13·10±7·34)μmol/mg](P=0·0318)。结论滴用阿托品可以使兔很快出现干眼,但随时间延长而减轻,因而这种干眼模型不够理想。
- 肖启国刘祖国张梅张志红罗丽辉姚勇蒋爱华林健贤
- 关键词：阿托品干眼动物模型
- 角膜碱烧伤后VEGF与新生血管渗漏性的相关性实验研究被引量：7
- 2009年
- 目的研究大鼠角膜碱烧伤后新生血管渗透率的变化并探讨血管内皮细胞生长常大鼠角膜作为对照。结果正常及碱烧伤后1d、2d、3d、5d、7d、10d大鼠角膜新生血管渗透率依次为0mg.L-1.mm-2,(1.14±0.17)mg.L-1.mm-2,(0.24±0.08)mg.L-1.mm-2,(0.29±0.16)mg.L-1.mm-2,(0.14±0.10)mg.L-1.mm-2,(0.09±0.06)mg.L-1.mm-2和(0.05±0.04)mg.L-1.mm-2;角膜组织中VEGF-RNA水平依次为(1.09±0.31)×106拷贝.μg-1总RNA,(7.01±1.99)×106拷贝.μg-1总RNA,(1.01±0.59)×106拷贝.μg-1总RNA,(2.43±0.43)×106拷贝.μg-1总RNA,(0.99±1.31)×106拷贝.μg-1总RNA,(0.95±0.03)×106拷贝.μg-1总RNA和(0.17±0.15)×106拷贝.μg-1总RNA,其中7d和10d的VEGF-RNA低于正常水平(P7=0.011,P10=0.006)。经Pearson相关分析,新生血管渗透率和VEGF-RNA水平呈正相关改变(r=0.866,P<0.01)。结论VEGF在新生血管渗漏的调节机制中起着重要作用;大鼠角膜碱烧伤后期,新生血管渗漏性增高难以应用VEGF机制进行解释的现象,提示可能存在其他的新生血管渗漏调节机制。
- 赵伟蒋爱华刘祖国
- 关键词：血管内皮细胞生长因子新生血管渗漏性
- 应用蛋白质L检测和纯化培养上清液中的单链抗体被引量：2
- 2004年
- 目的 探索一种检测和纯化单链抗体的新方法。方法 使用不同的酶标记物 ,观察ELISA法检测培养上清液中单链抗体的相对灵敏度。含单链抗体的培养上清液经超滤、313g L饱和硫酸铵沉淀及蛋白质L 琼脂糖亲和层析纯化单链抗体。结果 HRP标记蛋白质L可检测到 1∶16孔的阳性结果 ,而HRP标记蛋白质A仅检测到 1∶2孔的阳性结果。用 9E10单抗检测培养上清液中的单链抗体时 ,除加入未经稀释培养上清液孔略有显色外 ,其他加入稀释后的培养上清液孔均不显色。蛋白质L亲和层析纯化的单链抗体经SDS PAGE及ELISA鉴定 ,所得到的单链抗体纯度高、活性保持良好。结论 蛋白质L是一种能灵敏检测和有效纯化单链抗体的结合物 ,本实验建立的方法是一种有效。
- 李民友虞东方张海涛冯哲玲李秀英刘祖国朱振宇
- 关键词：单链抗体培养上清液纯化
- 多西环素对培养的人结膜上皮细胞炎性反应及凋亡的影响被引量：7
- 2005年
- 目的探讨多西环素对体外培养的人结膜上皮细胞细胞黏附分子1(ICAM1,CD54)、人类白细胞抗原DR(HLADR)、白细胞介素1β(IL1β)表达及凋亡的影响。方法混合消化液培养法培养人结膜上皮细胞,免疫组织化学方法进行细胞鉴定。培养至第3代或第4代,在细胞培养液中分别加入γ干扰素(IFNγ)0U/ml、IFNγ300U/ml、IFNγ300U/ml+多西环素10μg/ml、IFNγ300U/ml+多西环素20μg/ml、IFNγ300U/ml+多西环素40μg/ml、IFNγ300U/ml+地塞米松100μg/ml,24h后收集细胞,流式细胞学检测CD54、HLADR及IL1β的表达,Westernblot检测CD54的表达。72h后收集细胞,碘化丙啶(PI)染色,流式细胞学检测凋亡。结果培养的正常人结膜上皮细胞可以表达少许CD54和IL1β,加入IFNγ后表达明显增加,加入多西环素和地塞米松后CD54和IL1β的表达下降(P<0.01)。随着所加多西环素浓度的增加,CD54和IL1β的表达逐渐降低(P<0.01)。培养的正常人结膜上皮细胞未发现明显的HLADR的表达及凋亡的产生,加入IFNγ及多西环素后HLADR的表达及凋亡水平无明显变化(P>0.05)。结论多西环素可抑制培养的正常人结膜上皮细胞CD54和IL1β等炎性相关因子的产生,提示多西环素对干眼等非感染性眼表炎性疾病的治疗可能具有一定的应用前景。
- 肖启国刘祖国张梅郑健樑张志红罗丽辉陈家祺
- 关键词：多西环素细胞培养结膜上皮细胞炎性反应
- 正常人角膜神经的共焦显微镜观察被引量：24
- 2004年
- 张梅刘祖国陈家祺罗丽辉孙明霞陈龙山黄挺王智崇
- 关键词：角膜上皮正常人共焦显微镜检查感觉神经
- 过敏性结膜炎的临床特点被引量：94
- 2004年
- 目的 了解各种类型过敏性结膜炎的临床特点。方法 多中心前瞻性研究评价 2 41例过敏性结膜炎患者的病史 ,症状 ,体征等临床评分资料。结果 2 41例过敏性结膜炎中 ,各种亚型分布无明显地区差异 ( χ2 =2 6 699,P =0 14 4,P >0 0 5 )。眼痒和异物感在过敏性结膜炎的症状中发生率最高 (发生率分别为 99%、 80 8% )。结膜充血、上睑结膜乳头和上睑结膜滤泡在过敏性结膜炎的体征中发生率最高 (发生率分别为 93 7%、 88 1%、 78 4% )。季节性过敏性结膜炎 (seasonalaller gicconjunctivitis ,SAC)除季节性发作及症状、体征积分均相对较低外 ,其他临床特点与常年性过敏性结膜炎 ( perennialallergicconjunctivitis ,PAC)十分相似。春季角结膜炎 (vernalkeratoconjunctivitis ,VKC)发病年龄最小 ,伴有典型的上睑结膜乳头改变和高的角膜缘改变发生率 ( 76 7% )。 60 %巨乳头性结膜炎 (giantpapillaryconjunctivitis ,GPC)患者有软性角膜接触镜的配戴史 ,这和其他亚型比较差异有显著性意义 ( χ2 =2 7 689,P =0 0 0 0 ,P <0 0 0 1)。季节性过敏性结膜炎 ,常年性过敏性结膜炎眼痒、异物感两个症状均分别与上、下睑结膜乳头和滤泡相关 (均P <0 0 0 1,r介于 0 2 5～ 0 3 5之间 ) ;春季角结膜炎异物感与?
- 刘祖国姚勇孙秉基孙兴怀谢汉平王红万修华崔敏陈龙山张梅
- 关键词：过敏性结膜炎体征异物感乳头发生率
- 大鼠角膜层间植入微粒体诱导新生血管模型的研究(英文)
- 2008年
- 目的:探讨大鼠角膜层间植入微粒体诱导新生血管模型的制作技巧和特点。方法:9只SD大鼠手术显微镜下做角膜基质微囊袋并植入含有VEGF的缓释微粒体。术后1、3、5、7d采用裂隙灯显微镜观察角膜新生血管的生长情况。结果:大鼠角膜微囊袋内植入微粒体后1d仅见角膜缘血管网充血扩张,未见新生血管生长;3d可见毛刷状新生血管自角膜缘伸入角膜,面积为(2.23±0.59)mm2;5d新生血管垂直于角膜缘向微粒体方向束状延伸,并达到微粒体下缘部位,面积为(6.81±1.35)mm2;7d新生血管继续向前生长,达到并超过微粒体下缘,部分新生血管顶端互相吻合成袢状,面积为(8.92±1.79)mm2。其中,5d和7d新生血管面积比较无显著性差异。所有术眼均未见前房积血、角膜溃疡、微粒体脱出等并发症。结论:大鼠角膜层间植入微粒体诱导的新生血管生长稳定、无并发症、适用于定量研究。
- 赵伟蒋爱华刘祖国
- 关键词：新生血管血管内皮细胞生长因子
- Reis-Bücklers角膜营养不良患者TGFBI基因突变被引量：17
- 2005年
- 目的 探讨中国Reis Bücklers角膜营养不良患者的TGFBI基因的突变特征及其与临床表现的关系。方法 对于彼此无亲缘关系的两家系 10例患者及其家族中 2名正常成员进行基因分析。采取外周血 10ml,制备外周血白细胞基因组DNA,应用合成的特异性引物,聚合酶链反应(PCR)分别扩增TGFBI基因的第 4、12外显子,将基因产物进行直接测序,分析相应基因序列。结果两家系均呈现常染色体显性遗传。临床上表现为角膜上皮下及前弹力膜中细小的颗粒状混浊,随年龄增长而逐渐融合、扩大呈地图样外观,符合Reis Bücklers角膜营养不良地图型的诊断。基因序列分析呈现TGFBI基因第 124密码子第二个碱基G→T碱基点突变,导致精氨酸转变为亮氨酸(R124L)。结论 中国Reis Bücklers角膜营养不良患者两家系均呈现R124L基因突变,表现为Reis Bücklers角膜营养不良地图型改变。基因分析将为疾病的确诊提供可靠依据。
- 田欣刘祖国李勤李冰王薇谢培英藤木庆子村上晶金井淳
- 关键词：角膜营养不良家系基因突变基因分析年龄增长
