甘肃省科技厅中小企业创新基金(0802NCCA028)
- 作品数：10 被引量：89H指数：6
- 相关作者：韩跃武刘箐刘雅莉熊亮斌高丽萍更多>>
- 相关机构：兰州大学甘肃农业大学甘肃出入境检验检疫局中心实验室更多>>
- 发文基金：甘肃省科技厅中小企业创新基金国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- Nested-PCR检测种传番茄细菌性溃疡病菌被引量：6
- 2011年
- 利用番茄溃疡病菌特异性引物对纯菌液、模拟带菌种子及自然感染种子提取液分别进行Direct-PCR和Nested-PCR检测。结果在纯菌液中,Direct-PCR的检测灵敏度为105cfu/mL,Nested-PCR为102cfu/mL;在模拟带菌种子提取液中,Direct-PCR的检测灵敏度为107cfu/mL,Nested-PCR为104cfu/mL;在自然感染种子提取液中,稀释104倍后Nested-PCR仍然可以检出。建立的番茄种子Nested-PCR检测技术,无需经过核酸提取步骤,可以在8 h内完成整个检测过程,方便快捷,成本低廉,可作为番茄种子带菌的常规检测方法。
- 闵现华刘箐韩跃武文朝慧王军平刘姝彤刘雅莉宋蕤施颖波
- 关键词：番茄溃疡病番茄种子NESTED-PCR
- 应用蛋白宏阵列快速检测西瓜细菌性果斑病菌被引量：6
- 2011年
- 蛋白阵列（Protein array）也叫蛋白芯片,是生物芯片（Biochip）的一种,主要利用抗原/抗体可特异性结合原理制备而成。按阵列样点大小,蛋白阵列又可分为微阵列（Microarray）和宏阵列（Mac-roarray）两类。
- 熊亮斌高丽萍刘箐夏俊芳黄超杰王天昌
- 关键词：蛋白芯片微阵列细菌性病菌西瓜
- 蛋白质芯片技术及其在医学诊断中的应用被引量：2
- 2011年
- 在蛋白质组学研究中,由于基因转录、翻译后合成的大部分多肽链经加工修饰后才具有生物学活性,仅凭基因转录水平并不能准确反映和预测蛋白质表达量,需通过直接研究目标蛋白质,并配合相应mRNA转录水平,才能全面获取特定蛋白质的生物信息。
- 熊亮斌刘箐高丽萍刘姝彤宋蕤施颖波王军平文朝慧
- 关键词：蛋白质芯片蛋白质微阵列
- 单克隆抗体制备技术的最新进展及应用前景被引量：48
- 2011年
- 单克隆抗体技术是现代生命科学研究的重要工具,其在基因和蛋白质的结构与功能研究方面有着不可或缺的作用,在人类和动植物的免疫学诊断方面至今仍有着无可代替的重要作用。本文综述了单克隆抗体的制备技术,包括嵌合抗体、噬菌体展示技术、核糖体展示技术、基因工程抗体等,及其在临床医学和疾病的诊断与治疗等领域的广阔应用前景。
- 孔君刘箐韩跃武王天昌刘金芝
- 关键词：单克隆抗体
- 微量病原检测技术研究进展被引量：6
- 2010年
- 微量病原由于其浓度很低,达不到常规检测技术的检测灵敏度,导致不可避免的漏检。近年来,新发展起来了一些专门针对微量病原的灵敏、特异、快速的检测技术,包括PCR-ELISA、PCR-MPH、IC-PCR、IM-PCR、IMS-ELISA、IMS-PCR、HC-PCR-MPH、HC-realtimePCR、RCA、LAMP等均可不同程度的解决以上问题。
- 刘雅莉刘箐韩舜愈
- 关键词：敏感性滚环扩增环介导等温扩增
- 种传番茄溃疡病菌直接PCR和免疫捕捉PCR检测方法之比较被引量：9
- 2010年
- 用PBS和种子研磨后的普通病原提取液稀释番茄溃疡病菌纯菌液,并以梯度纯菌液和带菌种子提取液作为模板进行直接PCR和免疫捕捉PCR,比较2种方法在纯菌液和带菌种子提取液中的检测灵敏度,找到一种高特异性、高灵敏度、简便快捷的方法用于检测番茄种子携带的番茄溃疡病菌。结果显示在纯菌液中直接PCR灵敏度为104cfu/mL,免疫捕捉PCR为102cfu/mL;在带菌种子提取液中直接PCR灵敏度为106cfu/mL,免疫捕捉PCR为104cfu/mL;免疫捕捉PCR比直接PCR灵敏度高100倍,尤其在实际种子检测中优势更明显,而且检出时间短,重复性好。
- 闵现华韩跃武刘箐王军平刘雅莉文朝慧刘姝彤宋蕤施颖波
- 关键词：番茄溃疡病番茄种子
- 改良DAS-Dot-ELISA检测西瓜细菌性果斑病菌被引量：9
- 2010年
- 以硝酸纤维素膜为载体,对Dot-ELISA法的封闭条件、包被抗体浓度、点样量等反应条件进行优化,建立改良DAS-Dot-ELISA法快速检测西瓜细菌性果斑病菌。研究发现,以含乙二胺四乙酸二钠(EDTA)的脱脂奶粉液高温处理后用于封闭,可有效降低背景;轻微振荡可提高杂交效率,减少非特异性结合。改良DAS-Dot-ELISA可快速、经济的检测西瓜果斑病菌,灵敏度达1.9×105CFU/mL。在对两批次种子样品的检测中,改良DAS-Dot-ELISA法检测带菌率分别为8.0%和6.0%,与微孔板ELISA结果完全一致;对每粒种子的检测结果,改良DAS-Dot-ELISA法与微孔板ELISA吻合率平均达99.0%,显示较好的实用前景,同时为快速检测西瓜果斑病菌提供一种新途径。
- 熊亮斌刘箐王天昌高丽萍王婧刘姝彤宋蕤施颖波王军平文朝慧
- 关键词：西瓜细菌性果斑病菌硝酸纤维素膜
- 生物芯片应用概述被引量：12
- 2010年
- 生物芯片技术作为新一代生物技术,以其高通量并行分析的优势引起国内外广泛的关注及重视,在各个领域得到广泛的应用,就生物芯片在科学研究、疾病诊断、预防医学、新药开发、司法鉴定、食品安全检测、环境监测、农林科学及军事科学等领域中的应用做简单介绍。
- 夏俊芳刘箐
- 关键词：生物芯片基因芯片蛋白芯片芯片实验室
- 番茄溃疡病菌单克隆抗体的制备与鉴定
- 2011年
- 为制备并鉴定番茄溃疡病菌(Clavibacter michiganensis subsp.michiganensis,Cmm)的单克隆抗体(McAbs),用全菌皮下免疫BALB/C小鼠,采用B细胞杂交瘤技术,经免疫、融合、间接ELISA筛选和克隆等,获得稳定分泌抗体的阳性杂交瘤细胞株,得到了抗番茄溃疡病菌的单克隆抗体。经免疫后获得3株单抗分别为1A4、1C3和1B7,经亚类鉴定分别是IgM、IgG1、IgG1;纯化腹水间接ELISA效价分别为1:3.2×106、1:8.1×105、1:3.2×106;与其他同属不同亚种无交叉反应。结果表明:3株单克隆抗体均具有较高特异性和敏感性,可作为番茄溃疡病菌的检测抗体,其中,1A4的效果最好。番茄溃疡病菌单克隆抗体的获得为进一步研发番茄溃疡病检测试剂盒奠定了基础。
- 孔君刘箐韩跃武刘金芝朱小清席国雄
- 关键词：单克隆抗体番茄溃疡病菌ELISA
- 微量病原富集技术研究进展
- 2010年
- 闵现华韩跃武刘箐
