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短发夹状RNA干扰bcl-2后诱导人晶状体上皮细胞凋亡的实验研究被引量：2: 2009年; 目的应用RNA干扰技术抑制人晶状体上皮细胞（HLEC）bcl-2基因表达，观察诱导其细胞凋亡情况，为防治晶状体后囊膜混浊提供新的策略。方法实验研究。设计2条以bcl-2基因为靶标的短发夹RNA（shRNA），克隆入质粒PGCsi表达载体，分别命名为P1、P2，经脂质体转染入永生性HLEC系SRAO1／O4，48h后检测转染效率和bcl-2的基因及蛋白表达情况，并检测HLEC的细胞凋亡情况。多组间及组间计数资料的比较，采用随机区组设计的方差分析。结果重组质粒经自动基因测序仪测序，证实构建成功。转染后48h，流式细胞仪测得P1、P2转染率为44．1％、47．2％。免疫印迹法测得P1、P2组的bcl-2蛋白表达较对照组降低，实时荧光定量聚合酶链反应法测得P1、P2组的bcl-2mRNA相对表达量为0．435、0．476，较对照组降低（F=1672．4，P〈0．05），流式细胞仪双染法测得P1、P2组HLEC的细胞凋亡率分别为42．3％、45．4％，较对照组增加（F=1756．2，P〈0．05），并且活化型caspase-3蛋白的表达增加。结论P1、P2可抑制HLEC的bcl-2基因表达，并诱导HLEC凋亡.; 吴新华卢奕方艳文蒋永祥田洁; 关键词：RNA干扰上皮细胞 BCL-2 细胞凋亡

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上海市自然科学基金(04119659)