国家自然科学基金(81171883)
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
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- 相关机构：同济大学同济大学附属杨浦医院安阳市肿瘤医院更多>>
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- miRNA“封闭海绵”的构建与应用
- 2014年
- 微小RNA是一类非编码的小分子RNA,通过参与基因的转录后水平表达调控,调控机体的多种生理与病理进程。微小RNA(microRNA,miRNA)"封闭海绵"是一类可以封闭特定miRNA的物质。"封闭海绵"通过特定位点与mRNA的3'UTR区结合来发挥封闭微小RNA的作用。现有研究表明"封闭海绵"作为一种新型的研究miRNA的方法在生物体内、外功能丧失研究中均优于目前的反义寡核苷酸抑制剂和基因敲除方法。随着越来越多非编码RNA的发现,"封闭海绵"在研究其功能上有着不可或缺的作用。本研究对近年在"封闭海绵"的构建与应用方面的研究作一综述。
- 李凤李智
- 关键词：基因调控
- RNA解旋酶DDX39对肾透明细胞癌增殖的影响被引量：2
- 2014年
- 目的通过小干扰RNA沉默检测DDX39基因对肾透明细胞癌增殖的影响及其相关机制。方法应用脂质体转染法将DDX39-siRNA转染人肾透明细胞癌786-O细胞,试验设空白对照组、阴性对照组、小干扰RNA转染组(DDX39-siRNA)。应用实时荧光定量PCR和Western印迹法检测DDX39-siRNA的干扰效率;MTT法和平板克隆形成实验检测DDX39对786-O细胞增殖的影响;Western印迹法检测细胞增殖指标PCNA;流式细胞术检测DDX39-siRNA干扰后786-O细胞周期的变化。结果与阴性对照组相比,转染DDX39-siRNA后,786-O细胞中DDX39 mRNA及其蛋白的表达水平明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);DDX39-siRNA干扰后786-O细胞增殖能力受到抑制,克隆形成能力明显下降;S期细胞减少,G2/M期细胞百分比明显增加(P<0.05)。结论 DDX39敲减后可显著抑制肾癌细胞786-O细胞增殖,并阻滞细胞于G2/M期。
- 李凤翁文浩龙吟李智
- 关键词：细胞增殖端粒RNA解旋酶
- TET1对肾癌786-O细胞增殖的影响及其相关机制被引量：3
- 2012年
- 目的:应用小干扰RNA(small interferingRNA,siRNA)沉默TET1(ten-eleven translocation1)基因表达,探索其对人肾癌786-O细胞增殖的影响及其可能的机制。方法:采用脂质体转染法将靶向TET1基因的TET1-siRNA转染人肾癌786-O细胞,实验设空白对照组、阴性对照组和干扰组(TET1-siRNA组)。分别采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测转染TET1-siRNA后,786-O细胞中TET1、SUZ12(suppressor of zeste12)、EZH2(enhancer of zestehomolog 2)和EED(embryonic ectoderm development)mRNA及其蛋白的表达;MTT法和克隆形成实验检测786-O细胞的增殖活性和克隆形成率;FCM检测786-O细胞周期。结果:与空白对照组比较,转染TET1-siRNA后,786-O细胞中TET1 mRNA及其蛋白的表达水平分别下降了(85.13±0.03)%和(56.41±0.09)%,差异有统计学意义(P<0.05);786-O细胞的增殖受到抑制,克隆形成能力明显下降,G0/G1期细胞百分比明显增加(P<0.05);SUZ12 mRNA及其蛋白表达水平下调(P<0.05),EED和EZH2蛋白表达水平变化不明显(P>0.05)。结论:TET1-siRNA可显著下调肾癌786-O细胞中TET1蛋白的表达水平,明显抑制786-O细胞的增殖,并使细胞阻滞于G1期,其机制可能与TET1调控SUZ12的表达,影响其靶基因对PRC2(polycomb repressive complex 2)的招募有关。
- 谢素红翁文浩李智
- 关键词：肾肿瘤细胞增殖RNA干扰TET
- RNA结合蛋白Lsm4对食管癌EC109细胞增殖和迁移的影响被引量：1
- 2014年
- 目的 :探讨干扰Lsm4基因对人食管癌EC109细胞增殖和迁移能力的影响及其可能的机制。方法 :实时荧光定量-PCR法检测26例食管癌及其相应癌旁组织中Lsm4 mRNA的表达。将靶向Lsm4基因的小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)(Lsm4-siRNA)或阴性对照(negative control,NC)(NC-siRNA)转染入食管癌EC109细胞,实时荧光定量-PCR法检测细胞中Lsm4 mRNA的表达,MTT法和平板克隆形成实验检测细胞的增殖和克隆形成能力,Transwell法检测细胞的迁移能力,蛋白质印迹法检测Lsm4、细胞核增殖抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和波形蛋白的表达水平。结果 :食管癌组织中Lsm4 mRNA的表达水平明显高于相应的癌旁组织(P<0.05)。Lsm4-siRNA转染后,EC109细胞中Lsm4 mRNA及其蛋白的表达水平低于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.01);Lsm4-siRNA转染后,EC109细胞的增殖和克隆形成能力受到抑制(P<0.05),而EC109细胞的迁移能力增强(P<0.01)。与阴性对照组比较,Lsm4-siRNA转染组细胞PCNA的表达水平下调(P<0.05),而波形蛋白的表达水平上调(P<0.01)。结论 :食管癌组织中Lsm4 mRNA高表达,Lsm4可能参与调控食管癌EC109细胞的增殖和迁移。
- 龙吟翁文浩李凤原翔李智
- 关键词：食管肿瘤细胞增殖细胞运动
- 长链非编码RNA在肿瘤中的研究进展被引量：2
- 2013年
- 长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)在癌症中的研究崭露头角,研究显示其在肿瘤的形成中具有潜在的促癌或抑癌作用。人们发现lncRNA在不同肿瘤中经常出现异常表达,但其具体的生物学功能大多数至今尚不清楚。越来越多研究者相继报道了一些lncRNA在肿瘤中潜在的功能及其分子机制,提示lncRNA在肿瘤的发生、发展中具有重要作用。
- 谢素红李智
- 关键词：长链非编码RNA肿瘤
