教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-06-0184)
- 作品数：8 被引量：23H指数：3
- 相关作者：贺俊崎郑君芳熊英杨晓梅陈鹏更多>>
- 相关机构：首都医科大学山东省眼科研究所北京大学更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 恐惧记忆相关蛋白的蛋白质组学研究被引量：4
- 2010年
- 应用双向凝胶电泳结合质谱鉴定和数据库检索,分析比较了CD1和C57BL/6J小鼠经条件性恐惧实验后海马蛋白表达的差异,探讨了与恐惧记忆相关的蛋白质.CD1和C57BL/6J小鼠经条件性恐惧实验后,海马蛋白表达存在明显差异,29种蛋白(31个蛋白点)与恐惧记忆的形成显著相关.其中24个蛋白点表达显著上调,7个蛋白点显著下调.与恐惧记忆相关的蛋白按功能可分为如下6类:(1)能量代谢或线粒体功能相关蛋白;(2)神经发育相关蛋白;(3)信号转导相关蛋白;(4)细胞骨架相关蛋白;(5)氨基酸代谢和蛋白分解相关蛋白;(6)伴侣蛋白.这些恐惧记忆形成的相关蛋白深化了对恐惧记忆脑机制的认识,为研究和治疗认知相关疾病提供了新靶标.
- 郑君芳刘华熊英王小柱贺俊崎
- 关键词：海马蛋白质组学质谱
- 雌激素对乳腺癌细胞中PDZK1蛋白表达量的影响被引量：6
- 2009年
- 目的观察雌激素17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)及其抑制剂对雌激素受体(estrogen receptor,ER)阳性的乳腺癌细胞株ER-MDA-MB-231、MCF-7中PDZK1(PDZ domain containing1)蛋白表达量的影响。方法应用Western blotting法观察E2及ICI182,780在不同时间、不同浓度作用下2种细胞内PDZK1蛋白表达量的变化。结果浓度为10-8mol/L的E2作用72h可以使MCF-7、ER-MDA-MB-2312株细胞内PDZK1蛋白表达量显著升高;而抑制剂ICI182,780则相反,以10-6mol/L的浓度作用36h即可明显抑制ER-MDA-MB-231细胞中PDZK1蛋白的表达,且以上变化表现出剂量、时间依赖关系。结论PDZK1是雌激素应答蛋白,它在ER阳性的乳腺癌细胞中的表达受雌激素信号转导通路的调节。雌激素及ICI182,780可能通过调节其蛋白表达量来影响肿瘤细胞的生长和耐药性。
- 王瑛杨晓梅郑君芳陈鹏赵晶晶贺俊崎
- 关键词：雌激素乳腺癌细胞
- EBP50抑制HeLa细胞增殖及基质金属蛋白酶表达
- 2009年
- 郑君芳刘琨马桂伶陈鹏贺俊崎
- 关键词：HELA细胞增殖基质金属蛋白酶蛋白酶表达MMP-9EB细胞迁移
- PDGFRβ与β2-syntrophin蛋白相互作用的初步研究被引量：3
- 2008年
- 目的探索并鉴定β型血小板源性生长因子受体(platelet-derived growth facter recepterβ,PDGFRβ)与PDZ蛋白β2-syntrophin新的结合作用以及该相互作用的分子基础,为进一步研究PDGFRβ相关信号转导通路的调节提供线索。方法制备GST-PDGFRβ羧基端的融合蛋白,通过GST pull-down技术,检测PDGFRβ-CT与β2-syntrophin的PDZ结构域及完整的β2-syntrophin蛋白的相互作用。结果成功构建了重组质粒pGEX-PDGFRβ-CT。在大肠埃希菌中成功表达融合蛋白后,通过体外蛋白质结合实验证实了PDGFRβ-CT与β2-syntrophin的PDZ结构域和兔脑组织中内源性的β2-syntrophin蛋白可以相互作用。结论PDGFRβ-CT与β2-syntrophin之间存在相互作用,该相互作用是由PDGFRβ的羧基末端与β2-syntrophin的PDZ结构域结合而实现的,此结果为研究PDGFRβ介导的下游信号转导通路以及细胞特定调控受体功能的机制奠定了基础。
- 迟锦玉熊英贺俊崎
- 关键词：蛋白质相互作用
- 磷酸化蛋白50(EBP50)——一种新的抑癌蛋白被引量：7
- 2008年
- 磷酸化蛋白50(ERM-binding phosphoprotein-50,EBP50)是由358个氨基酸组成的多功能连接蛋白.EBP50通过其PDZ-Ⅰ、PDZ-Ⅱ和ERM结合结构域与多种蛋白质结合,对PI3K/Akt、PLCβ等生长信号途径及对细胞迁移进行调控.目前有很多证据提示,ebp50是一种新的抑癌基因.在乳腺癌病人临床标本和细胞系中可检测到ebp50基因的杂合性丢失(LOH)和突变,其抑癌作用可能是通过它与多种抑癌蛋白(如抑癌蛋白PTEN、MERLIN和SYK)的相互作用并增强它们的稳定性,并与致癌蛋白结合从而抑制其致癌功能来达到的.通过对其分子结构、调控的信号途径及其与乳腺癌发生、发展的关系进行综述,为乳腺癌的防治提供新线索.
- 郑君芳贺俊崎
- 关键词：抑癌蛋白
- 血管紧张素(1-7)受体mas稳定转染细胞株的构建及mas激活对于ERK1／2信号通路的调节被引量：1
- 2008年
- 背景：近几年有关mas基因与心血管疾病的关系成为研究的热点，但有关血管紧张素（1～7）mas轴在调节心血管功能及在心血管疾病发病过程中发挥作用的信号转导途径还不甚清楚。目的：实验拟构建血管紧张素（1～7）受体mas稳定转染细胞株及mas基因表达和活化对ERKMAPK信号通路的影响。设计、时间及地点：重复测量设计，实验于2006-07／2008-03在首都医科大学生物化学与分子生物学实验室完成。材料：人mas全长cDNA，原核表达载体pEGFPC2，菌株E．coli DH5α，COS-7细胞均由s本实验室保存。方法：将mas cDNA克隆到真核表达载体pEGFPC2中，构建重组质粒pEGFP-mas。再将重组质粒转染COS-7细胞，筛选稳定表达细胞株。主要观察指标：经血管紧张素（1～7）刺激后，检测稳定转染mas的COS-7细胞中ERK磷酸化水平变化。结果：与对照组相比，稳定转染mas的COS-7细胞经血管紧张素（1～7）刺激后，ERK磷酸化水平显著升高（P〈0．05）。p-ERK水平在10min内达到最高值，并且随着血管紧张素（1～7）浓度的增加（10^12～10^-6 mol／L），p-ERK水平逐渐升高。结论：成功构建mas稳定表达细胞模型，并显示出血管紧张素（1～7）受体mas活化可以引起下游ERK1／2信号通路的激活。
- 李延华杨晓梅熊英李积凤殷爱红贺俊崎
- 关键词：MASG蛋白偶联受体
- 根瘤菌参比菌株23S rRNA基因数量和定位及其系统发育群被引量：1
- 2008年
- 为了明确23S rRNA基因数量和定位是否可更好地揭示根瘤菌参比菌株的系统发育关系,采用I-CeuI酶切和脉冲场凝胶电泳(PFGE)结合的方法,对根瘤菌株23S rRNA基因的数量和定位进行分析,并依据其相似性进行聚群.结果显示,根瘤菌参比菌株可聚为19个系统发育群.其中,在属的水平上,13个系统发育群与现行分类群(不包括依据16S rRNA基因序列分析结果)一致,6个不一致.在种的水平上,现行分类群中同种的根瘤菌可进一步细分为不同的系统发育群.这表明:I-CeuI酶切和PFGE结合的方法能从基因组特征角度对根瘤菌参比菌株进行更加细化的系统发育分类,并使其属种间的同质性更好.
- 郑君芳刘桂荣刘树林贺俊崎
- 关键词：根瘤菌RRNA基因系统发育分析脉冲场电泳
- 几种不同提取方法对Hela细胞总蛋白双向电泳结果的影响被引量：1
- 2008年
- 目的比较几种不同的提取方法对Hela细胞总蛋白双向电泳图谱的影响。方法采用反复冻融裂解法、超声加冰浴裂解法、室温振摇及试剂盒纯化法提取Hela细胞总蛋白,进行双向凝胶电泳(2-DE)。以7cmpH3-10NL固相pH梯度胶条做一向等电聚焦,上样量为300μg,SDS-PAGE做二向垂直电泳,改进的胶体考马斯亮蓝染色,ImageMaster2D Platinum软件分析电泳图谱。结果反复冻融裂解法得到的2-DE图谱条纹很多,蛋白点数较少(400±);超声加冰浴裂解和室温振摇法得到的2-DE图谱横向条纹明显减少,蛋白点数明显增加(分别为700±和800±);进一步用试剂盒纯化法得到的2-DE图谱基本上没有蛋白拖尾现象,且加Destreak试剂后蛋白点数有所增加(由800±→900±),但纯化的同时有低丰度蛋白的丢失。结论超声加冰浴裂解和室温振摇法处理细胞,可得到条纹较少、蛋白点数较多较全的2-DE图谱;进一步用蛋白纯化试剂盒和Destreak试剂纯化样品能更好地解决碱性端的横向拖尾,得到较多的蛋白点。
- 孙丽翠胡家郑君芳苏雷贺俊崎
- 关键词：双向电泳蛋白表达谱蛋白提取
