国家高技术研究发展计划(2002AA302202)
- 作品数：8 被引量：76H指数：4
- 相关作者：刘祖黎卢强华姚凯伦习东罗小平更多>>
- 相关机构：华中科技大学华中科技大学同济医学院附属同济医院中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国际科技合作重点项目计划武汉市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生理学一般工业技术电气工程更多>>
- 金纳米颗粒基因探针同步检测HBV和HCV的初步研究被引量：1
- 2009年
- 目的建立一种简单、快速同时检测HBV DNA和HCV RNA的诊断方法。方法利用PCR方法扩增HBsAg阳性合并抗HCV阳性的患者血清中HBV DNA和HCV cDNA并提取。制备Au纳米颗粒HBV DNA、HCV cDNA基因探针。在含有Au纳米颗粒HBV DNA、HCV cDNA基因探针的液相检测体系中加入HBV DNA和(或)HCV cDNA,透射电镜下观察。结果PCR可扩增HBV DNA和HCV cDNA,出现预期的431bp和323bp特异性条带。使用Au纳米颗粒基因探针通过透射电镜可同步检出乙、丙型肝炎合并感染患者血清中提取的HBV DNA和HCV RNA。结论通过透射电镜,使用Au纳米颗粒基因探针可同步检出乙、丙型肝炎合并感染患者血清中的HBV DNA和HCV cDNA,甚至可达到无需PCR水平,此方法具有敏感性高、特异性好的特点。
- 习东罗小平宁琴
- 关键词：肝炎病毒乙型肝炎丙型DNA探针
- Fe_3O_4/CdS纳米复合微粒的合成及性能研究被引量：2
- 2006年
- 用反相微乳液法合成Fe3O4／CdS纳米复合微粒。用UV—Vis、PL、VSM和TEM对产物进行了表征，并对其结合机理进行了简单分析，认为主要以化学键结合和表面类齿轮切合作用所致。还研究了不同的合成条件对复合材料性能的影响。结果表明，随着微乳液水核尺寸增大，荧光发射光谱逐渐红移，同时壳层厚度先增后减。复合材料中磁性组份比重过大会引起荧光的迅速减弱，磁性先驱物与量子点先驱物物质的量比为0．25～0．5时比较合适。
- 刘祖黎彭凌霄卢强华姚凯伦
- 关键词：反相微乳液荧光
- 纳米颗粒在基因治疗中的作用——一种转染基因的新载体被引量：3
- 2004年
- 基因治疗是将DNA转染进入目的细胞,修复遗传错误或产生治疗因子。反义寡核苷酸的应用是基因治疗的主要手段之一。目前利用纳米颗粒作为特异性基因的载体已成为研究的热点。纳米控释系统使转染基因的胞内摄入量增高,增强其稳定性、靶向性及细胞定位。本文就此方面的研究进行了综述。
- 习东宁琴宋存先
- 关键词：基因治疗反义寡核苷酸
- Au纳米颗粒HBV DNA基因探针的制备及其在目视化检测HBV DNA中的应用被引量：6
- 2006年
- 制备金(gold,Au)纳米颗粒乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(hepatitis B virus deoxynucleic acid,HBV DNA)基因探针,研究其在目视化检测HBV DNA中的应用。Au纳米颗粒通过金-硫(Au-S)共价键结合烷氢硫醇修饰的寡核苷酸,制备检测探针。用荧光标记法检测Au纳米颗粒表面寡核苷酸的覆盖率和与其互补的寡核苷酸的杂交效率。检测探针与固定在尼龙膜上的捕捉探针构成双探针,用斑点杂交法检测HBV DNA,加入银离子(Ag+)-对苯二酚液染色观察结果。制备的Au纳米颗粒粒径为(12±5)nm,分散良好,在520nm有最大吸收峰,经寡核苷酸修饰后,最大吸收峰改变为524nm。Au纳米颗粒表面寡核苷酸的最大覆盖率为(132±10)条,最大杂交效率为(22±3)%。在尼龙膜上用斑点杂交法可检出低至10fmol的合成靶DNA,可目视化检出乙肝患者血清中HBV DNA的PCR产物。Au纳米颗粒HBV DNA基因探针可用于目视化检测HBV DNA,此方法具有敏感性高、特异性好、简单、价廉的特点,可望在许多领域,尤其是在多基因检测芯片上有潜在的应用价值。
- 习东宁琴卢强华姚凯伦刘祖黎罗小平
- 关键词：金纳米颗粒基因探针乙肝病毒
- 金纳米颗粒基因探针检测HBV DNA被引量：3
- 2007年
- 目的制备金(gold,Au)纳米颗粒HBV DNA基因探针,通过透射电镜直接检测乙肝患者血清中的HBV DNA,实现不经过PCR扩增检测DNA。方法制备Au纳米颗粒和Au纳米颗粒HBV DNA基因探针,用荧光标记法检测纳米颗粒探针表面寡核苷酸的覆盖数和杂交效率。在检测体系中加入乙肝患者血清中提取的HBV DNA,透射电镜下观察。结果制备的Au纳米颗粒粒径为(10±5)nm,水相分散良好,在520nm有Au特征性的最大吸收峰,经寡核苷酸修饰后,其最大吸收峰改变为524nm。Au纳米颗粒基因探针表面寡核苷酸的最大覆盖数目为(132±10)条,最大杂交效率为(22±3)%。在液相中与HBV DNA反应后,透射电镜下可观察到Au纳米颗粒凝聚成大的聚集体。结论成功制备了Au纳米颗粒HBV DNA基因探针,可直接用于HBV DNA的检测。
- 习东宁琴卢强华姚凯伦刘祖黎罗小平
- 关键词：乙型肝炎病毒金DNA探针
- 超小型Fe_3O_4/Au纳米复合微粒的制备与表征被引量：12
- 2005年
- 用反向微乳液法成功制备了超小型 Fe3O4/Au磁性纳米复合微粒,并利用3 巯基丙酸将复合微粒直接从微乳液分离到有机溶剂中。用 UV Vis、VSM和TEM对产物进行了鉴定与表征,结果表明复合微粒分散良好,平均粒径为 6.7nm,饱和磁化强度为9.7A·m2/kg。
- 刘祖黎彭莉姚凯伦卢强华汪汉斌
- 关键词：纳米复合微粒磁性
- 柠檬酸根对纳米Fe_3O_4颗粒的生长及性能的影响被引量：39
- 2004年
- 现代诊断学的发展使得超小超顺磁性的Fe3O4粒子在医学领域具有重要应用价值。实验中利用某些羧酸盐对铁氧化物晶粒成长的抑制作用,在共沉淀法中引入柠檬酸根,制备出平均粒径小于5nm的Fe3O4纳米分散体系。研究了不同柠檬酸根浓度对生成粒子的大小、结晶和表面吸附情况的影响。对Fe3O4颗粒在不同条件下的磁性与胶体稳定性进行了讨论。
- 汪汉斌刘祖黎卢强华彭丽姚凯伦
- 关键词：磁性颗粒共沉淀法分散性
- Fe_3O_4(核)/Au(壳)纳米颗粒探针的制备及其在检测乙型肝炎病毒DNA中的应用被引量：11
- 2006年
- 目的制备Fe3O4(核)/Au(壳)纳米颗粒乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(hepatitisBvirusdeoxynucleicacid,HBVDNA)基因探针,研究其在检测HBVDNA中的应用。方法分别用枸橼酸还原金氯酸法、化学共沉淀法制备Au、Fe3O4纳米颗粒,二法结合制备Fe3O4(核)/Au(壳)纳米颗粒。通过金-硫(Au-S)共价键,将烷氢硫醇修饰的寡核苷酸结合在Fe3O4(核)/Au(壳)纳米颗粒上,制备纳米颗粒HBVDNA基因探针。用荧光标记法检测纳米颗粒探针表面寡核苷酸的覆盖率和与其互补的寡核苷酸的杂交效率。在尼龙膜上,使用Fe3O4(核)/Au(壳)纳米颗粒基因探针通过斑点杂交法、Ag染色法检测HBVDNA。在纳米颗粒基因探针液相检测体系中加入HBVDNA,透射电镜下观察。结果制备的Fe3O4(核)/Au(壳)纳米颗粒粒径均匀,为(15±5)nm,水相分散良好,具有磁性。Fe3O4(核)/Au(壳)纳米颗粒基因探针表面寡核苷酸的最大覆盖率为(120±8)条,最大杂交效率为(14±2)%。斑点杂交法可检出低至1010copies/ml的合成靶DNA,可目视化检出乙肝患者血清中HBVDNA的PCR产物。在液相检测体系中加入HBVDNA,透射电镜观察到纳米颗粒组装成大的网状结构的聚集体。结论成功制备了Fe3O4(核)/Au(壳)纳米颗粒HBVDNA基因探针,它可直接用于HBVDNA的检测。
- 习东宁琴卢强华姚凯伦刘祖黎罗小平
- 关键词：DNADNA探针
