江苏省医学重点人才培养基金(RC200735)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
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- 发文基金：镇江市科技支撑计划(社会发展)项目江苏省医学重点人才培养基金江苏省“333工程”科研项目更多>>
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- 黏着斑激酶相关性鸟苷三磷酸酶调节因子基因启动子甲基化特异性PCR法的建立与初步应用被引量：1
- 2009年
- 目的建立甲基化特异性PCR(MSP)技术检测黏着斑激酶相关性鸟苷三磷酸酶调节因子(GRAF)基因启动子甲基化。方法设计针对GRAF基因启动子的MSP引物,建立MSP检测体系,对不同DNA模板进行检测,评价方法的特异性、重复性和灵敏度;对10例急性髓系白血病(AML)标本进行检测。结果建立的MSP方法仅能扩增出甲基化阳性模板,不能扩增出未甲基化阳性模板和未硫化处理的DNA模板;检测不同稀释度的甲基化阳性模板,其最大灵敏度可达2%;在不同时间进行MSP检测的结果均一致;对10例AML患者的初步检测发现7例存在着GRAF基因启动子甲基化。结论成功建立了检测GRAF基因启动子甲基化的MSP方法,有良好的特异性、灵敏度和重复性,可用于临床AML标本的批量检测。
- 钱震林江钱军姚冬明王雅丽韩兰秀朱照辉肖高飞
- 关键词：甲基化特异性PCR甲基化
- EvaGreen实时定量PCR检测急性髓系白血病GRAF基因表达被引量：1
- 2010年
- 目的 研究急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）中粘着斑激酶相关性鸟苷三磷酸酶调节因子（GTPase regulator associated with the focal adhesion kinase,GRAF）基因的表达及其临床意义.方法 建立EvaGreen染料法实时定量聚合酶链反应（real-time quantitative PCR,RQ-PCR）,对71例AML患者和21例良性血液病患者中GRAF转录本水平进行检测,分析其临床相关性.结果 所建立的EvaGreen RQ-PCR方法具有良好的特异性、重复性,敏感度达102拷贝/μL.AML患者中GRAF转录本水平（0.01%～169.75%,中位3.82%）较对照组（14.49%～126.85%,中位56.04%）显著降低（P〈0.05）,GRAF基因表达量与患者性别、年龄、外周血白细胞计数、血红蛋白、血小板计数、FAB亚型、染色体核型分组均无相关性（P〉0.05）.结论 AML患者中GRAF基因表达下调,可能与其发病有关.
- 钱震林江钱军姚冬明王雅丽韩兰秀朱照辉肖高飞
- 关键词：急性髓系白血病实时定量聚合酶链反应
- 慢性粒细胞白血病患者HAGE基因启动子的低甲基化被引量：2
- 2012年
- 目的:探讨中国人群慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者螺旋酶抗原(helicase antigen,HAGE)基因启动子的甲基化状况和临床相关性。方法:应用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)技术对50例不同临床分期的CML患者骨髓标本HAGE基因启动子的甲基化状态进行检测。结果:13例(26%)CML患者存在HAGE基因启动子的低甲基化改变,而24例对照均无HAGE基因低甲基化,两组比较差异有统计学意义(P=0.007)。HAGE基因启动子低甲基化改变与CML患者的年龄、性别、白细胞计数、血红蛋白含量、血小板计数、临床分期及染色体异常均无相关性(P>0.05)。慢性期、加速期和急变期患者中HAGE基因启动子低甲基化频率分别为25%(9/36)、25%(1/4)和30%(3/10)(P>0.05)。结论:HAGE基因启动子低甲基化是CML中的常见分子事件。
- 陈芹钱军王翠竹柴海彦杨静李云林江姚冬明马吉春陈星星
- 关键词：慢性粒细胞白血病低甲基化
