新疆维吾尔自治区高校科研计划(XJEDU2010S22)
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
- 相关作者：刘玉张晓英徐佩茹孙光辉多力坤更多>>
- 相关机构：新疆医科大学第一附属医院中南大学更多>>
- 发文基金：新疆维吾尔自治区高校科研计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Wnt／β-catenin信号传导在高压氧诱导新生大鼠离体神经干细胞增殖分化中的作用被引量：2
- 2013年
- 目的探讨Wnt／β-catenin信号传导在高压氧（HBO）治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）中的作用。方法将新生SD大鼠神经干细胞（NSCs）随机分为对照组和8个处理组，处理组分别与正常脑组织匀浆及HIBD大鼠脑组织匀浆共培养，以模拟正常及HIBD时脑内微环境，通过电穿孔方法将β-cateninsiRNA和阴性对照质粒转染预先处理过的NSCs，再给予HBO处理。运用免疫细胞组织化学方法观察HBO对NSCs分化的影响；Westernblot、RT—PCR法观察β-catenin下游基因Ngn1和骨形成蛋白（BMP4）的表达。结果HBO可促进转染阴性对照质粒的NSCs（ncNSCs）分化为神经元和少突胶质细胞，抑制ncNSCs向星形胶质细胞分化；HIBD及正常大鼠脑组织匀浆均可促进ncNSCs分化为神经元及少突胶质细胞，抑制其向星形胶质细胞分化，HIBD大鼠脑组织匀浆的作用强于正常脑组织匀浆，且HBO可加强这一效果；转染β-cateninsiRNA后，NSCs向神经元分化减少，向星形胶质细胞分化增加，这一作用可被HBO减弱，且不可逆转；HBO促进NSCs分化为神经元的同时，Ngnl蛋白和mRNA的表达增加，β-cateninsiRNA促进NSCs分化为星形胶质细胞的同时，BMP4蛋白和mRNA的表达增加。结论HBO可促进离体HIBD大鼠NSCs分化为神经元和少突胶质细胞而抑制其向星形胶质细胞分化；HBO促进离体大鼠NSCs分化为神经元与β-catenin的激活有关；HBO是通过激活β-catenin上调Ngnl的表达促进NSCs分化为神经元，通过下调BMP4的表达减少NSCs分化为星形胶质细胞；BMP4和Ngnl在大鼠NSCs的增殖分化中起重要的协调作用，Ngnl可能是一种潜在的神经元促成剂。
- 张晓英刘玉罗琼徐佩茹多力坤孙光辉
- 关键词：Β-连环蛋白高压氧治疗缺氧缺血性脑损伤电穿孔
- 电穿孔转染SD大鼠神经干细胞条件优化被引量：3
- 2012年
- 目的以原代培养的SD大鼠神经干细胞为研究对象,优化电穿孔转染条件。方法通过设置不同的电压、脉冲时间、电压脉冲时间组合等电转染条件,将表达绿色荧光蛋白(GFP)的靶向大鼠β-catenin基因的siRNA质粒导入SD大鼠神经干细胞,48 h后观察并比较神经干细胞的转染效率,确定最佳电转染条件。结果 300 V电压、60μs脉冲时间或300 V电压、80μs脉冲时间的转染条件下,SD大鼠神经干细胞可获得较好的转染效率,分别为(62.21±11.56)%和(53.34±9.0)%。结论电穿孔转染是一种高效的基因转染方法,通过条件的优化。
- 张晓英罗琼张季红徐佩茹多力坤刘玉孙光辉杨于嘉
- 关键词：神经干细胞电穿孔转染SD大鼠
- 高压氧对缺氧缺血性脑损伤新生SD大鼠神经干细胞增殖分化的影响
- 2012年
- 目的探讨在离体细胞水平下高压氧(HBO)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)时新生SD大鼠神经干细胞(NSCs)增殖分化的影响。方法采用Rice-Vannucci法制成HIBD模型,分别制备正常及HIBD时SD大鼠脑组织匀浆,将传至2～3代的SD大鼠NSCs根据处理的不同随机分为空白对照组(CON组)、与正常脑组织匀浆共培养组(NC+N组)、与HIBD脑组织匀浆共培养组(NC+HIBD组)、与HIBD脑组织匀浆共培养1h后给予HBO处理组(NC+HIBD+HBO组)和与正常脑组织匀浆共培养1h后给予HBO处理组(NC+N+HBO)5组。5组细胞在同一时间行免疫荧光染色,分别进行NSE、GFAP、O4染色,荧光显微镜下计数各组NSCs分化为NSE阳性细胞、GFAP阳性细胞和O4阳性细胞的百分率,并进行比较。结果与CON组相比,NC+N+HBO组、NC+N组、NC+HIBD组分化为神经元和少突胶质细胞的百分比明显增加(P<0.05),其中HIBD组增加最多,在此基础上再给予HBO处理,NSCs向神经元的分化会进一步增加,向少突胶质细胞的分化也相应增加;与CON组相比,NC+N组、NC+HIBD组、NC+HIBD+HBO组分化为星形胶质细胞的百分比明显减少(P<0.05)。结论在离体细胞水平,HBO可促进HIBD大鼠NSCs分化为神经元和少突胶质细胞而抑制其向星形胶质细胞分化。
- 张晓英多力坤.木扎帕尔徐佩茹刘玉孙光辉
- 关键词：高压氧缺氧缺血性脑损伤神经干细胞离体
- 靶向大鼠β-catenin基因的小RNA对离体缺氧缺血性脑损伤大鼠神经干细胞分化及Ngn1、BMP4基因表达的影响被引量：4
- 2012年
- 目的探讨缺氧缺血性脑损伤(HIBD)大鼠神经干细胞(NSCs)修复损伤的可能机制。方法传至2、3代的SD大鼠NSCs随机为空白对照组(未转染质粒者,CON),转染阴性对照质粒组(ncNSCs)和转染β-catenin siRNA真核表达质粒组(siNSCs),分别在不同脑组织匀浆上清液中培养,以模拟HIBD及正常脑内微环境。应用免疫荧光方法观察各组NSCs的分化情况;应用反转录PCR、Western blot法检测NSCs Ngn1,BMP4基因表达情况。结果与CON组比较,ncNSCs分化为神经元和少突胶质细胞的百分比明显增加(Pa<0.05),其中HIBD组增加较多;ncNSCs分化为星形胶质细胞的百分比显著减少(P<0.05)。与CON组相比,siN-SCs分化为神经元的百分比显著减少(P<0.01),分化为星形胶质细胞的百分比显著增加(P<0.01);少突胶质细胞的分化增加,但少于ncNSCs组(P<0.01),其中HIBD组分化为神经元和少突胶质细胞较多。与CON组比较,ncNSCs Ngn1 mRNA和Ngn1蛋白的表达显著增加(Pa<0.01),而BMP4 mRNA和BMP4蛋白的表达均显著减少(Pa<0.01);与CON组和ncNSCs组比较,siNSCs的Ngn1 mRNA和Ngn1蛋白表达显著减少(Pa<0.01),BMP4 mRNA和BMP4蛋白的表达显著增加(Pa<0.01),2个siNSCs组间Ngn1和BMP4的表达差异无统计学意义。结论 HIBD时受损的脑组织可进行自主修复,与β-catenin促进ncNSCs向神经元分化有关,BMP4和Ngn1在HIBD大鼠NSCs的增殖分化中起重要的协调作用。
- 张晓英徐佩茹多力坤刘玉孙光辉
- 关键词：电穿孔转染
