国家自然科学基金(30471618) 作品数:5 被引量:10 H指数:2 相关作者: 张奉春 徐东 刘莉 李鸿斌 张烜 更多>> 相关机构: 北京协和医院 唐山工人医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
抗60000 SSA和52000 SSA抗体与系统性红斑狼疮和干燥综合征相关性的研究 被引量:6 2007年 目的了解抗60000 SSA(Sjogren syndrome Type A,SSA)抗体和抗52 000 SSA 抗体与系统性红斑狼疮(SLE)和干燥综合征(SS)的相关性。方法用免疫印迹(Western-blot)方法检测59例抗 SSA 抗体阳性患者血清,其中 SLE 44例,原发性 SS 15例。结果抗60000 SSA 抗体阳性率在SLE 及原发性 SS 间差异无统计学意义(P>0.05),但单独携带抗60000 SSA 抗体在 SLE 及原发性 SS间差异有统计学意义,SLE 患者单独抗60000 SSA 抗体阳性率为39.47%(15/38),原发性 SS 患者6.67%(1/15);抗52000 SSA 抗体阳性率在 SLE 及原发性 SS 间差异有统计学意义(P<0.05),原发性 SS 患者抗52000 SSA 抗体阳性率为93.33%(14/15),SLE 患者为60.53%(23/38)。抗60000和抗52000 SSA 抗体阳性率在继发性 SS 及原发性 SS 间差异均无统计学意义。结论原发性 SS 患者以抗52000 SSA 抗体为主,单独出现抗60000 SSA 抗体的几率极小。单独抗52000 SSA 抗体阳性可能与原发性 SS 有关,而不利于继发性 SS 的诊断。单独携带抗60000SSA 抗体则以 SLE 为主。 张奉春 刘莉 徐东关键词:干燥综合征 SSA抗原 SSA表位在原发性干燥综合征患者唾液腺中的表达 被引量:1 2010年 目的 探讨60 000相对分子质量SSA表位差异性表达与原发性干燥综合征(pSS)患者唾液腺(MSG)受累的相关性.方法 利用噬菌体抗体展示技术筛选并可溶性表达针对3个SSA抗原表位(P1:480-494,P2:310-323和P3:230-241)特异性单克隆单链抗体(ScFv McAb),免疫组化法(IH)检测不同表位在pSS患者MSG的表达情况,并判断表达程度与MSG炎症是否存在相关性.结果 pSS MSG活检标本P1~P3表位的均有表达,以腺管、泌管上皮细胞胞质和胞膜着色为主.P1表位表达强度高于P2和P3表位(x2=12.94,P<0.01),且仅P1表位表达强度与MSG的炎性浸润程度呈正相关关系(t=2.27,P<0.05).结论 SSA抗原表位在MSG组织异位表达于上皮细胞的细胞膜,从而可能打破免疫耐受,诱导机体产生致病性抗体.P1表位在MSG膜高表达,而且仅P1与MSG炎症存在正相关关系,提示P1表位可能是引发pSS自身免疫应答的关键表位. 李鸿斌 张奉春 张烜 甘晓丹 史艳萍 白依娜 唐福林关键词:表位 抗体 单链抗体 不同表位60000SSA抗原免疫小鼠的反应 被引量:1 2007年 目的了解不同表位60000SSA抗原免疫小鼠后的反应,能否产生相应的抗体及不同的组织损伤。方法用60000SSA的多倍体寡肽抗原(MAPs)免疫小鼠,利用酶联免疫吸附法(ELISA)检测其是否产生了相应的自身抗体。并取其心肝肾等组织器官行病理学及免疫组织化学检查。结果各组小鼠均产生了抗多个表位的抗体.尤其是482~495组小鼠除产生抗482~495MAP抗体外,还对198-210组、212~219组、449~460组MAPs发生了免疫反应。但其余各组小鼠产生的抗体似无明显规律性。佐剂组小鼠及正常小鼠心、肝、肾脏免疫组织化学均呈阴性:482--495组、166~180组、401~411组小鼠心脏免疫组织化学均呈阴性,肝脏免疫组织化学80%呈阳性,部分小鼠肾脏免疫组织化学呈可疑阳性;各组小鼠心、肝、肾脏切片HE染色均未见明显形态学异常,与正常鼠无明显差异。结论MAPs具有免疫原性。经一种MAP免疫的小鼠可以产生对多种MAPs发生免疫反应的多克降抗体。并造成脏器损伤。 徐东 刘莉 佟胜全 张奉春关键词:表位 SSA抗原 抗体 小鼠 60000SSA抗原第230-241表位在系统性红斑狼疮中性粒细胞上的表达及意义 2007年 目的通过对伴中性粒细胞减少的系统性红斑狼疮(SLE)患者周围血中性粒细胞60000SSA抗原第230-241表位表达水平的检测,并与相关的临床指标分析比较,初步探讨这一表达的临床意义。方法用人工合成的60000SSA抗原第230-241表位(E230-241)寡肽,从课题组已成功构建的SSA噬菌体单链可变区(scFv)抗体库中筛选得相应的scFv单抗,用其标记18例伴粒细胞减少的SLE患者和10名正常人周围血中性粒细胞,流式细胞仪比较检测E230-241的表达程度.分析其与中性粒细胞计数、SLE病情活动指数(SLEDAI)、总病程、病情活动时间之间的关系,并比较重症和轻症SLE患者间这一表达程度的差别。结果SLE组患者E230-241的表达明显高于正常人(20±12 VS 7±5,P=0.001)。且表达程度与粒细胞计数呈负相关(r=-0.686,P=0.002),与SLEDAI呈正相关(r=0.665,P=0.003),与病情活动时间呈正相关(r=0.571,P=0.013),与总病程无显著相关性(r=0.114,P=0.651);重症患者的表达程度明显高于病情相对较轻者(31±10 VS 12±8,P=0.001)。结论SLE患者周围血中性粒细胞增强表达E230-241,可能是其粒细胞减少的原因之一。并可能参与SLE其他系统的损害。 帅宗文 张奉春关键词:红斑狼疮 抗原 SSA 表位 中性粒细胞减少 抗SSA表位特异性单链噬菌体抗体的可溶性表达及鉴定 被引量:2 2010年 目的 获得可溶性抗人SSA抗原表位特异性单链抗体(ScFv).方法 以赖氨酸为支架八倍体合成3条相对分子质量为60 000的SSA抗原氨基酸多肽链(MAP):MAP 482~493(P1表位)、MAP 310~323(P2表位)和MAP 230~241(P3表位).以P1~P3表位为包被抗原,富集筛选相应的噬菌体单克隆抗体(McAb);阳性克隆特异性、亲和力和序列分析鉴定;表位特异性McAb可溶性表达和鉴定.结果 5轮筛选后,获得了抗3种表位抗体的含完整插入片断的克隆株,具有较高亲和力和特异性.抗P1~P3抗体融合蛋白与相应表位反应的410 nm吸光度值分别为1.43±0.23、0.82±0.31、0.80±0.25,组间交叉反应差异有统计学意义(P值均小于0.01).其中3个克隆表位特异性McAb-ScFv克隆成功,可溶性表达并纯化.以Hep-2细胞为底物,间接免疫荧光法(ⅡF)检测显示,可溶性ScFv抗体具有在体活性.结论 筛选获得的阳性克隆成功,可溶性表达并具有较好的亲和力、特异性和在体活性,可胜任靶器官的表位表达情况的检测. 李鸿斌 张烜 唐福林 张奉春关键词:抗体 表位 可溶性表达