国家重点基础研究发展计划(G2000057004)
- 作品数：53 被引量：425H指数：12
- 相关作者：王士雯朱庆磊薛桥徐斌钱小顺更多>>
- 相关机构：中国人民解放军总医院中国人民解放军第一军医大学中国医学科学院阜外心血管医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- D-半乳糖致衰老大鼠重要脏器氧化水平和抗氧化能力的变化被引量：7
- 2002年
- 朱庆磊杨薛桥马路徐斌王士雯
- 关键词：半乳糖己糖衰老大鼠抗氧化能力脏器
- 褪黑素对衰老小鼠肺炎时心肌的保护作用
- 2004年
- 目的 了解褪黑素 (MT)对衰老小鼠肺炎时心肌的保护作用。方法 将雄性NIH小鼠 10 0只随机分为两组 :一组以D 半乳糖制作人工老化模型 (D gal组 ) ,另一组以生理盐水作对照 (NS组 )。每组分别分为 4个亚组 (12只 )进行实验 :生理盐水对照组 (NSN ,D galN)、肺部感染组 (NSP ,D galP)、褪黑素 +肺部感染组 (NSM ,D galM)、溶媒 +肺部感染组(NSV ,D galV)。制模后 72h观察心肌线粒体形态改变 ,检测血浆中TNF α、心肌组织中丙二醛 (MDA)、TNF α、ATP含量、总超氧化物歧化酶 (T SOD)和铜、锌超氧化物歧化酶 (Cu ,Zn SOD)活性。结果 肺部感染后小鼠心肌组织中MDA、TNF a含量增加 (NSNvsNSP ,D galNvsD galP ;P <0 .0 5 )T SOD和Cu ,Zn SOD活性、ATP含量降低 (P <0 .0 5 ) ,心肌组织线粒体损伤较多。MT干预可部分抑制上述改变、减少线粒体变性 (NSMvsNSP ,D galMvsD galP ;P <0 .0 5 )。结论 MT通过改善心脏抗氧化功能、降低心肌脂质过氧化、降低血浆和心肌炎性因子含量等作用保护肺炎对人工老化小鼠心脏功能的损害。
- 薛桥卢才义李泱马路徐斌施伟伟
- 关键词：褪黑素衰老小鼠心肌保护血浆
- 急性心肌梗死后心源性休克患者早期发生急性肾功能衰竭与预后的关系被引量：14
- 2004年
- 目的 了解急性心肌梗死后心源性休克患者中早期发生急性肾功能衰竭与预后的关系。方法回顾性分析解放军总医院 1993— 2 0 0 3年因急性心肌梗死或冠心病心绞痛住院、并出现心源性休克患者的临床资料。以 2 4 h内是否出现急性肾功能衰竭为标准 ,比较其住院期间病死率 ;并采用多元 logistic回归分析 ,评估早期发生急性肾功能衰竭对患者预后的影响。结果 172例患者中 ,5 1例 ( 30 % )于 2 4 h内出现急性肾功能衰竭。早期是否发生急性肾功能衰竭患者的住院病死率分别为 90 % ( 4 6 / 5 1例 )和 5 6 % ( 6 8/ 12 1例 )。逐步回归分析表明 ,早期发生急性肾功能衰竭是影响急性心肌梗死后心源性休克患者预后的独立因素 ,相对危险度 ( OR) =6 .7,95 %可信区间为 2 .5～ 18.0 ,P<0 .0 0 1。结论 急性心肌梗死后心源性休克患者 ,早期急性肾功能衰竭的发生与患者住院病死率显著相关 。
- 吴海云王士雯赵玉生许强朱姝
- 关键词：心肌梗死心源性休克预后
- D-半乳糖诱导大鼠肺微血管内皮细胞衰老被引量：4
- 2003年
- 探讨了D-半乳糖(D-galactose, D-gal)诱导的大鼠肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells, PMVECs)衰老与细胞凋亡的关系. 以含D-gal(10 g/L)DMEM培养液培养PMVECs, 经内皮细胞鉴定后, 再通过下述鉴定建立了大鼠PMVECs衰老模型: (1) 约90%的细胞呈现b-半乳糖苷酶活性阳性染色; (2) 流式细胞仪检测可见细胞周期分布变化, 90%细胞停留在G0/G1期, 而S期和G2/M期细胞近于消失. 与未诱导的对照组细胞比较得到如下结果: (1) 荧光显微镜和透射电子显微镜观察, 可见D-gal诱导的PMVECs细胞核染色质浓缩和凝聚, 并可见凋亡小体; (2) 流式细胞仪检测Annexin V/PI双染色的D-gal诱导的PMVECs中, 早中期凋亡细胞明显增加, 其细胞凋亡率为(39.8±2.8)% (对照组为(14.0±3.7)%); (3) PMVECs在衰老终末阶段出现典型的晚期凋亡亚二倍体峰. 实验表明: D-gal可诱导体外培养的PMVECs老化, 从而复制细胞衰老. 经D-gal诱导的衰老PMVECs易发生凋亡, 提示细胞凋亡参与了D-gal诱导细胞衰老的过程.
- 吉瑞瑞张健王士雯廖旭东陈兰英
- 关键词：D-半乳糖肺微血管内皮细胞细胞衰老
- 老年多器官功能障碍综合征肺组织IL-6的变化
- 2007年
- 目的探讨肺组织中IL-6含量及mRNA表达在老年大鼠多器官功能障碍综合征(Multiple organ dysfunctionsyndrome,MODS)中的变化。方法80只SD大鼠分为老年组(20月龄)和青年组(3月龄)各40只,建立油酸/脂多糖(OA/LPS)二次致伤老年MODS和青年MODS模型。观察对照组及伤后2、6、24 h,重要器官(肺、心、肝、肾)病理及功能的变化,通过ELISA方法检测上述组织中IL-6含量,IL-6 mRNA表达用RT-PCR法检测。结果OA/LPS二次致伤MODS模型,肺脏是损害出现最早也是最重的器官,致伤后2 h青年组和老年组PaO2即下降至最低值,伤后6 h,心、肝、肾生化指标达峰值,在相同时相点老年鼠脏器损害重于青年鼠。致伤2h后肺、心、肝和肾组织中IL-6 mRNA表达及蛋白含量均升高,且持续高于正常对照组,以肺组织中升高幅度最大,老年组高于同时相点青年组。结论老年MODS过程中肺损伤出现最早且严重,其原因可能与OA/LPS致伤早期老年鼠肺组织中IL-6 mRNA表达及蛋白含量迅速升高有关。
- 王兴胜吴国明钱桂生徐智陈维中李淑平薛桥王士雯
- 关键词：多器官功能障碍综合征老年大鼠脂多糖白介素-6
- 老龄大鼠肺损伤后肺蛋白质的双向电泳图像分析 提高电泳分辨率、重复性和一致性的技术方法被引量：1
- 2005年
- 目的:经气管灌注脂多糖致老龄大鼠急性肺损伤,应用蛋白质双向电泳技术,观察可提高电泳分辨率、重复性和一致性的双向电泳技术分离急性肺损伤后的老龄大鼠肺组织在蛋白质水平上发生的改变,以探讨蛋白质变化在急性肺损伤发生中可能起到的作用。方法:实验于2003-10/2004-04在全军重点实验室解放军总医院老年心血管病研究所和实验测试中心完成。①选用12只老龄SD大鼠,随机分为2组,每组6只,分别为实验组和对照组。实验组大鼠经气管灌注小剂量脂多糖造成急性肺损伤模型:用1mL无菌注射器接钝头长针在直视下经气管内注入新鲜配制的脂多糖/生理盐水混悬液,用量为0.75mg/kg;对照组动物依同法灌注等量生理盐水。②采用丙酮沉淀法提取肺组织蛋白质,在蛋白样品提取过程中,两组蛋白质组织尽量在相同条件下进行。并保证提取蛋白质的整个过程在低温状态下进行,避免在样品提取过程中发生蛋白变性、降解。其次,提取组织蛋白质时所需裂解液等试剂尽量同一批次配制。再次,应使用蛋白酶抑制剂混合物,以免在蛋白质提取和电泳过程中蛋白质遭到破坏。③对实验组和对照组动物蛋白质提取物行并联双向凝胶电泳,保证了电泳图像较高的一致性和重复性。采用双向凝胶电泳技术和计算机辅助图像分析技术,分析凝胶图像对比和找出差异表达蛋白点。电泳过程中使用预制的宽pH范围的胶条,以提高蛋白质分辨率。结果:进入结果分析老龄大鼠12只,每组6只。①对实验组和对照组大鼠肺组织蛋白质提取物行并联双向电泳,电泳图像显示有较高的一致性和可重复性。②两组肺组织采用双向凝胶电泳根据蛋白质的两个特性将其分离:等电点和分子量。并用考染方法显示了凝胶上蛋白质点的位置和丰度。结果显示这种方法对老龄大鼠肺组织蛋白质达到了很好的�
- 高伟王士雯张国庆李泱刘谟焓赵玉生卢才义
- 关键词：电泳
- Toll样受体4在内毒素血症小鼠心肌TNF-α表达中的作用初探被引量：5
- 2004年
- 目的 内毒素引起的心肌功能损害与内毒素诱导心肌局部肿瘤坏死因子 (tumornecrosisfactoralpha ,TNF α)的产生密切相关 ,然而其信号转导机制尚未完全阐明。Toll样受体 4 (Toll likereceptor 4 ,TLR4 )是新近发现的内毒素受体。本实验旨在探讨TLR4受体在心肌的表达情况及其在内毒素血症小鼠心肌TNF α表达中的作用。方法 以Toll样受体 4基因突变型小鼠C3H HeJ及野生型小鼠BALB C为实验对象 ,给以腹腔内注射内毒素 (1mg kg)或生理盐水。注射生理盐水的小鼠作为对照。用RT PCR方法 ,对两组小鼠心肌TLR4及注射内毒素前后小鼠心肌TNF αmRNA表达进行检测。结果 心肌表面存在TLR4表达。内毒素刺激后 ,野生型小鼠心肌TNF αmRNA表达明显增加 ,而突变型小鼠心肌未检测到TNF α的表达。结论 TLR4介导了内毒素血症时小鼠心肌局部TNF α的表达。
- 程姝娟薛桥王士雯
- 关键词：TOLL样受体4内毒素血症小鼠肿瘤坏死因子LPS
- 心肌梗死后心力衰竭大鼠模型的构建及细胞因子变化被引量：2
- 2008年
- 目的构建大鼠的心力衰竭模型，检测心肌梗死后不同时期血清细胞因子的表达情况，探讨在心力衰竭的发生过程中细胞因子的演变。方法结扎冠状动脉前降支的方法构建大鼠的心肌梗死后心力衰竭模型，在术前及术后4、16周分别进行心脏超声检查及血流动力学监测，对心功能进行评定，并检测相应血清中TNF-α、IL-6的浓度。结果①假手术组应用ELISA法未检测到血清中存在上述两种细胞因子，心力衰竭代偿期TNF-α、IL--6的血清浓度均升高，在心力衰竭失代偿期，尽管仍能检测到TNF-α，但血清水平成明显下降趋势；此时IL-6的血清浓度进一步升高；②在16周时，大鼠的心脏超声与血流动力学检测具有较高的诊断符合率，大鼠心脏超声作为一种无创性的检测手段，可以用于评定大鼠的心脏功能状态。结论①细胞因子的持续升高与心肌梗死后心脏功能的恶化有关，不同的细胞因子浓度变化存在不同的时相，TNF-α的升高早于IL-6，呈一过性增高趋势，后者在体内尤其是血清中增高的持续时间较长，表达在心力衰竭的代偿及失代偿期都升高，但失代偿期增高更明显，IL-6的血清细胞因子浓度与心功能损害的关系更大。②在大鼠的心力衰竭模型构建过程中，心脏超声可以替代血流动力学标准用于心力衰竭模型构建过程中的监测。
- 李彦华王士雯赵栋
- 关键词：心力衰竭细胞因子白细胞介素-6肿瘤坏死因子-Α
- MAPK和NF-κB上调脂多糖诱导的小鼠肺微血管内皮细胞Toll-like受体4的表达被引量：3
- 2006年
- 目的 观察MAPK和NF-κB在经脂多糖（LPS）诱导的小鼠肺微血管内皮细胞（PMVECs）Toll-1ike受体4（TLR4）表达增强中的作用。方法 分离培养PMVECs。不同浓度的LPS与PMVECs共培养2h，或与LPS（100μg/L）作用不同时间。用ELISA法检测培养上清液中TNF-α含量。分别用ERK抑制剂PD98059和P38MAPK抑制剂SB203580或NF-κB抑制剂PDTC进行干预。用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测TLR4和TNF-α mRNA。用Western-blot检测ERK／P38MAPK和核蛋白NF-κB的表达。结果 在LPS浓度为50～500μg／L时，作用于PMVECs 2h，或LPS100μg/L作用不同时间时，培养上清液中TNF-α含量呈剂量和时间依赖性显著增加（P〈0．01）。PMVECs表达TNF-α及TLR4mRNA增加，6h时达高峰。分别用上述抑制剂均可缓解上述变化，而同时联合使用PD98059和SB203580则进一步增强该抑制作用。上述抑制剂分别缓解LPS诱导的PMVECs表达ERK／P38MAPK和NF-κB蛋白增强。结论 MAPK和NF-κB上调给脂多糖诱导的小鼠PMVECs TLR4的表达。
- 余跃杜烨玮贺晶孙仁宇王士雯
- 关键词：脂多糖核因子-ΚB丝裂素活化蛋白激酶
- 阻塞性睡眠呼吸暂停综合征患者炎症因子水平与合并高血压病关系的研究被引量：12
- 2009年
- 目的:观察OSAS患者体内炎症因子的水平与OSAS合并高血压的关系。方法:用PSG检查诊断重度OSAS患者60例,其中32例合并高血压病。用ELISA方法检测OSAS患者血清中TNF-α、IL-6、IL-10的水平。结果:OSAS合并高血压患者TNF-α和IL-6水平均显著高于OSAS患者和正常对照组,而IL-10水平在三组中的水平呈逐渐降低,OSAS合并高血压患者IL-10水平低于OSAS患者和正常对照组。结论:同等严重程度的OSAS患者体内细胞因子水平并不相同,这种差异在高血压的形成方面可能具有重要作用。
- 钱小顺李天志孙宝君刘长庭俞森洋
- 关键词：睡眠呼吸暂停综合征炎症高血压
