南京医科大学科技发展基金(2010NJMUZ59) 作品数:6 被引量:12 H指数:2 相关作者: 刘洁 陈国千 王发龙 韩菲菲 李蕾 更多>> 相关机构: 南京医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 南京医科大学科技发展基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
缺氧对巨噬细胞HMGB1释放的影响及其机制 被引量:2 2012年 目的观察缺氧对巨噬细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)释放的诱导作用,并初步探讨其可能的机制。方法采用巨噬细胞株RAW264.7,观察缺氧培养不同时间对培养上清液中HMGB1含量、细胞HMGB1mRNA表达和HMGB1胞内分布的影响,及不同浓度N-乙酰半胱氨酸对HMGB1释放的抑制作用。HMGB1含量和HMGB1mRNA表达水平分别采用酶联免疫吸附试验、实时荧光定量PCR法检测。结果缺氧培养6h后HMGB1mRNA表达水平已显示增强(P<0.05),缺氧培养12h后培养上清液中HMGB1含量明显升高(P<0.01),且显示HMGB1核浆转移;N-乙酰半胱氨酸对缺氧培养HMGB1释放有剂量依赖性抑制作用。结论缺氧能诱导巨噬细胞释放HMGB1,其机制可能与胞内氧自由基产生有关。 李蕾 韩菲菲 王发龙 刘洁 陈国千关键词:高迁移率族蛋白B1 缺氧 巨噬细胞 重组高迁移率族蛋白B1对肺上皮细胞细胞因子释放的影响及其机制 被引量:5 2012年 目的:观察重组高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)对肺上皮细胞致炎细胞因子释放的影响,并初步探讨其机制。方法:采用BEAS-2B人正常肺上皮细胞,观察1、10、100、1 000μg/L重组HMGB1蛋白对细胞培养上清液中致炎细胞因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素(interleukin,IL)-1β、IL-6含量的影响,及10 mg/L Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)抗体处理对HMGB1诱导致炎细胞因子释放的抑制作用。TNF-α、IL-1β和IL-6含量均采用酶联免疫吸附试验检测。结果:不同剂量重组HMGB1诱导肺上皮细胞12 h后,培养上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6含量均呈HMGB1剂量依赖性升高;100μg/L HMGB1分别诱导肺上皮细胞3、6、12和24 h后,培养上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6含量均呈显著性升高(P<0.05或P<0.01),IL-1β、IL-6含量随诱导时间延长而升高,而TNF-α含量于诱导后6 h达峰值;TLR4抗体处理后TNF-α、IL-1β、IL-6释放均受到部分抑制(P<0.05或P<0.01)。结论:HMGB1对肺上皮细胞释放TNF-α、IL-1β和IL-6具有诱导作用,其机制可能与胞膜TLR4有关。 吴国荣 王发龙 陈文 陈静瑜 刘洁 王琼 赵琪 陈国千关键词:高迁移率族蛋白B1 上皮细胞 TOLL样受体4 细胞因子 脂多糖及缺氧诱导肺上皮细胞释放高迁移率族蛋白B1的研究 被引量:2 2012年 目的研究脂多糖、缺氧对肺上皮细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)释放的诱导作用及其机制。方法采用BEAS-2B人正常肺上皮细胞,分别观察100μg/L脂多糖诱导(脂多糖组)和1%O2缺氧培养(缺氧组)不同时间对细胞培养上清液中HMGB1含量的影响,同时以常规培养作为对照(对照组);并观察不同浓度N-乙酰半胱氨酸对HMGB1释放的抑制作用;HMGB1含量采用酶联免疫吸附试验检测。结果脂多糖组脂多糖诱导6h后,培养上清液中HMGB1含量为(7.4±1.6)μg/L,对照组(2.3±0.6)μg/L,脂多糖组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),并随时间延长而进一步升高;缺氧组缺氧培养12h后,培养上清液中HMGB1含量为(7.1±1.6)μg/L,对照组为(2.1±0.4)μg/L,缺氧组明显高于对照组(P<0.01),同样随时间延长而进一步升高;N-乙酰半胱氨酸对缺氧培养HMGB1释放呈剂量依赖性抑制作用,但对脂多糖诱导的HMGB1释放无影响。结论脂多糖、缺氧诱导肺上皮细胞释放HMGB1,缺氧诱导机制可能与胞内氧自由基产生有关。 李蕾 王发龙 朱旭明 马坚 耿先龙 韩菲菲 刘洁 陈国千关键词:高迁移率族蛋白B1 上皮细胞 缺氧 脂多糖 缺氧诱导人肺成纤维细胞释放高迁移率族蛋白B1 被引量:5 2012年 目的:观察缺氧对人肺成纤维细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)释放的诱导作用。方法:采用HFL1人肺成纤维细胞株,观察缺氧培养不同时间对细胞HMGB1mRNA表达和培养上清液中HMGB1含量的影响,及不同浓度N-乙酰半胱氨酸对HMGB1释放的抑制作用。HMGB1含量采用酶联免疫吸附试验检测。结果:缺氧培养6h后HMGB1mRNA表达水平和培养上清液中HMGB1含量明显升高(P<0.01),后者随着培养时间延长而进一步升高;10mmol/L和100mmol/LN-乙酰半胱氨酸对缺氧培养HMGB1释放有不完全的抑制作用。结论:缺氧能诱导人肺成纤维细胞释放HMGB1,其机制可能与胞内氧自由基产生有关。 刘鸿生 刘洁 韩菲菲 王发龙 李蕾 陈国千关键词:缺氧 高迁移率族蛋白质类 肺成纤维细胞 缺氧诱导肺泡巨噬细胞HMGB1的释放及其可能机制 被引量:2 2011年 目的:研究缺氧对肺泡巨噬细胞高迁移率族蛋白B1(high mobility group box1,HMGB1)释放的作用及其信号通路。方法:采用大鼠肺泡巨噬细胞NR8383,观察不同时间缺氧培养对细胞HMGB1 mRNA表达和培养上清液中HMGB1含量的影响,及不同浓度JAK2抑制剂tyrphostin AG 490和STAT1抑制剂氟达拉滨对HMGB1释放的抑制作用。HMGB1含量采用酶联免疫吸附试验检测。结果:培养上清液中HMGB1含量和mRNA表达水平分别于缺氧培养6、12 h后明显升高(P<0.01),并随缺氧培养时间延长而进一步升高和增强;tyrphostin AG 490和氟达拉滨对缺氧培养肺泡巨噬细胞释放HMGB1有不完全的抑制作用,并呈剂量依赖性。结论:缺氧诱导肺泡巨噬细胞释放HMGB1,JAK/STAT信号通路可能参与其释放过程。 陈爽 李蕾 刘洁 吴国荣 胡志刚 王琼 陈静瑜 陈国千关键词:高迁移率族蛋白B1 巨噬细胞 缺氧 HMGB1诱导肺泡巨噬细胞释放促炎细胞因子 被引量:2 2012年 胞外高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGBl)为近年发现的一种重要炎症介质,参与脓毒症、肺炎、关节炎、急性胰腺炎、缺血再灌注损伤、烫伤等许多疾病的发病过程。诸多体内和体外实验结果表明,组织细胞在外部多种诱导因素如内毒素等刺激后,核内HMGB1基因表达增强,HMGB1向胞外释放增多,但胞外HMGB1的作用机制研究甚少。本研究旨在探讨外源性HMGB1对肺泡巨噬细胞致炎细胞因子释放的影响以及是否通过胞膜Toll样受体4(TLR4)而发挥作用。 王发龙 韩菲菲 王婷婷 陈静瑜 孙伟峰 刘洁 陈国千关键词:高迁移率族蛋白B1 巨噬细胞 TOLL样受体4 细胞因子