国家自然科学基金(31201329)
- 作品数:9 被引量:23H指数:3
- 相关作者:徐杰薛长湖李兆杰王静凤丛培旭更多>>
- 相关机构:中国海洋大学浙江省水产质量检测中心青岛市市立医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技支撑计划海洋公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程理学医药卫生化学工程更多>>
- 海地瓜中神经酰胺类化合物的分离鉴定及其活性研究被引量:2
- 2013年
- 目的:分离、鉴定海地瓜中的一脂类化合物,测定其体外抗肿瘤活性。方法:对海地瓜干粉用氯仿-甲醇-水体系(体积比4∶4∶1)萃取,经连续正反相柱层析分离得到1种脂类化合物。采用IR、ESI-MS、NMR、GC-MS等分析手段对该化合物结构进行表征,并用MTT法检测其对S-180细胞增殖的影响。结果表明:该活性脂质为神经酰胺类化合物系列物,主要由2-氨基-1,3-二羟基-15-甲基-4-十七烯长链碱和5种饱和及单不饱和的脂肪酸构成。MTT试验表明其对S-180小鼠肉瘤细胞的增殖具有较好抑制活性,表现出显著的时间-剂量依赖效应,72h时的IC50值为172.45μg/mL。
- 于槚槚徐杰冯婷玉薛长湖李兆杰
- 关键词:海地瓜神经酰胺抗肿瘤活性
- 邻苯二甲醛衍生高效液相色谱法分析葡萄糖脑苷脂与半乳糖脑苷脂的含量
- 2016年
- 目的在原有邻苯二甲醛(OPA)衍生高效液相色谱法基础上进行优化,探究最优条件,建立同时分离和定量生物组织中的葡萄糖脑苷脂和半乳糖脑苷脂的方法,用此方法测定海参和鼠脑的脑苷脂含量。方法从生物组织中粗提的脑苷脂,在37℃,12 h,p H=5条件下被SCDase酶解,再通过OPA衍生,经过HPLC分离在荧光检测器下检测,以Intersil SIL-100A色谱柱为分离柱确定最佳的色谱洗脱体系为正己烷/异丙醇/100 mmol/L氯化铵溶液(64.3/35/0.7,v/v),选定不同种海参和鼠脑为研究对象同时测定葡萄糖脑苷脂和半乳糖脑苷脂的含量。结果在优化条件下,葡萄糖脑苷脂和半乳糖脑苷脂在10 min内完成分离,Glc Cer和Gal Cer线性范围均为5~2400 ng,定量限为5ng,相关系数〉0.99,方法稳定性良好,在所测样品中,海参葡萄糖脑苷脂含量在0.5~3μg/mg,鼠脑海马体和皮质半乳糖脑苷脂含量差别不大,在4μg/mg左右。该方法可快速、简便、准确地分析生物组织中Glc Cer和Gal Cer的含量,为鞘脂的分析增加了新的途径。
- 宋雨邢培培贾子才李兆杰薛长湖徐杰
- 关键词:高效液相色谱法酶解海参鼠脑
- 海参极性脂质对东莨菪碱致痴呆小鼠学习记忆能力的保护作用被引量:5
- 2016年
- 目的:研究海参极性脂质对东莨菪碱模型小鼠学习记忆能力的影响,探讨其可能的作用机制。方法:将小鼠随机分为4组:正常对照组、东莨菪碱模型组、海参磷脂(SCP)组和海参脑苷脂(SCC)组。各组小鼠喂食正常饲料,SCP组添加0.5%SCP,SCC组添加0.05%SCC,连续喂养7 d。于第8天造模,正常对照组灌胃生理盐水,其余各组腹腔注射5 mg/kg东莨菪碱。采用Morris水迷宫实验测试小鼠的学习记忆能力,连续7 d。行为测试结束后,对小鼠脑组织进行超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乙酰胆碱酯酶(TChe)测定。结果:Morris水迷宫实验中,与模型组小鼠相比,SCP和SCC组小鼠潜伏期均缩短,总路程减少,目标象限停留时间比例增加,穿越平台次数增加;SCP和SCC组小鼠脑组织TChe和MDA相对于模型组明显降低,SOD明显增加。结论:海参极性脂质对东莨菪碱致痴呆小鼠的学习记忆能力具有一定的改善作用,其作用机制可能与抗氧化和提高胆碱能有关。
- 付雪媛刘丰海张铃玉徐杰薛勇薛长湖王玉明
- 关键词:MORRIS水迷宫氧化应激胆碱能
- 叶瓜参鞘脂抑制3T3-L1前脂肪细胞分化及构效关系研究被引量:2
- 2017年
- 目的:探究叶瓜参脑苷脂、神经酰胺、长链碱等鞘脂对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化的影响。方法:由叶瓜参制备脑苷脂、神经酰胺和长链碱,以相同浓度的3种物质或含有等量长链碱的3种物质孵育3T3-L1细胞,采用MTT法检测叶瓜参鞘脂对3T3-L1细胞增殖的影响。利用0.5 mmol/L IBMX,1μmol/L DEX及10μg/m L胰岛素诱导3T3-L1细胞分化为成熟脂肪细胞,采用油红O染色法检测叶瓜参鞘脂对脂肪细胞分化的影响。结果:叶瓜参脑苷脂、神经酰胺、长链碱均能显著抑制3T3-L1细胞的增殖及分化。海参脑苷脂由亲脂性神经酰胺及亲水性糖基两部分组成,而神经酰胺由长链脂肪酸和长链碱以酰胺键相连而成。当3种物质浓度相同时,对3T3-L1细胞增殖分化的抑制率:长链碱>神经酰胺>脑苷脂;而当3种物质含有等量的长链碱时,其作用效果相当。结论:叶瓜参脑苷脂、神经酰胺、长链碱等鞘脂抑制脂肪细胞的增殖分化,其活性成分为长链碱。
- 徐慧徐杰赵延蕾于哲王静凤
- 关键词:脑苷脂神经酰胺脂肪细胞分化构效关系
- 高效液相色谱-蒸发光散射法分析海参脑苷脂和神经酰胺的含量被引量:3
- 2015年
- 目的建立了一种高效液相色谱-蒸发光散射检测方法(high performance liquid chromatography coupled with evaporative light-scattering detection,HPLC-ELSD)同时分析海参中脑苷脂和神经酰胺含量的方法。方法以TSKgel CN-80Ts柱为分离柱,正己烷-异丙醇-二氯甲烷-甲醇为流动相,采用梯度洗脱方式,流速1.0m L/min,漂移管温度50℃,氮气流速2.4 L/min。结果在优化条件下,18 min内完成分离,脑苷脂的线性范围为2.5~250μg/m L,检出限为0.5μg/m L(S/N=3),相关系数R>0.99,神经酰胺的线性范围为5~150μg/m L,检出限为0.05μg/m L(S/N=3),相关系数R>0.99,方法稳定性良好;不同种海参中脑苷脂和神经酰胺含量存在较为明显的差异,含量范围分别为0~4.44 mg/g和0.24~2.21 mg/g。其中,猪参的脑苷脂含量最高为4.44 mg/g,而白底靴参的脑苷脂未能检出。阿拉斯加红参的神经酰胺含量最高为2.21 mg/g,而海地瓜神经酰胺含量最少。结论所建立的方法灵敏、准确、快速,可应用于食品中脑苷脂和神经酰胺的同时定量分析。
- 贾子才徐杰宋雨李兆杰薛长湖
- 关键词:高效液相色谱法蒸发光散射检测法神经酰胺脑苷脂海参
- 冰岛刺参和南非花刺参脑苷脂分子种的比较被引量:4
- 2016年
- 利用高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法(LC-Q-TOF)分析比较冰岛刺参(Cucumaria frondosa)和南非花刺参(Stichopus variegatus)脑苷脂的分子种组成。以氯仿-甲醇(2∶1,V/V)溶液提取,经皂化和SPE净化,在正离子模式下,通过自动二级(MS/MS)方式同时获取脑苷脂分子的一级和二级质谱图。筛取含180Da中性丢失碎片的分子,再结合二级质谱中的长链碱和脂肪酸碎片,确定每种脑苷脂分子的结构。研究表明:一次性从冰岛刺参中分析出56种脑苷脂分子,从南非花刺参中分析出109种脑苷脂分子;南非花刺参含长链碱种类较多,为15种,冰岛刺参含长链碱11种。冰岛刺参脑苷脂中鞘氨醇型长链碱占91.84%,南非花刺参脑苷脂中鞘氨醇型长链碱占85.97%;脂肪酸的组成均为17-25碳的饱和或单不饱和脂肪酸,且以24碳脂肪酸为主。冰岛刺参脑苷脂中2-羟基脂肪酸占总脂肪酸的33.50%,饱和脂肪酸∶单不饱和脂肪酸≈2∶3;南非花刺参脑苷脂中2-羟基脂肪酸占总脂肪酸的76.73%,饱和脂肪酸∶单不饱和脂肪酸≈2∶1。研究结果显示,在抑制肿瘤细胞增长、预防癌症方面南非花刺参脑苷脂较冰岛刺参脑苷脂可能具有更好的生物活性。本研究为不同海参脑苷脂的活性研究和营养评价提供了参考与借鉴。
- 曹建贾子才丛培旭陶素媛李兆杰徐杰薛长湖
- 关键词:脑苷脂
- 超声波辅助消化-石墨炉原子吸收法快速测定海参中总钒和有机钒含量被引量:1
- 2015年
- 建立超声波辅助消化-石墨炉原子吸收法快速测定海参中钒元素的方法。通过单因素试验和正交试验选择适宜超声波消化时间30 min与超声波水浴温度60℃,以及最佳的原子吸收条件(灰化温度900℃、原子化温度2 700℃、灰化时间20 s、原子化时间5 s),实现了海参样品的快速消化,使金属元素快速释放,并成功应用到海参中钒含量的测定。方法加标回收率在94.2%~105.4%之间,检出限为1.44×10-3μg/m L,符合测定要求。在选定的工作条件下测定,结果表明中国南北方产地的仿刺参总钒和有机钒含量分别为0.27~1.43μg/g和0.22~1.08μg/g,具有明显的差异性,并且60.4%~85.7%的钒以有机钒形式存在。14种海参的有机钒分析发现,糙海参有机钒含量最高,达2.56μg/g。海参中的总钒及其有机钒含量受品种、采样地点和环境的影响。超声波辅助消化-原子吸收法测定海参中钒元素快速、稳定,具有较高的实用价值。
- 刘炎峻徐杰周庆新薛勇薛长湖王静凤
- 关键词:钒海参
- 酶法催化制备1-十八烷氧基-2-DHA-3-油酸烷氧基甘油二酯被引量:1
- 2016年
- 研究了两步酶法催化制备1-十八烷氧基-2-DHA-3-油酸烷氧基甘油二酯工艺。首先利用脂肪酶Lipozyme 435催化1-十八烷氧基甘油和DHA乙酯合成1-十八烷氧基-2,3-二DHA烷氧基甘油二酯(DEAG1),然后利用脂肪酶Lipozyme RM IM催化油酸乙酯和DEAG1进行酯交换反应制备1-十八烷氧基-2-DHA-3-油酸烷氧基甘油二酯。通过单因素实验研究了反应温度、反应时间、底物摩尔比和加酶量对酯交换反应的影响,得到了最佳工艺条件。结果表明:在反应时间48 h、DHA乙酯与1-十八烷氧基甘油摩尔比2∶1、加酶量为底物总质量的10%、反应温度50℃条件下,合成的DEAG1含量最高,为75.41%;在反应时间12 h、油酸乙酯与DEAG1摩尔比3∶1、加酶量为底物总质量的7%、反应温度60℃条件下,Sn-3位油酸结合率为30.23%,烷氧基甘油二酯总含量为80.49%。
- 郭永利刘炎峻孙兆敏徐杰王静凤薛长湖
- 关键词:LIPOZYMELIPOZYMERMIM油酸乙酯
- 液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法高通量分析美国红参的脑苷脂分子种被引量:6
- 2014年
- 利用液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法(LC—Q—TOFMS/MS)分析美国红参(Parastichopus californi-cus)脑苷脂的分子种组成。以氯仿-甲醇(2:1,v/v)溶液提取,经皂化和固相萃取柱(SPE)净化后,在正离子模式下。通过自动二级质谱方式同时获取样品脑苷脂分子的一级和二级质谱图。筛取含180Da中性丢失碎片的分子,再结合二级质谱中的长链碱和脂肪酸碎片,确定每种脑苷脂分子的结构。通过该法一次性共分析出123种美国红参脑苷脂分子种;含有的长链碱共18种,其中植物鞘氨醇型与鞘氨醇型长链碱的相对含量比为1:2;脂肪酸为18~25碳的饱和或单不饱和脂肪酸,以24碳脂肪酸为主,2-羟基脂肪酸占58.62%,饱和与单不饱和脂肪酸的相对含量比约为1:3。LC—Q—TOFMS/MS法分析海参脑苷脂分子种的灵敏度高,准确,简便,为海参脑苷脂的构效关系研究及功能食品开发提供理论依据。
- 邢培培徐杰丛培旭王扬何中央薛长湖
- 关键词:脑苷脂