陕西省“13115”科技创新工程重大科技专项(2008ZDKG-65)
- 作品数：6 被引量：20H指数：3
- 相关作者：周洪苏晓霞饶国洲郭昱成王菲更多>>
- 相关机构：西安交通大学西安交通大学口腔医院第四军医大学口腔医院更多>>
- 发文基金：陕西省“13115”科技创新工程重大科技专项国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 体外传代对人脐带间充质干细胞生物学特性的影响被引量：1
- 2015年
- 目的:观察人脐带间充质干细胞(human umbilical cord derived mesenchymal stem cells,h UCMSCs)体外长期传代扩增后形态表型、增殖及分化特性的变化。方法:分别以双酶消化及组织块法分离培养h UCMSCs;细胞传至18代(P18),观察细胞形态、生长曲线、克隆形成、细胞周期、干细胞表型、多向分化能力的变化,全面评测连续传代对h UCMSCs生物学特性的影响。结果:双酶消化结合组织块法可高效分离获得大量h UCMSCs,细胞稳定传代并保持间充质干细胞特性;早期细胞多呈长梭形或纺锤形,至P18时呈多角不定型且细胞体积变大,胞浆增加明显。传代至P18后,h UCMSCs的群体倍增时间增加至60 h以上,绝大多数细胞处于G0/G1期,且成纤维细胞集落形成单位(colony-forming unit-fibroblast,CFU-F)形成降低,克隆集落减小。h UCMSCs可表达且不因持续传代丢失间充质干细胞标记,但仅早期传代细胞表达多能干细胞标记Oct-4及SSEA-4。特异性染色及相关基因表达检测提示P18 h UCMSCs的成脂肪、成软骨及成骨诱导分化能力较早期传代细胞减弱。结论:h UCMSCs是具备高增殖活性和多向分化特性的间充质干细胞群,体外长期传代扩增的h UCMSCs呈现一定的复制性衰老趋势,但不会丢失干性,可稳定表达间充质干细胞特异性表面标记并保持分化活性。
- 苏晓霞廖立金岩周洪
- 关键词：人脐带间充质干细胞增殖分化
- 人脐带Wharton’s Jelly来源间充质干细胞与人牙周膜干细胞成骨分化能力的对比研究被引量：2
- 2017年
- 目的:比较人脐带Wharton’s Jelly来源间充质干细胞(human umbilical cord Wharton’s Jelly-derived mesechymal stem cells,h UCWJMSCs)与人牙周膜干细胞(periodontal mesenchymal stem cells,h PDLSCs)成骨分化能力。方法:体外培养h UCWJMSCs和h PDLSCs。MTT法检测细胞增殖情况;成骨诱导后测定细胞的ALP活性,茜素红染色检测细胞矿化能力,Real-time PCR分析OPN和Runx2基因的表达。结果:hUCWJMSCs增殖能力高于hPDLSCs;经矿化诱导后hPDLSCsALP表达、矿化结节形成高于hUCWJMSCs(P<0.05);Runx2在hPDLSCs中表达高于hUCWJMSCs(P<0.05);而hUCWJMSCs中OPN表达高于hPDLSCs(P<0.05)。结论:h UCWJMSCs、hPDLSCs均具有成骨分化能力,hPDLSCs成骨分化能力较强。
- 黄银莉周洪苏晓霞钟天宇
- 关键词：成骨分化
- 人脐带Wharton's Jelly来源间充质干细胞和人牙周膜干细胞复合PHBHHx、PHBV支架成骨分化能力的体外研究
- 2018年
- 目的:探讨人脐带Wharton's Jelly来源间充质干细胞(h UCWJMSCs)和人牙周膜干细胞(h PDLSCs)复合聚(3-羟基丁酸酯-3-羟基己酸酯)(PHBHHx)、聚羟基丁酸-羟基戊酸酯(PHBV)支架成骨分化的能力。方法:将2种干细胞分别接种在2种支架中,MTT法及粘附率分析2种干细胞和PHBHHx、PHBV的生物相容性;成骨诱导后ALP活性检测、茜素红染色和扫描电镜观察研究两种干细胞在两种支架上的成骨分化情况。结果:2种干细胞与PHBV具有更好的黏附效果及增殖效率(P <0. 05),且h UCWJMSCs组优于h PDLSCs组; h UCWJMSCs和h PDLSCs与PHBV组ALP活性检测、茜素红染色阳性表达明显高于与PHBHHx组; h UCWJMSCs与2种支架组的表达高于h PDLSCs组。扫描电镜显示2种干细胞与PHBV组可见大量矿化基质形成。结论:h UCWJMSCs与PHBV生物相容性和成骨能力优于h PDLSCs组。
- 黄银莉周洪卢晓云苏晓霞钟天宇
- 关键词：PHBHHXPHBV
- 人脐血间充质干细胞的分离培养及成骨诱导活性被引量：6
- 2010年
- 目的:研究人脐血来源的间充质干细胞(HUCB-MSCs)的部分生物学特性,并考察不同血清浓度的培养基对原代细胞生长状况的影响和传代细胞向成骨样细胞分化的能力。方法:分离人脐血单个核细胞,倒置显微镜下观察原代细胞的生长状况和形态特点,并进行不同血清浓度培养的比较研究,免疫组化法测定表型;传代细胞定向诱导并分析细胞的分化情况。实验数据采用SPSS16.0软件包进行处理,方法为重复测量随机区组设计的方差分析。结果:原代细胞培养呈现4种形态;免疫组化染色显示,所有形态的细胞CD34、CD45均呈阴性,CD44、CD105呈阳性;当培养基中血清含量为15%时,体外培养HUCB-MSCs较为适宜;传代细胞可以在体外诱导为成骨样细胞,可见钙化结节及ALP活性水平的变化。结论:HUCB-MSCs原代细胞存活能力较强,但增殖活性略低,能达到稳定增殖的时间较长;4种形态细胞的部分免疫表型具有一致性,可能为HUCB-MSCs的4种亚型;血清浓度控制对HUCB-MSCs原代培养有着重要影响;传代细胞在一定条件下可向成骨样细胞分化。
- 张赫李昂饶国洲周洪
- 关键词：脐血间充质干细胞细胞形态成骨样细胞体外培养
- 脐带间充质干细胞复合β-磷酸三钙生物陶瓷体内外成骨能力的初步研究被引量：5
- 2012年
- 目的:观察人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)和支架材料β-磷酸三钙(β-TCP)生物陶瓷复合的体内外成骨情况。方法:在体外构建hUCMSCs和β-TCP的复合物,将细胞以3×105/mL的浓度接种到支架材料上进行复合体构建,并进行电镜观察、特异性免疫荧光染色、MTT、ALP检测。将复合物植入裸鼠体内,进行成骨能力研究。实验分为3组,即植入单纯β-TCP支架组、植入体外成骨诱导2周的hUCMSCs和β-TCP复合物组、单纯植入体外成骨诱导2周的hUCMSCs组。植入后2个月取出标本,进行大体观察、X线片观察和组织学观察。采用SPSS16.0软件包对实验数据进行重复测量随机区组设计的方差分析。结果:hUCMSCs植入支架4h后,即可见细胞在支架上附着,1周后可见细胞在支架中大量增殖,β-TCP具有一定的骨诱导性。复合物植入裸鼠内2个月,hUCMSCs和β-TCP复合组X线密度最高。HE染色显示,2个月后,hUCMSCs和β-TCP复合组见不规则新骨和血管形成,单纯β-TCP组未见明显新骨和血管形成。Masson染色显示,2个月后,hUCMSCs和β-TCP复合组见大量胶原形成,单纯β-TCP组未见明显胶原形成。VG染色显示,2个月后,hUCMSCs和β-TCP复合组孔隙中有大量类骨质及少量骨陷窝形成,单纯β-TCP组未见类骨质形成。结论:hUCMSCs和β-TCP具有良好的生物相容性,两者构建的复合物在植入裸鼠体内2个月时可见新骨及血管化形成。
- 郭昱成王菲周洪
- 关键词：人脐带间充质干细胞Β-TCP成骨
- 纳米羟基磷灰石/壳聚糖/聚丙交酯支架的体外生物相容性和成骨活性被引量：8
- 2014年
- 背景:研究发现将聚丙交酯、纳米羟基磷灰石或聚丙交酯两两复合后可在一定程度上改善支架的机械性能、生物相容性和对细胞的成骨诱导分化,但离理想的骨组织工程支架材料尚有一定的距离。目的:对比不同配比纳米羟基磷灰石/壳聚糖/聚丙交酯支架的体外生物相容性及生物活性。方法:采用粒子沥滤法制备纳米羟基磷灰石、壳聚糖、聚丙交酯的质量比分别为10∶10∶80、10∶20∶70、20∶10∶70的复合支架。将3组复合支架与人骨髓间充质干细胞进行体外复合培养,绘制细胞在支架上的生长曲线,以RT-PCR检测细胞碱性磷酸酶活性和骨钙素的表达。结果与结论:配比为20∶10∶70复合支架的细胞黏附率明显高于其他两复合支架组(P<0.01),并且复合培养9-27 d的细胞碱性磷酸酶活性、复合培养15-27 d的骨钙素表达明显高于其他两复合支架组(P<0.01),3组细胞的增殖趋势相似。说明配比为20∶10∶70的纳米羟基磷灰石/壳聚糖/聚丙交酯支架具有良好的生物相容性及骨诱导活性。
- 王菲周洪郭昱成苏晓霞饶国洲赵小鹏
- 关键词：生物材料纳米羟基磷灰石碱性磷酸酶
