国家自然科学基金(31271818)
- 作品数：7 被引量：52H指数：3
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- 掷孢酵母类胡萝卜素应答盐胁迫的分子机制研究
- 盐胁迫是自然界中最主要的非生物胁迫之一,限制着生物细胞的正常生长和发育。耐盐胁生物学研究对揭示耐盐调控机制以增强经济作物耐盐性的分子育种改良,具有重要价值。目前有关耐盐生物学的研究大多集中于植物学方面。海洋红酵母由于长期...
- 李春季
- 关键词：盐胁迫
- 文献传递
- 八氢番茄红素脱氢酶的研究进展被引量：6
- 2016年
- 类胡萝卜素是一类超过700种的萜烯基团类不饱和化合物的总称,根据结构可分为胡萝卜素族和叶黄素族,具有较高的营养价值。八氢番茄红素脱氢酶是类胡萝卜素生物合成途径中的首要限速酶,它参与催化无色的八氢番茄红素转变成有色类胡萝卜素,发挥着中心调控作用。不同生物源的八氢番茄红素脱氢酶在功能上呈现多样性,在大多数蓝细菌,藻类和高等植物的类胡萝卜素生物合成途径中,由Crt P,Crt Q和异构酶Crt H或PDS,ZDS和异构酶Z-ISO、Crt ISO共同参与番茄红素的形成,而在大多数微生物中只有Crt I-type一种酶来完成八氢番茄红素的脱氢反应,且根据脱氢步骤的不同分别可生成链孢红素、番茄红素或脱氢番茄红素。本文阐述了不同生物源八氢番茄红素脱氢酶的基因分离与鉴定,功能多样性及表达调控机制等最新研究进展,并进行了进化分析,为八氢番茄红素脱氢酶的深入研究及利用基因工程策略生产类胡萝卜素的应用提供重要信息。
- 李春季李炳学韩晓日
- 关键词：类胡萝卜素八氢番茄红素脱氢酶进化分析
- 出芽短梗霉中α-淀粉酶基因的克隆表达及生物信息学分析
- 2019年
- 为获知出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)α-淀粉酶基因及其功能,为以后的体外功能验证奠定理论基础,对α-淀粉酶基因的克隆及其结构、表达、性质与功能进行了初步分析,采用反转录PCR结合普通PCR技术成功克隆出芽短梗霉α-淀粉酶基因,并对其进行生物信息学分析。结果表明:克隆的出芽短梗霉α-淀粉酶基因cDNΑ的全长1 782bp,编码区长度1 692bp,编码的蛋白质含有563个氨基酸,分子质量约为63.32kDa,理论等电点(pI)为7.24;预测该蛋白是亲水性蛋白,无跨膜结构域,无信号肽切割位点,在47～453个氨基酸存在淀粉酶结构域。α-淀粉酶的二级结构主要由无规则卷曲组成,其中无规则卷曲占47.42%,α-螺旋占27.35%,延伸链占20.06%,β-转角占4.62%。成功克隆α-淀粉酶基因并在各个时段均有表达,在108h表达量最高。出芽短梗霉普鲁兰多糖的产量随培养时间增加而增加,而粘度随着培养时间增加而降低。
- 刘小胖张宁李炳学
- 关键词：出芽短梗霉Α-淀粉酶基因生物信息学
- 出芽短梗霉细胞多形性及影响细胞分化因素探索
- 2019年
- 【背景】出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)是在生活史中有酵母状细胞生长阶段,并合成黑色素的一种黑酵母(Black yeast),具有典型的细胞多形性,可分化形成酵母状细胞(Yeast-like cell,YL)、膨大细胞(Swollen cell,SC)、厚垣孢子(Chlamydospore,CH)、菌丝(Hyphae,HY)、念珠状菌丝(Monilioid hyphae,MH)、有隔膜膨大细胞(Septate swollen cell,SSC)、分生组织状结构(Meristematic structure,MS),其中膨大细胞既可以作为生长的细胞类型,也可分化为其他的细胞类型。出芽短梗霉的形态分化是可调控的,调控因子有pH、温度、营养条件等。【目的】探究不同的氧气浓度、温度、盐浓度、营养水平对出芽短梗霉细胞形态的影响。【方法】利用显微镜、美兰染色等技术观察不同条件对出芽短梗霉细胞形态的影响。【结果】在完全无氧的试管底部菌体不能生长;在高层半固体表层(高氧气浓度),酵母状细胞(YL)在营养丰富的生长初期出芽繁殖,在养分匮乏的培养后期诱导酵母状细胞(YL)经过膨大细胞(SC)形成厚垣孢子(CH)并合成黑色素;在营养丰富的生长初期,半固体试管浅表层和中间层(微好氧)低浓度氧气诱导YL经过SC形成HY侵入性生长。养分差异对菌体细胞多形性分化影响显著,环境适宜养分丰富(Yeast extract peptone dextrose medium,YPD),以YL生长,不需要分化成HY;环境适宜养分不丰富(Potato dextrose agar,PDA),分化成SC或HY以适应或逃离环境;环境不适宜养分匮乏时(Malt extract agar,MEA),SC或HY分化成CH或MH进入休眠阶段。10%NaCl胁迫降低菌体生长速度,抑制色素合成、HY和MH的形成,并且细胞主要以YL生长繁殖。在相同质量浓度(10%)的KCl或Na2SO4渗透胁迫条件下,细胞多形性表型均为YL发达,HY及MH被抑制,说明高渗胁迫阻止了酵母状细胞向菌丝和厚垣孢子的分化。温度实验中,SC比YL耐高温,MS比SC耐高温。【结论】营养状态对出芽短梗霉细胞
- 刘小胖王红岩张宁李炳学
- 关键词：出芽短梗霉细胞分化
- 酶法合成功能性低聚糖被引量：3
- 2017年
- 功能性低聚糖具有无毒、无残留、稳定性强等特点,作为新型绿色添加剂被广泛应用在食品、饲料、医药行业。国际市场上10余种低聚糖产品中除大豆低聚糖、棉籽糖外,主要采用酶法制备。用于合成功能性低聚糖的酶包括糖苷酶、糖基转移酶和磷酸化酶。本文综述了功能性低聚糖种类、性质和制备方法,分析了酶法合成低聚糖的优缺点,阐述了磷酸化酶种类、催化特性和低聚糖产物。多酶法合成策略和目标酶的分子改造将是酶法合成功能性低聚糖的发展方向。
- 李炳学牛菲张宁
- 关键词：功能性低聚糖酶法磷酸化酶
- 出芽短梗霉膨大细胞分选及产糖分析被引量：1
- 2021年
- 本研究运用Percoll密度梯度离心的方法对出芽短梗霉Aureobasidium pullulans的两种细胞形态进行分选,并对两种形态的细胞进行多糖产量的分析。通过对转速、分选时间、Percoll分离液浓度的优化,确定了两种细胞形态分选效果最佳的条件是Percoll分离液浓度为60%、转速为5000r/min、离心时间为30min。经过光学显微镜和透射电子显微镜观察发现上层为酵母状细胞(YL)、下层为膨大细胞(SC),并发现膨大细胞外有明显的薄膜包被,且产大量多糖。也为今后在相应状态下研究出芽短梗霉膨大细胞的其他代谢机理提供了可行的方法,满足后续研究的需要。
- 马昕张宁刘小胖曾楠李炳学
- 关键词：出芽短梗霉密度梯度离心细胞分选
- 耐酸耐胆盐乳酸菌的鉴定及筛选被引量：39
- 2015年
- 从自然发酵的酸奶中分离出2株细菌,经16S rDNA分子鉴定为Lactobacillus plantarum SN1和Lactobacillus rhamnosus SN6,并对其生长曲线、产酸速率、耐酸耐胆盐能力进行了研究。L.plantarum SN1和L.rhamnosus SN6在2 h后进入对数期,16 h后达到稳定期,其OD_(600nm)值分别为8.47、7.43。L plantarum SN1和L.rhamnosus SN6的产酸速率较快,pH值在8 h后就降到了4.2以下,48 h后降到3.3左右。L.plantarum SN1和L.rhamnosus SN6在pH 4的培养基培养16 h后,其相对OD_(600nm)值分别为49.29%、47.14%,具有较强的耐酸能力。L.plantarum SN1和L.rhamnosus SN6在0.3 g/L胆盐质量浓度下培养16 h后,相对OD_(600nm)值分别为57.7%、69.48%;在0.6 g/L胆盐质量浓度下的相对OD_(600nm)值分别为48.22%、29.56%,具有较强的耐胆盐能力。结果表明:L.plantarum SN1和L rhamnosus SN6是生长性能好、产酸能力强、耐酸耐胆盐的益生菌株。
- 李利孔丽张宁赵伟超肖亦农李炳学韩晓日
- 关键词：乳酸菌RDNA序列分析
- Aureobasidium pullulans UVMU3-1产耐热性胞外漆酶活性物质培养基优化及其对染料脱色作用被引量：3
- 2015年
- 对出芽短梗霉无色素突变株Aureobasidium pullulans UVMU3-1产耐热性胞外漆酶活性物质培养基进行优化,并研究其分子量大小、热稳定性及对三苯甲烷类染料孔雀石绿和结晶紫的脱色作用.结果表明:蔗糖、NaNO_3为UVMU3-1产耐热性胞外漆酶活性物质的最佳碳源和氮源,产酶优化培养基配方为:蔗糖66.5 g·L^(-1),NaNO_338.4 g·L^(-1),NaCl 1.08 g·L^(-1),酵母浸粉0.2 g·L^(-1),KH_2PO_41 g·L^(-1),pH=6.0.影响UVMU3-1产耐热性胞外漆酶活性物质的因素依次为:起始pH>蔗糖>NaCl>NaNO_3,培养7 d时产生最大酶活(94.81 U·L^(-1)),比对照提高3.85倍.其分子量小于1000 D,具有良好的热稳定性,煮沸30 min后高温酶活仍残留72.50%.粗酶液(7.5 U·L^(-1))与三苯甲烷类代表性染料孔雀石绿和结晶紫75℃反应5 min后,脱色率分别为76.3%、77.5%,反应35 min后脱色率分别达到96.3%、95.3%.
- 孔丽米晓春耿圆圆林超王金鹏李利李炳学张宁
- 关键词：出芽短梗霉耐热性染料脱色
